制备高免疫原性乙型肝炎疫苗的方法技术

制备通过两次接种能产生１００％抗ＨＢ↓［ｓ］之较高免疫原性乙型肝炎疫苗的方法，包括高度纯化羊衍生的高免疫抗ＨＢ↓［ｓ］（ＩＤ效价超过１∶４０９６），然后与琼脂糖凝胶结合以制得亲和层析柱，以亲和层析法纯化ＨＢ↓［ｓ］抗原阳性人血或分娩后胎盘血清，经过连续透析处理，从血清中除去含在其中的痕量杂蛋白，于９８℃－１００℃下对所说的样品加热３０分钟以完全失活ＨＢＶ，从而得到有更高免疫原性的、特异纯化的ＨＢ↓［ｓ］抗原蛋白质，后者被吸附到氢氧化铝凝胶上即可得到仅通过两次接种即能产生１００％抗ＨＢ↓［ｓ］的更高免疫原性的ＨＢ疫苗。（*该技术在2012年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及使用亲和层析法，高度纯化含有具人血清蛋白结合活性(HSA-BA)之前S2蛋白的乙型肝炎表面(HBs)抗原，以制备能够产生100%抗HBs之乙型肝炎疫苗的方法。近年来，在美国、法国、日本及其他国家已开发了编码前S2的重组HB疫苗，但即使在3次重复接种后仍不能产生100%的抗HBs。本专利技术第一次阐明，如果以亲和层析法纯化含有具人血清白蛋白结合活性(HSA-BA)之前S2蛋白的HBs抗原，则有可能大量产生能够通过两次接种产生100%抗HBs的高免疫原性乙型肝炎疫苗。因此也就有可能完全排除在开发HBs疫苗中遇到的存在非反应者这一最大问题，以及以高技术制得的重组HB疫苗的缺陷。可借助免疫扩散法(ID)然后进行高度纯化由羊体内产生效价高于1∶4096的高免疫性抗HBs，然后将其吸附到用CNBr强活化的琼脂糖凝胶上以形成用于亲和层析的载体，其中所说的CNBr的浓度范围为50-600mg/ml，较好为50-300mg/ml，抗HBs为每100ml琼脂糖8000-10000单位(ID)，吸附时间为2-5小时。用5MMgCl2将未完全与所说的载体结合的蛋白质物质如抗HBs洗掉。从本文档来自技高网...

【技术保护点】
用亲和层析法制备较高免疫原性ＨＢ疫苗的方法，其特征在于所说的方法包括将较高免疫原性羊衍生的抗ＨＢ↓［ｓ］与琼脂糖凝胶结合以制备亲和载体，吸附、洗脱含有具人血清白蛋白结合活性（ＨＢＡ－ＢＡ）之前Ｓ２蛋白的人血清式分娩后胎盘血清，用连续透析方法除去以痕量包含于其中的蛋白质，以及在９８－１００℃的高温度下完全失活ＨＢＶ的步骤。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：高真南，李英爱，
申请(专利权)人：高真南，李英爱，
类型：发明
国别省市：KP[朝鲜]