一种人工诱导臭马比木内生菌合成９－甲氧基－１８，１９－脱氢喜树碱的方法技术

本发明专利技术涉及一种诱导臭马比木内生菌合成９－甲氧基－１８，１９－脱氢喜树碱的方法，该方法是将臭马比木内生菌置于ＰＤＡ平板培养基中培养３～４天，用接种环刮取菌落周边生长旺盛的菌丝体，接入装有玻璃珠的马铃薯蔗糖液体培养基中，用马铃薯蔗糖液体培养基稀释至菌体含量为１０－４，得到菌悬液，在菌悬液中加入浓度为２～１５００μＭ的诱导剂，培养４～７天，再次加入诱导剂，诱导剂的用量为０．２～１．５克／Ｌ液体培养基，培养３～５天，接种于ＰＤＡ平板培养基中，筛选出合成９－甲氧基－１８，１９－脱氢喜树碱量高的菌株，然后进行发酵，用超声波提取，该方法生产成本低，生产过程中的环境污染程度低，对生产人员的毒害小，产品收率高，纯度高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人工诱导臭马比木内生菌合成９－甲氧基－１８，１９－脱氢喜树碱的方法，其特征在于：包括如下步骤：（１）菌悬液的制备：将臭马比木内生菌置于ＰＤＡ平板培养基中培养３～４天，用接种环刮取菌落周边生长旺盛的菌丝体，接入装有玻璃珠的马铃薯蔗糖液体培养基中，２５～３０℃摇床培养４０～５０小时，转速为１００～１５０／ｍｉｎ，用马铃薯蔗糖液体培养基稀释至菌体含量为１０↑［－４］，得到菌悬液；（２）人工诱变：在菌悬液中加入浓度为２～１５００μＭ的诱导剂，培养４～７天，再次加入诱导剂，诱导剂的用量为０．２～１．５克／Ｌ液体培养基，培养３～５天，接种于ＰＤＡ平板培养基中，筛选出合成９－甲氧基－１８，１９－脱氢喜树...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张苑金，
申请(专利权)人：张苑金，
类型：发明
国别省市：44[]