使用干扰素治疗严重急性呼吸综合征及其他病毒感染制造技术

该发明专利技术提供了一种治疗患严重急性呼吸综合征（ＳＡＲＳ）患者的方法，包括给予该患者能有效减少患者中ＳＡＲＳ相关的冠状病毒颗粒浓度的量的干扰素多肽，从而治疗该患者。该发明专利技术也提供了治疗感染某些病毒的患者的方法和降低患者病毒感染风险的方法，包括给予该患者干扰素多肽。该发明专利技术进一步提供了一种治疗流感患者或降低患者流感病毒感染风险的方法，包括给予该患者干扰素多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用干扰素治疗严重急性呼吸综合征及其他病毒感染的制作方法本申请要求2003年5月23日提交的美国临时申请号60/473,134的优先权，其内容在此并入本申请中作为参考。在本申请全文中提到了许多参考文献，这些参考文献其各自内容在此并入本申请中作为参考。
技术介绍
众所周知干扰素(IFN)是一个由多种真核细胞在暴露于各种刺激下分泌得到的细胞因子家族(Zoon KCHuman InterferonsStructure and Function.p.1-12.于Interferon 8.AcademicPress，London，1987；Walter等，Cancer Biotherm Radiopharm1998年6月；13(3)143-54；Pestka，S.，Biopolymers 2000；55(4)254-287；Pestka，S.，Methods in Enzymology，78，1981；Pestka，S.，Methods in Enzymology，79，1981；Pestka，S.，Methods in Enzymology，119，1986)。已根据干扰素的化学和生物特性对其进行分类。干扰素分为两类，称为I型干扰素和II型干扰素(Pestka，S.；Langer；J.A.；Zoon，K.C.；Samuel，C.E.AnnRev Biochem 1987，56，727-777；Pestka，S.，Biopolymers 2000；55(4)254-287)。也已知作为免疫干扰素的IFN-γ是唯一的II型干扰素，而I型人干扰素则由五类干扰素IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-κ和IFN-τ组成。仅有一种人IFN-β和一种人IFN-ω，但IFN-α家族存在多种。仅在有蹄类动物中发现IFN-τ；不存在人IFN-τ。IFN具有抗病毒、免疫调节和抗增殖活性。业已认识到干扰素的临床应用潜力。Isaacs和Lindenmann发现了干扰素(Proc.Royal Soc.London，Ser B 147，258，1957)。对人白细胞干扰素纯化和鉴定的研究业已获得了来自正常或白血病(慢性骨髓性白血病或“CML”)供体白细胞的同型白细胞干扰素制备物(现称为IFN-αs)(Pestka，S.，Biopolymers 2000；55(4)254-287；Rubinstein，M.；Levy，W.P.；Moschera，J.A.；Lai，C.-Y.；Hershberg，R.D.；Bartlett，R.T.；Pestka，S.Arch Biochem Biophys 1981，210，307-318)。同型成纤维细胞干扰素(现称为IFN-β)也纯化均一(Friesen，H.-J.；Stein，S.；Evinger，M.；Familletti，P.C.；Moschera，J.；Meienhofer，J.；Shively，J.；Pes tka，S.Arch Biochem Biophys1981，206，432-450)。这些干扰素是具有能有效赋予其靶细胞抗病毒状态特征的蛋白家族。此外，干扰素可抑制细胞增殖、调节免疫应答并改变蛋白表达。这些特性提示白细胞干扰素在临床上可作为治疗剂用于治疗病毒感染和恶性肿瘤。在过去几十年中，已生产、鉴定、纯化并克隆得到许多人和动物干扰素。一些干扰素制备物以粗制及纯化的形式已用于临床试验。业已克隆并表达得到几种重组IFN-α。然后通过不同方法纯化蛋白并配制为多种剂型用于临床应用。大多数临床应用的干扰素已经全世界多个管理机构批准，其为人α干扰素(Hu-IFN-α)的混合物或单一种。在一些国家中，Hu-IFN-β和γ也已批准用于临床试验，并在某些情况下也批准用于治疗应用。支持这些干扰素临床应用的主要论点是它们为正常个体所产生的天然分子。实际上，该具体论点是，所有为临床应用所制备的干扰素皆为其天然或重组产生的产品，代表了正常人所自然产生的干扰素。这对于大多数干扰素以及特定的生长因子、淋巴因子、细胞因子、激素、凝血因子及其他已制备的蛋白来说是正确的。专利技术概述本专利技术提供了包含编码干扰素多肽至少一部分的多核苷酸的核酸，所述干扰素多肽包括示于SEQ ID NO2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86至少之一的氨基酸序列或其片段。因此，本专利技术的一方面提供了多核苷酸，所述多核苷酸包含选自由(a)编码包括这些SEQ ID NOs至少之一中的氨基酸序列的干扰素多肽的核苷酸序列；(b)编码示于这些SEQ ID NOs至少之一的多肽的生物学活性片段的核苷酸序列；和(c)与上述(a)或(b)中任何核苷酸序列至少之一互补的核苷酸序列组成的组的核苷酸序列。本专利技术另外的实施方案包括核酸，所述核酸包含具有与上述(a)、(b)或(c)中任一核苷酸序列至少95％同一性，更优选至少96％同一性，还更优选至少97％同一性，甚至更优选至少98％同一性，以及更优选至少99.25％同一性的核苷酸序列的多核苷酸；或在严格杂交条件下与上述(a)、(b)或(c)中多核苷酸杂交的多核苷酸，以及优选地与示于SEQ ID NO1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83或85至少之一的多核苷酸杂交的多核苷酸。所述片段包括干扰素多肽的生物学活性片段。SEQ ID NOs.1-26是猫干扰素序列。SEQ ID NOs.27-36是猕猴干扰素序列。SEQ ID NOs.37-86是人干扰素序列。“严格杂交条件”规定为包括严格洗涤条件，本领域技术人员应能确定这样高的条件，例如低盐和高温。低盐的例子是0.1 X SSC。高温的例子是65-68℃。一个实施方案包括在42℃下在包含50％甲酰胺、5 x SSC(150mM NaCl、15mM柠檬酸三钠)、50mM磷酸钠(pH7.6)、5 x Denhardt氏溶液、10％葡聚糖硫酸酯及20μg/ml变性的已剪切鲑精DNA的溶液中温育过夜，接着在约65℃下在0.1 x SSC中洗涤滤纸。当在此使用时，“高严格”也指如下条件(i)在杂交后用低离子强度及在高温下洗涤，例如，在50℃下在0.1 x SSC和0.1％(w/v)SDS中洗涤；(ii)在杂交过程中使用这样的条件以致于杂交温度为比杂交的多核苷酸的双链解链温度低25℃，例如在65℃下在1.5xSSPE、10％(w/v)聚乙二醇6000、7％(w/v)SDS、0.25mg/ml断裂的鲱精DNA中杂交；或(iii)例如，在70℃下在0.5M磷酸钠，pH 7.2、5mM EDTA、7％(w/v)SDS(28)和0.5％(w/v)BLOTTO中杂交；或(iv)在杂交过程中使用诸如甲酰胺的变性剂，例如，在42℃下使用50％(v/v)甲酰胺、5 x SSC、50mM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗病毒感染的受试者或减少该受试者病毒感染风险的方法，包括给予受试者干扰素多肽从而治疗了病毒感染的受试者或减少了受试者病毒感染的风险，所述多肽包含与ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４或８６之一具有至少９５％同一性的氨基酸序列，且不是天然存在的干扰素等位基因，其中病毒选自：严重急性呼吸综合征相关的冠状病毒、流感病毒、冠状病毒、天花病毒、牛痘病毒、西尼罗河病毒、痘苗病毒、呼吸道合胞体病毒、鼻病毒、动脉炎病毒、线状病毒、微小核糖核酸病毒、呼肠孤病毒、逆转录病毒、乳多空病毒、疱疹病毒、痘病毒、肝脱氧核糖核酸病毒、星状病毒、柯萨奇病毒、副粘病毒、正粘病毒、埃可病毒、肠道病毒、心病毒、披膜病毒、棒状病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、博尔纳病毒、腺病毒、细小病毒和黄热病病毒。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-5-23 60/473,1341.一种治疗病毒感染的受试者或减少该受试者病毒感染风险的方法，包括给予受试者干扰素多肽从而治疗了病毒感染的受试者或减少了受试者病毒感染的风险，所述多肽包含与SEQ ID NO2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84或86之一具有至少95％同一性的氨基酸序列，且不是天然存在的干扰素等位基因，其中病毒选自严重急性呼吸综合征相关的冠状病毒、流感病毒、冠状病毒、天花病毒、牛痘病毒、西尼罗河病毒、痘苗病毒、呼吸道合胞体病毒、鼻病毒、动脉炎病毒、线状病毒、微小核糖核酸病毒、呼肠孤病毒、逆转录病毒、乳多空病毒、疱疹病毒、痘病毒、肝脱氧核糖核酸病毒、星状病毒、柯萨奇病毒、副粘病毒、正粘病毒、埃可病毒、肠道病毒、心病毒、披膜病毒、棒状病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、博尔纳病毒、腺病毒、细小病毒和黄热病病毒。2.权利要求1的方法，其中干扰素多肽包含选自SEQ ID NO2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84和86的氨基酸序列。3.权利要求1的方法，其中干扰素多肽为核酸所编码，该核酸包含选自SEQ ID NO1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83和85的核苷酸序列。4.权利要求1的方法，其中干扰素多肽为核酸所编码，该核酸在高严格条件下与包含选自SEQ ID NO1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83和85的序列的核酸杂交。5.权利要求1的方法，其中干扰素多肽为核酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：S佩斯特卡，TB拉瓦，WA克拉克，
申请(专利权)人：佩斯特卡生物医疗实验室公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]