与FcRn结合改变的Fc变体制造技术

与FcRn结合改变的Fc变体。本申请涉及优化的IgG免疫球蛋白变体、用于制备它们的工程化方法、以及它们的应用，尤其是用于治疗目的的应用。

Fc variants associated with FcRn

A variant of Fc that is combined with FcRn. The application relates to the optimized IgG immunoglobulin variants, the engineering methods for preparing them, and their applications, especially for the purposes of treatment.

【技术实现步骤摘要】
与FcRn结合改变的Fc变体本申请是以下申请的分案申请：申请日：2008年9月22日；申请号：200880113962.0(PCT/US2008/077250)；专利技术名称：同上。本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2007年7月24日提交的USSN60/951,536的权益，并且是2006年5月17日提交的USSN11/436,266的部分继续申请，USSN11/436,266是2005年11月14日提交的USSN11/274,065的部分继续申请，这两者都根据35U.S.C.§119(e)要求下列的权益：2004年11月12日提交的USSN60/627,763；2005年1月11日提交的USSN,60/642,886；2005年2月2日提交的USSN60/649,508；2005年3月15日提交的USSN60/662,468；2005年4月6日提交的USSN60/669,311；2005年5月16日提交的USSN60/681,607；2005年6月13日提交的USSN60/690,200；2005年7月5日提交的USSN60/696,609；2005年7月27日提交的USSN60/703,018；以及2005年10月12日提交的USSN60/726,453，它们全部通过引用整体并入。专利
本申请涉及优化的IgG免疫球蛋白变体、用于制备它们的工程化方法、以及它们的应用，尤其是用于治疗目的的应用。专利技术背景抗体是与特异性抗原结合的免疫蛋白。在包括人和小鼠在内的大多数哺乳动物中，抗体是由成对的多肽重链和轻链构成的。每个链由各自的免疫球蛋白(Ig)结构域构成，因此将通用术语免疫球蛋白用于这种蛋白。每条链由两个不同的区域构成，这两个不同的区域称为可变区和恒定区。轻链和重链可变区在抗体之间显示明显的序列多样性，并且负责结合靶抗原。恒定区显示较少的序列多样性，并且负责结合许多天然蛋白以引发重要的生物化学事件。在人中，有5种不同种类的抗体，包括IgA(它包括IgA1和IgA2亚类)、IgD、IgE、IgG(它包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亚类)、以及IgM。这些抗体种类之间的区别特征为他们的恒定区，尽管V区也可能存在细微的不同。图1显示了IgG1抗体，它在此处作为实例来描述免疫球蛋白的一般结构特征。IgG抗体是由两条重链和两条轻链构成的四聚体蛋白。IgG重链由四个免疫球蛋白结构域从N-末端至C-末端以VH-CH1-CH2-CH3的顺序连接构成，VH-CH1-CH2-CH3分别是指重链可变结构域、重链恒定结构域1、重链恒定结构域2、和重链恒定结构域3(也称为VH-Cγ1-Cγ2-Cγ3，分别是指重链可变结构域、γ1恒定结构域、γ2恒定结构域、和γ3恒定结构域)。IgG轻链由两个免疫球蛋白结构域从N-末端至C末端以VL-CL的顺序连接构成，VL-CL分别是指轻链可变结构域和轻链恒定结构域。抗体的可变区含有分子的抗原结合决定簇，因此决定着抗体对其靶抗原的特异性。可变区如此命名是因为它与同种类的其他抗体在序列上最不相同。大部分的序列变异存在于互补决定区。共有6种CDR，重链和轻链各三种，它们命名为VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2、和VLCDR3。CDR之外的可变区称为框架(FR)区。尽管不如CDR那么多样化，在不同抗体的FR区之间确实存在序列变异。总的来说，抗体的这种特征结构提供了稳定的骨架(FR区)，免疫系统可以在该骨架上开发出丰富的抗原结合多样性(CDR)以获得对大量抗原的特异性。从不同的生物体中可以得到用于多种可变区片段的大量高度溶解结构，一些是未结合的，一些为与抗原的复合体。已经很好地表征了抗体可变区的序列和结构特征(Morea等人,1997,BiophysChem68:9-16；Morea等人,2000,Methods20:267-279，全文通过引用并入)，抗体的保守特征使得能够开发出大量的抗体工程化技术(Maynard等人,2000,AnnuRevBiomedEng2:339-376，其通过引用整体并入)。例如，将来自一种抗体例如鼠抗体的CDR移植到另一种抗体例如人抗体的框架区是可能的。这个过程在本领域内称为“人源化”，它使得能够从非人抗体产生较小免疫原性的抗体治疗剂。包含可变区的片段可以在不存在抗体的其他区域时存在，它们包括，例如包含VH-Cγ1和VH-CL的抗原结合片段(Fab)、包含VH和VL的可变片段(Fv)、包含在相同的链上连接在一起的VH和VL的单链可变片段(scFv)，以及多种其他的可变区片段(Little等人,2000,ImmunolToday21:364-370，通过引用整体并入)。抗体的Fc区与大量Fc受体和配体相互作用，赋予它们一系列重要的功能，该功能称为效应子功能。对于IgG，如图1和2所示，Fc区包含Ig结构域Cγ2和Cγ3，N-末端铰链连入Cγ2中。IgG种类的Fc受体的一个重要家族是Fcγ受体(FcγR)。这些受体介导着抗体和免疫系统细胞臂之间的通讯(Raghavan等人,1996,AnnuRevCellDevBiol12:181-220；Ravetch等人,2001,AnnuRevImmunol19:275-290，它们都通过引用整体并入)。在人中，这个蛋白家族包括：FcγRI(CD64)，其包括同种型FcγRIa、FcγRIb、和FcγRIc；FcγRII(CD32)，其包括同种型FcγRIIa(包括同种异型H131和R131)、FcγRIIb(包括FcγRIIb-1和FcγRIIb-2)、和FcγRIIc；以及FcγRIII(CD16)，其包括同种型FcγRIIIa(包括同种异型V158和F158)和FcγRIIIb(包括同种异型FcγRIIIb-NA1和FcγRIIIb-NA2)(Jefferis等人,2002,ImmunolLett82:57-65，其通过引用整体并入)。这些受体通常具有介导与Fc结合的胞外结构域、跨膜区、和可以介导细胞内的一些信号传导事件的胞内结构域。这些受体在多种免疫细胞中表达，包括单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、树突细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、血小板、B细胞、大颗粒淋巴细胞、朗氏(Langerhans)细胞、自然杀伤(NK)细胞、和γγT细胞。Fc/FcγR复合体的形成将这些效应子细胞募集到结合抗原的位点，这通常会在细胞内产生信号传导事件和随后的重要的免疫反应，如炎症介质的释放、B细胞活化、内吞作用、吞噬作用、和细胞毒性侵袭。介导细胞毒性和吞噬效应子功能的能力是抗体损坏靶细胞的可能机制。其中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上结合的抗体，并随后引起靶细胞裂解的细胞介导的反应称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)(Raghavan等人,1996,AnnuRevCellDevBiol12:181-220；Ghetie等人,2000,AnnuRevImmunol18:739-766；Ravetch等人,2001,AnnuRevImmunol19:275-290，它们都通过引用整体并入)。其中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上结合的抗体，并随后引起靶细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种亲本Fc多肽的抗体或免疫粘附素，所述抗体或免疫粘附素包含在Fc区至少一个修饰，其中所述抗体或免疫粘附素与所述亲本抗体或免疫粘附素相比表现出改变的与FcRn的结合，其中所述修饰选自由259I、307S、319F、319L、和434M组成的组，并且其中根据Kabat等人的EU索引进行编号。

【技术特征摘要】
2007.10.31 US 11/9321511.一种亲本Fc多肽的抗体或免疫粘附素，所述抗体或免疫粘附素包含在Fc区至少一个修饰，其中所述抗体或免疫粘附素与所述亲本抗体或免疫粘附素相比表现出改变的与FcRn的结合，其中所述修饰选自由259I、307S、319F、319L、和434M组成的组，并且其中根据Kabat等人的EU索引进行编号。2.根据权利要求1所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区还包含选自由下列组成的组的至少一个另外的修饰：246H、246S、247D、247T、248H、248P、248Q、248R、248Y、249T、249W、250E、250I、250Q、250V、251D、251E、251H、251I、251K、251M、251N、251T、251V、251Y、252Q、252Y、253L、253T、253V、254H、254L、254N、254T、254V、^254N、255E、255F、255H、255K、255S、255V、256E、256V、257A、257C、257D、257E、257F、257G、257H、257I、257K、257L、257M、257N、257Q、257R、257S、257T、257V、257W、257Y、258R、258V、279A、279D、279C、279F、279G、279H、279I、279K、279M、279N、279P、279Q、279Q、279R、279S、279T、279W、279Y、280H、^281A、^281D、^281S、^281T、282D、282F、282H、282I、282T、283F、283I、283L、283Y、284H、284K、284P、284Q、284R、284S、284Y、285S、285V、286D、286#、286L、287H、287S、287V、287Y、288H、288Q、288S、305H、305T、306F、306H、306I、306N、306T、306V、306Y、307D、307P、307Q、307S、307V、307Y、308C、308D、308E、308F、308G、308H、308I、308K、308L、308M、308N、308Q、308P、308R、308S、308W、308Y、309F、309H、309N、309Q、309V、309Y、310K、310N、310T、311L、311P、311T、311V、311W、312H、313Y、315E、315G、315H、315Q、315S、315T、317H、317S、339P、340P、341S、374H、374S、376H、376L、378H、378N、380A、380T、380Y、382H、383H、383K、383Q、384E、384G、384H、385A、385C、385F、385H、385I、385K、385L、385M、385N、385P、385Q、385S、385T、385V、385W、385Y、386E、386K、387#、387A、387H、387K、387Q、389E、389H、426E、426H、426L、426N、426R、426V、426Y、427I、428F、428L、429D、429F、429K、429N、429Q、429S、429T、429Y、430D、430H、430K、430L、430Q、430Y、431G、431H、431I、431P、431P、431S、432F、432H、432N、432S、432V、433E、433P、433S、434A、434F、434H、434L、434M、434Q、434S、434Y、435N、436E、436F、436L、436V、436W、437E、437V、438H和438K，其中^是在所指示位置后的插入，#是在所指示位置的缺失。3.根据权利要求1或2所述的抗体或免疫粘附素，其中所述Fc区包含选自由下列组成的组的至少两个修饰：250Q/252Y、250Q/256E、250Q/286D、250Q/308F、250Q/308Y、250Q/311A、250Q/311V、250Q/380A、250Q/428L、250Q/428F、250Q/434H、250Q/434F、250Q/434Y、250Q/434A、250Q/434M、250Q/434S、250E/252Y、250E/256E、250E/286D、250E/308F、250E/308Y、250E/311A、250E/311V、250E/380A、250E/428L、250E/428F、250E/434H、250E/434F、250E/434Y、250E/434A、250E/434M...

【专利技术属性】
技术研发人员：A张伯伦，B达希亚特，JR德斯贾莱斯，SB卡基，
申请(专利权)人：XENCOR公司，
类型：发明
国别省市：美国,US