新颖CTLA4-IG免疫粘附素制造技术

本申请涉及靶向CD80和CD86的CTLA4

【技术实现步骤摘要】
新颖CTLA4
‑
IG免疫粘附素
[0001]本申请为分案申请，原申请的申请日为2011年2月22日，申请号为201180019721.1(国际申请号：PCT/US2011/025747，针对的分案申请号：201610569505.9)，专利技术名称为“新颖CTLA4
‑
IG免疫粘附素”。
[0002]根据35 U.S.C.
§
119(e)，本申请要求2010年11月10日提交的USSN 61/412,309；2010年5月14日提交的USSN 61/334,806；和2010年2月19日提交的USSN 61/306,311的权益，通过引用全文并入本文。
专利

[0003]本申请涉及靶向CD80和CD86的CTLA4
‑
Ig免疫粘附素及其用途，尤其是用于治疗目的的用途。
[0004]专利技术背景
[0005]T淋巴细胞在对抗原的适应性免疫应答中起关键作用。初次用于试验的T细胞需要两种信号来完全激活它们(Bretscher 1999,Proc Natl Acad Sci USA 96:185
‑
90)。第一信号是抗原特异性的，由T细胞受体(TCR)与抗原呈递细胞(APC)上的MHC/肽复合体的相互作用来提供。第二信号是由T细胞上的受体与APC上的其配体之间的相互作用提供的共刺激性信号。TCR/MHC相互作用与共刺激性相互作用二者的啮合经由多种胞内途径导致T细胞激活，所述途径包括钙
‑
钙调蛋白和RAS促分裂素激活的蛋白激酶，和随后包括细胞因子诸如IL
‑
2的多种效应化合物的转录因子的激活。这些事件导致T细胞增殖、CD4
+
辅助T细胞(T
H
)池的产生、和激活的CD8
+
细胞毒性T细胞的扩增。共刺激对于完全T细胞激活不仅是关键的，其在TCR/MHC啮合期间不存在导致无反应性和/或凋亡。
[0006]虽然多种正向和负向共刺激途径参与T细胞调节，最关键的是T细胞上的CD28与APC上的B7
‑
1(CD80)和B7
‑
2(CD86)之间的共刺激途径。CD28促进T细胞分化为TH1表型细胞并增强B细胞的抗体产生和T细胞的激活。APC诸如树突细胞(DC)和B细胞上表达的B7
‑
1和B7
‑
2，具有重叠但不同的功能。B7
‑
2是组成型地表达的，与TCR/MHC啮合(信号1)一致地在APC上被快速上调。B7
‑
1表达在静止细胞上非常低，但通常在长期T细胞刺激后被诱导。这些差异暗示，尽管B7
‑
2在T细胞激活的起始时可能是重要的，但是B7
‑
1可能在永存免疫应答方面起更大作用。
[0007]在T细胞激活后，负向调节受体细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4或CTLA
‑
4，还称为CD152)在T细胞上被上调(Alegre等,2001,Nat Rev Immunol 1:220
‑
8)。CTLA4在结构上与CD28同源，但更紧密地结合B7
‑
1和B7
‑
2配体二者。CLTA4以两种主要方式抑制免疫应答—它与CD28竞争B7配体从而阻断共刺激，它还负向地传递信号来抑制T细胞激活(Krummel和Allison,1995,J Exp Med 182:459
‑
465；Walunas等,1994,Immunity 1:405
‑
413)。最近的研究已经显示，B7
‑
2在免疫突触啮合CD28多于CTLA4，而B7
‑
1连接CTLA4多于CD28(Collins等,2002,Immunity 17:201
‑
210；Jansson等,2005,J Immunol175:1575
‑
1585)。
[0008]由于B7共刺激途径在促进和保持免疫应答方面的关键作用，设计为拮抗它的治疗剂对于治疗自身免疫疾病和病症是有希望的。阿贝西普是一种由CTLA4的胞外
结合结构域连接到人类IgG的Fc结构域构成的CTLA4
‑
Ig免疫粘附素。阿贝西普被开发用于抑制B7介导的共刺激(Bluestone等,2006,Immunity 24:233
‑
238)，且被批准用于治疗类风湿性关节炎(RA)和用于多种其他自身免疫适应症的临床试验。然而，尽管阿贝西普在治疗RA方面显示一些活性，它对其他适应症无效。例如，CTLA4
‑
Ig在针对移植排斥的耐受方面低效得多(Kirk等,1997,Proc Natl Acad Sci USA 94:8789
‑
8794；Levisetti等,1997,J Immunol 159:5187
‑
5191)。
[0009]阿贝西普的不足的临床表现已经被归因于其天然CTLA4对B7配体、尤其是B7
‑
2(由于B7
‑
2在免疫起始方面推测的重要性)次最佳的亲和性。本专利技术提供具有改进的B7亲和性和增强的T细胞抑制活性的新颖变体CTLA4
‑
Ig免疫粘附素。这样的新颖免疫粘附素在多种应用中有益处，尤其是用于治疗免疫相关病症，如以下详细讨论的。
专利技术概要
[0010]本专利技术提供抑制抗原呈递细胞(APC)和T细胞之间的相互作用的新颖CTLA4
‑
Ig免疫粘附素。本专利技术的CTLA4
‑
Ig免疫粘附素包括以高亲和性结合人类B7
‑
1(CD80)和B7
‑
2(CD86)的CTLA4部分，并包括可结合一种或多种Fc受体或Fc配体的Ig Fc部分(或Fc区)。
[0011]在本专利技术的一个方面，CTLA4
‑
Ig免疫粘附素包括变体CTLA4蛋白，其中所述变体包括在天然CTLA4蛋白中的至少一种氨基酸修饰，其中所述修饰是选自A29E、A29F、A29H、A29K、A29N、A29Q、A29R、T30E、T30H、T30R、T30V、E31D、E31I、E31M、E31T、E31V、R33E、R33F、R33I、R33L、R33M、R33Q、R33T、R33W、R33Y、T35D、T35E、T35F、T35M、T35V、T35Y、A49D、A49E、A49F、A49T、A49W、A49Y、T51D、T51E、T51H、T51L、T51N、T51Q、T51R、T51S、T51V、M53E、M53F、M53H、M53Q、M53W、M53Y、T59H、T59I、T59L、T59N、T59Q、T59V、T59Y、L61A、L61D、L61E、L61F、L61G、L61H、L61I、L61K、L61M、L61N、L61P、L6本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫粘附素，包括包含与SEQ ID NO:6相比的变体CTLA4的第一结构域和包含IgG Fc区的第二结构域，其中所述变体包括在天然CTLA4中的至少一种氨基酸修饰，其中所述修饰为在CTLA4的位置29处的取代，其选自A29E、A29F、A29H、A29K、A29N、A29Q、A29R、A29W和A29Y，其中所述变体提供与SEQ ID NO:6相比的对B7
‑
1、B7
‑
2、或B7
‑
1和B7
‑
2二者增强的结合。2.根据权利要求1所述的免疫粘附素，其中所述变体包括氨基酸取代A29H。3.根据权利要求1所述的免疫粘附素，其中所述变体包括取代的组合A29H/K93Q。4.根据权利要求1所述的免疫粘附素，其中所述变体包括取代的组合A29H/L61E/K93Q。5.根据权利要求1所述的免疫粘...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：XENCOR公司，
类型：发明
国别省市：