与FcRn结合改变的Fc变体制造技术

本申请涉及优化的IgG免疫球蛋白变体、用于制备它们的工程化方法、以及它们的应用，尤其是用于治疗目的的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及优化的IgG免疫球蛋白变体、用于制备它们的工程化方法、以及它们 的应用，尤其是用于治疗目的的应用。
技术介绍
抗体是与特异性抗原结合的免疫蛋白。在包括人和小鼠在内的大多数哺乳动物 中，抗体是由成对的多肽重链和轻链构成的。每个链由各自的免疫球蛋白(Ig)结构域构 成，因此将通用术语免疫球蛋白用于这种蛋白。每条链由两个不同的区域构成，这两个不同 的区域称为可变区和恒定区。轻链和重链可变区在抗体之间显示明显的序列多样性，并且 负责结合靶抗原。恒定区显示较少的序列多样性，并且负责结合许多天然蛋白以引发重要 的生物化学事件。在人中，有5种不同种类的抗体，包括IgA(它包括IgAl和IgA2亚类)、 IgD, IgE, IgG (它包括IgGl、IgG2、IgG3和IgG4亚类)、以及IgM0这些抗体种类之间的区 别特征为他们的恒定区，尽管V区也可能存在细微的不同。附图说明图1显示了 IgGl抗体，它在此 处作为实例来描述免疫球蛋白的一般结构特征。IgG抗体是由两条重链和两条轻链构成的 四聚体蛋白。IgG重链由四个免疫球蛋白结构域从N-末端至C-末端以VH-CH1-CH2-CH3的 顺序连接构成，VH-CH1-CH2-CH3分别是指重链可变结构域、重链恒定结构域1、重链恒定结 构域2、和重链恒定结构域3 (也称为VH-C y I-C y 2-C γ 3，分别是指重链可变结构域、、1 恒定结构域、Y 2恒定结构域、和Y 3恒定结构域)。IgG轻链由两个免疫球蛋白结构域从 N-末端至C末端以VL-CL的顺序连接构成，VL-CL分别是指轻链可变结构域和轻链恒定结 构域。抗体的可变区含有分子的抗原结合决定簇，因此决定着抗体对其靶抗原的特异 性。可变区如此命名是因为它与同种类的其他抗体在序列上最不相同。大部分的序列变异 存在于互补决定区。共有6种⑶R，重链和轻链各三种，它们命名为VH⑶R1、VH⑶R2、VH ⑶R3、VL⑶R1、VL⑶R2、和VL⑶R3。⑶R之外的可变区称为框架(FR)区。尽管不如⑶R那么 多样化，在不同抗体的FR区之间确实存在序列变异。总的来说，抗体的这种特征结构提供 了稳定的骨架(FR区)，免疫系统可以在该骨架上开发出丰富的抗原结合多样性(CDR)以获 得对大量抗原的特异性。从不同的生物体中可以得到用于多种可变区片段的大量高度溶解5结构，一些是未结合的，一些为与抗原的复合体。已经很好地表征了抗体可变区的序列和结 构特征(Morea等人，1997，Biophys Chem 68 :9_16 ；Morea等人，2000，Methods20 :267_279， 全文通过引用并入)，抗体的保守特征使得能够开发出大量的抗体工程化技术(Maynard等 Λ, 2000, Annu Rev Biomed Eng 2 :339_376，其通过引用整体并入)。例如，将来自一种抗体 例如鼠抗体的CDR移植到另一种抗体例如人抗体的框架区是可能的。这个过程在本领域内 称为“人源化”，它使得能够从非人抗体产生较小免疫原性的抗体治疗剂。包含可变区的片 段可以在不存在抗体的其他区域时存在，它们包括，例如包含VH-C y 1和VH-CL的抗原结合 片段(Fab)、包含VH和VL的可变片段(Fv)、包含在相同的链上连接在一起的VH和VL的单 链可变片段(scFv)，以及多种其他的可变区片段(Little等人，2000，Immunol Today 21 364-370，通过引用整体并入)。 抗体的Fc区与大量Fc受体和配体相互作用，赋予它们一系列重要的功能，该功 能称为效应子功能。对于IgG，如图1和2所示，Fc区包含Ig结构域C γ 2和C γ 3，N-末 端铰链连入Cy2中。IgG种类的Fc受体的一个重要家族是Fc γ受体(FcyR)。这些受 体介导着抗体和免疫系统细胞臂之间的通讯(Raghavan等人，1996，Armu Rev Cell Dev Biol 12 181-220 ;Ravetch 等人，2001，Annu Rev Immunol 19 :275_290，它们都通过引用 整体并入)。在人中，这个蛋白家族包括Fc y RI (⑶64)，其包括同种型Fc y RIa、Fc y Rib、 和FcyRIC ；Fc γ RII (CD32)，其包括同种型Fc γ RIIa(包括同种异型Η131和R131)、 Fc γ RIIb (包括 Fc YRIIb-I 禾口 Fc γ RIIb—2)、禾口 Fc γ RIIc ；以及 Fc γ RIII (CD16)，其包括同 种型Fc ￥1 111&(包括同种异型￥158和？158)和Fc γ RIIIb (包括同种异型Fc γ RIIIb-NAl 和 Fc YRIIIb-NA2) (Jefferis 等人，2002，Immunol Lett 82 :57_65，其通过引用整体并 入)。这些受体通常具有介导与Fc结合的胞外结构域、跨膜区、和可以介导细胞内的一些 信号传导事件的胞内结构域。这些受体在多种免疫细胞中表达，包括单核细胞、巨噬细胞、 嗜中性粒细胞、树突细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、血小板、B细胞、大颗粒淋巴细胞、朗氏 (Langerhans)细胞、自然杀伤(NK)细胞、和、Y T细胞。Fc/Fc γ R复合体的形成将这些效 应子细胞募集到结合抗原的位点，这通常会在细胞内产生信号传导事件和随后的重要的免 疫反应，如炎症介质的释放、B细胞活化、内吞作用、吞噬作用、和细胞毒性侵袭。介导细胞 毒性和吞噬效应子功能的能力是抗体损坏靶细胞的可能机制。其中表达Fc γ R的非特异 性细胞毒性细胞识别靶细胞上结合的抗体，并随后引起靶细胞裂解的细胞介导的反应称为 抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC) (Raghavan等人，1996，AnnuRev Cell Dev Biol 12 181-220 ；Ghetie 等人，2000，Annu Rev Immunol 18 :739_766 ；Ravetch 等人，2001，Annu Rev Immunol 19 :275_290，它们都通过引用整体并入)。其中表达Fc γ R的非特异性细胞 毒性细胞识别靶细胞上结合的抗体，并随后引起靶细胞的吞噬作用的细胞介导的反应称为 抗体依赖性细胞介导的吞噬作用(ADCP)。已经得出了人Fc γ R的胞外结构域的许多结构， 包括Fc γ RIIa (pdb登录号1H9V，通过引用整体并入)(Sondermann等人，2001，J Mol Biol 309 :737-749，通过引用整体并入)(pdb登录号1FCG，通过引用整体并入)(Maxwell等人， 1999，Nat Struct Biol 6 :437_442，通过引用整体并入)、Fc γ RIIb (pdb 登录号 2FCB，通 过引用整体并入)(Sondermann等人，1999，Embo J 18 :1095_1103，通过引用整体并入)； 和 Fc γ RIIIb (pdb 登录号 1E4J，通过引用整体并入)(Sondermann 等人，2000，Nature406 267-273，通过引用整体并入)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种亲本Ｆｃ多肽的抗体或免疫粘附素，所述抗体或免疫粘附素包含在Ｆｃ区至少一个修饰，其中所述抗体或免疫粘附素与所述亲本抗体或免疫粘附素相比表现出改变的与ＦｃＲｎ的结合，其中所述修饰选自由２５９Ｉ、３０７Ｓ、３１９Ｆ、３１９Ｌ、和４３４Ｍ组成的组，并且其中根据Ｋａｂａｔ等人的ＥＵ索引进行编号。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-10-31 11/932151一种亲本Fc多肽的抗体或免疫粘附素，所述抗体或免疫粘附素包含在Fc区至少一个修饰，其中所述抗体或免疫粘附素与所述亲本抗体或免疫粘附素相比表现出改变的与FcRn的结合，其中所述修饰选自由259I、307S、319F、319L、和434M组成的组，并且其中根据Kabat等人的EU索引进行编号。2.根据权利要求1所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区还包含选自由下列组成 的组的至少一个另外的修饰246H、246S、247D、247T、248H、248P、248Q、248R、248Y、249T、 249W、250E、250I、250Q、250V、251D、251E、251H、251I、251K、251M、251N、251T、251V、251Y、 252Q、252Y、253L、253T、253V、254H、254L、254N、254T、254V、 ~254N、255E、255F、255H、255K、 255S、255V、256E、256V、257A、257C、257D、257E、257F、257G、257H、257I、257K、257L、257M、 257N、257Q、257R、257S、257T、257V、257W、257Y、258R、258V、279A、279D、279C、279F、279G、 279H、279I、279K、279M、279N、279P、279Q、279Q、279R、279S、279T、279W、279Y、280H、 281A、 281D、 281S、 ~281T、282D、282F、282H、282I、282T、283F、283I、283L、283Y、284H、284K、 284P、284Q、284R、284S、284Y、285S、285V、286D、286#、286L、287H、287S、287V、287Y、288H、 288Q、288S、305H、305T、306F、306H、306I、306N、306T、306V、306Y、307D、307P、307Q、307S、 307V、307Y、308C、308D、308E、308F、308G、308H、308I、308K、308L、308M、308N、308Q、308P、 308R、308S、308W、308Y、309F、309H、309N、309Q、309V、309Y、310K、310N、310T、311L、311P、 311T、311V、311W、312H、313Y、315E、315G、315H、315Q、315S、315T、317H、317S、339P、340P、 341S、374H、374S、376H、376L、378H、378N、380A、380T、380Y、382H、383H、383K、383Q、384E、 384G、384H、385A、385C、385F、385H、385I、385K、385L、385M、385N、385P、385Q、385S、385T、 385V、385W、385Y、386E、386K、387#、387A、387H、387K、387Q、389E、389H、426E、426H、426L、 426N、426R、426V、426Y、427I、428F、428L、429D、429F、429K、429N、429Q、429S、429T、429Y、 430D、430H、430K、430L、430Q、430Y、431G、431H、431I、431P、431P、431S、432F、432H、432N、 432S、432V、433E、433P、433S、434A、434F、434H、434L、434M、434Q、434S、434Y、435N、436E、 436F、436L、436V、436W、437E、437V、438H和438K，其中~是在所指示位置后的插入，#是在 所指示位置的缺失。3.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列 组成的组的至少两个修饰250Q/252Y、250Q/256E、250Q/286D、250Q/308F、250Q/308Y、 250Q/311A、250Q/311V、250Q/380A、250Q/428L、250Q/428F、250Q/434H、250Q/434F、 250Q/434Y、250Q/434A、250Q/434M、250Q/434S、250E/252Y、250E/256E、250E/286D、 250E/308F、250E/308Y、250E/311A、250E/311V、250E/380A、250E/428L、250E/428F、 250E/434H、250E/434F、250E/434Y、250E/434A、250E/434M 和 250E/434S。4.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列 组成的组的至少两个修饰252Y/250Q、252Y/250E、252Y/256E、252Y/286D、252Y/308F、 252Y/308Y、252Y/311A、252Y/311V、252Y/380A、252Y/428L、252Y/428F、252Y/434H、 252Y/434F、252Y/434Y、252Y/434A、252Y/434M 和 252Y/434S。5.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列 组成的组的至少两个修饰256E/250Q、256E/250E、256E/252Y、256E/286D、256E/308F、 256E/308Y、256E/311A、256E/311V、256E/380A、256E/428L、256E/428F、256E/434H、 256E/434F、256E/434Y、256E/434A、256E/434M 和 256E/434S。6.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列 组成的组的至少两个修饰286D/250Q、286D/250E、286D/252Y、286D/256E、286D/308F、 286D/308Y、286D/311A、286D/311V、286D/380A、286D/428L、286D/428F、286D/434H、 286D/434F、286D/434Y、286D/434A、286D/434M 和 286D/434S。7.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列 组成的组的至少两个修饰308F/250Q、308F/250E、308F/252Y、308F/256E、308F/286D、 308F/311A、308F/311V、308F/380A、308F/428L、308F/428F、308F/434H、308F/434F、 308F/434Y、308F/434A、308F/434M、308F/434S、308Y/250Q、308Y/250E、308Y/252Y、 308Y/256E、308Y/286D、308Y/311A、308Y/311V、308Y/380A、308Y/428L、308Y/428F、 308Y/434H、308Y/434F、308Y/434Y、308Y/434...

【专利技术属性】
技术研发人员：A张伯伦，B达希亚特，JR德斯贾莱斯，SB卡基，
申请(专利权)人：XENCOR公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]