人ＧＭ－ＣＳＦ抗原结合蛋白质制造技术

提供了与人ＧＭ－ＣＳＦ蛋白质结合的抗原结合蛋白质。还提供了编码抗原结合蛋白质的核酸、和编码其的载体和细胞。抗原结合蛋白质可以抑制ＧＭ－ＣＳＦ与ＧＭ－ＣＳＦＲ结合，抑制ＧＭ－ＣＳＦ诱导的髓系细胞系增殖和信号传递，并且抑制ＧＭ－ＣＳＦ诱导的人单核细胞活化。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人GM-CSF抗原结合蛋白质与相关申请的交叉参照本申请要求于2008年8月8日提交的美国临时申请序列号61/087，551、和于2007年9月18日提交的美国临时申请序列号60/994，343的利益，本文依赖所述申请的公开内 容并且通过引用将所述申请的内容并入本文。背景粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF ；CSF2)是充分研究的蛋白质，长期以来已 认识到其造血性质(即刺激髓系(myeloid lineage)的祖细胞增殖和分化以及成熟细胞增 殖)(在 Blood 77 :1131，1991；Rev Infect Dis 12 :41，1990 ；Med.Oncol. 13 :141，1996 中 综述)。GM-CSF通过肺上皮细胞和肠的Paneth细胞组成性产生(BBRC312 :897，2003)，但广 泛多样的细胞在活化后表达GM-CSF，其中占优势的表达来自T细胞、巨噬细胞/单核细胞、 成纤维细胞和内皮细胞(J Infect Dis 172 1573，1995 ；J Infect Dis 185 1490，2002 ;J Allergy CinImmunol 112:653,2003)。GM-CSF 受体(GM-CSFR ;CSFR2)由两种蛋白质的异 源复合物组成对于GM-CSF特异的高亲和力α多肽，以及由GM-CSF、IL-3和IL-5共享的 低亲和力共有 β 多肽(在 J AllergyCin Immunol 112 653,2003 ；Cytokine and Growth Factor Reviews 12 :19，2001中综述)。GM-CSFR在髓系的所有细胞上表达。GM-CSF通过介导信号来增加先天性免疫系统的活性，所述信号引起或实现髓系细 胞的分化、存活、增殖和活化，所述髓系细胞包括巨噬细胞/单核细胞、树突细胞(DCs)、嗜 中性粒细胞和嗜酸性粒细胞(在 J Immun 143 1198,1989 ；Rev Infect Dis 12:41,1990; Blood77 1131,1991 ；Trends in Immun. 23 403,2002 ；Growth Factors22 :225，2004 中综 述)。GM-CSF是用于体外产生单核细胞衍生的DCs和1型巨噬细胞的重要因子(PNAS 101 4560，2004)，并且已显示在体内诱导DCs的分化和活化(Blood 95 :2337，2000)。在GM-CSF 的存在下产生的人单核细胞衍生的巨噬细胞(1型巨噬细胞)产生高水平的促炎细胞因子， 例如IL-23，而不是IL-12，而在M-CSF(CSFl)的存在下产生的2型巨噬细胞产生抗炎细胞 因子，例如 IL-10,而不是 IL-23 (PNAS 101 :4560，2004)。用GM-CSF刺激的人单核细胞或巨噬细胞具有增加的功能，包括细胞毒性、其他促 炎细胞因子(IL-IiKTNFa和IL_6)的产生和吞噬作用。基于这些作用，近期已付出许多 努力以开发作为有效佐剂用于在传染病中使用或伴随疫苗施用的GM-CSF(在Eur J Clin MicrobiolInfect Dis. 13: :S47,1994 ；Curr Opin Hematol. 7 168，2000 中综述)。事实 上，在某些临床环境中，rhGM-CSF的施用极大改善真菌感染的结果和清除(Eur J Clin Microbiol Infect Dis 13 :S18，1994 ;J Med Microbiol47 :1998)。小胶质细胞是CNS的驻留巨噬细胞，并且来自体外研究的数据指出GM-CSF是关 键细胞因子，其增强胎儿和成人小胶质细胞的存活、活化、增殖且甚至分化(Glia 12:309， 1994 J Immunol Methods 300 :32，2005)。此外，存在来自小鼠MS模型研究的几个报告，其 提供关于在CNS血管周间隙中的APCs(小胶质细胞或DCs)对于疾病起始和持续的关键作 用的证据(Nat. Med. 11 146, ,2005 ；Nat. Med. 11 328,2005 ；Nat. Med. 11 :335，2005)。小胶 质细胞的GM-CSF刺激上调MHCII且增强抗原呈递。仅最近确定GM-CSF在疾病中作为促炎细胞因子的作用，和作为造血生长因子的 可省略性(在 Trends in Immun. 23 403,2002 ；Growth Factors 22 225,2004 中综述)及 其在引起或增强炎性/自身免疫疾病中的作用。在多发性硬化症(MS)、类风湿性关节炎(RA)、哮喘、牛皮癣、特应性皮炎和肉样瘤 病中的炎症局部部位处已观察到升高水平的GM-CSF。GM-CSF的升高一般无法在血清中观 察到，因此测定疾病关联需要靶组织的分析。在MS中，执行2项临床研究，其中在来自伴随 活动性疾病(在组织收集2周内的新症状或现有症状的恶化)的复发-缓解(RR)MS患者的 脑脊髓液(CSF)和血清中，通过ELISA测量GM-CSF蛋白质水平，并且与具有稳定疾病(前 6个月无发作)或其他神经疾病(OND)对照的RRMS患者比较(Eur Neurol 33 :152，1993 ； Immunopharmacol. Immunotoxicol. 20 :373，1998)。重要的是，OND 对照不包括阿尔茨海默 病或血管性痴呆患者，因为在此种患者的CSF和血清中报告高度增加水平的GM-CSF(Acta Neurol Scand 103:166,2001)。 GM-CSF水平在低Pg范围中，但与稳定性疾病CSF比较，在RRMS活动性疾病CSF中 明显更高，并且与OND CSF比较，在MS活动性疾病CSF中明显更高。此外，与稳定性疾病比 较，在活动性疾病的CSF中存在更高水平的TNF-α，并且与稳定性疾病比较，在活动性疾病 的CSF中存在更高水平的TGF-β和IL-10。研究包括就患者正在进行的治疗和活动性与稳 定性疾病比较的临床确诊而言的非常谨慎的选择标准，以及样品收集的同步性。有趣的是， 在任何组之间的血清中不存在GM-CSF水平的显著差异。此外，一项研究观察到在MS病变的 星形细胞中而不是对照CNS白质中GM-CSF的选择性免疫组织化学检测(η = 3个MS供体， Glia 12 :309，1994)。最后，活化T细胞和单核细胞/巨噬细胞在炎症应答过程中在活化后 能够产生大量GM-CSF。存在关于这些细胞类型在MS病变(Ann Neurol. 47 707, 2000)、和 关于T细胞在CSF中(在Curr. Neurol. Neurosci. Rep. 1 :257，2001中综述)存在的大量证 据。除GM-CSF表达与MS的关联外，存在关于其他炎性/自身免疫疾病的大量疾病关 联数据和甚至关于施用外源GM-CSF疾病加重的某些证据。在RA中，与OA比较(生物测定， Clin. Exp. Immunol. 72 :67，1988)以及与非 RA 对照比较(生物测定，Rheumatol Int. 14 177，1995)，已在RA或牛皮癣关节炎(PsA本文档来自技高网...

【技术保护点】
结合ＧＭ－ＣＳＦ的经分离的抗原结合蛋白质，其包括：Ａ）选自下组的一个或多个重链互补决定区（ＣＤＲＨｓ）：（ｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、２２、７０９４和１４２的ＣＤＲＨ１；（ｉｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、２３、２８、３５、４７、５９、７１、９５、１０６、１１９和１４３的ＣＤＲＨ２；（ｉｉｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：１２、２４、３６、４８、６０、７２、８３、９６、１０８、１２０、１３２和１４４的ＣＤＲＨ３；和（ｉｖ）包含一个或多个氨基酸取代、缺失或插入的（ｉ）、（ｉｉ）和（ｉｉｉ）的ＣＤＲＨ，所述氨基酸取代、缺失或插入不超过４个氨基酸；Ｂ）选自下组的一个或多个轻链互补决定区（ＣＤＲＬｓ）：（ｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：４、１６、３０、４０、５２、６４、８８、１００、１０７、１１２、１１８、１２４、１２５和１３６的ＣＤＲＬ１；（ｉｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：５、１７、２９、３４、４１、６５、７７、１０１、１１３、１３０、１３１和１３７的ＣＤＲＬ２；（ｉｉｉ）选自ＳＥＱＩＤＮＯ：６、１８、４２、４６、６６、７８、８４、８９、９０、１０２、１１４、１２６和１３８的ＣＤＲＬ３；和（ｉｖ）包含一个或多个氨基酸取代、缺失或插入的（ｉ）、（ｉｉ）和（ｉｉｉ）的ＣＤＲＬ，所述氨基酸取代、缺失或插入不超过４个氨基酸；或Ｃ）Ａ）的一个或多个重链ＣＤＲＨｓ和Ｂ）的一个或多个轻链ＣＤＲＬｓ。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JA柯奇纳，KA布拉塞尔，K奥尔森，JC埃斯科巴，D巴罗恩，
申请(专利权)人：安姆根有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]