【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】I.关于在联邦赞助的研究和研发中产生的专利技术的权利的陈述本专利技术是在政府资助下产生的，具有能源部授予的条件授予编号 DE-FC36-08G018078。政府对本专利技术享有一定权利。II.相关申请的交叉引用本申请要求2008年6月6日提交的美国临时申请号61/059，506的权益，其通过 引用整合到本文中。III.领域本专利技术涉及酶，特别是纤维素酶变体。还描述了编码纤维素酶变体的核酸，包含纤 维素酶变体的组合物，鉴别其它有效的纤维素酶变体的方法，以及使用组合物的方法。IV.背景纤维素和半纤维素是由光合作用产生的最丰富的植物材料。它们可以被多种微生 物(例如，细菌、酵母和真菌)降解并用作能源，所述微生物产生能够将多聚底物水解为单 体糖的胞外酶(Aro等人，J Biol Chem, 276 =24309-24314,2001) 由于不可再生来源途径 的限制，纤维素成为主要的可再生能量来源的可能性是极大的(Krishna等人，Bioresource Tech, 77 :193-196,2001)。通过生物学过程有效的利用纤维素是克服食物、饲料和燃料短缺 的一种方法...
【技术保护点】
分离的纤维素酶变体，其中所述变体是具有纤维素酶活性的成熟形态，并包含在一个或多个选自以下位置的取代：６３、７７、１２９、１４７、１５３、１５７、１６１、１９４、１９７、２０３、２３７、２３９、２４７、２５４、２８１、２８５、２８８、２８９、２９４、３２７、３３９、３４４、３５６、３７８和３８２，其中位置是通过与ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３所述的参照纤维二糖水解酶Ⅱ（ＣＢＨ２）的氨基酸序列对应而编号的，且其中在一个或多个位置的取代导致纤维素酶变体与参照ＣＢＨ２相比具有更负的净电荷。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2008-6-6 61/059,5061.分离的纤维素酶变体，其中所述变体是具有纤维素酶活性的成熟形态，并包含在一 个或多个选自以下位置的取代63、77、129、147、153、157、161、194、197、203、237、239、247、 254、281、285、288、289、294、327、339、344、356、378 和 382，其中位置是通过与 SEQ ID NO 3所述的参照纤维二糖水解酶II(CBH2)的氨基酸序列对应而编号的，且其中在一个或多个 位置的取代导致纤维素酶变体与参照CBH2相比具有更负的净电荷。2.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个位置的取代包括去除一个或 多个正电荷。3.权利要求2的分离的纤维素酶变体，其中去除一个或多个正电荷包括用中性氨基酸 替换赖氨酸或精氨酸。4.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个位置的取代包括添加一个或 多个负电荷。5.权利要求4的分离的纤维素酶变体，其中添加一个或多个负电荷包括用带负电荷的 氨基酸替换中性氨基酸。6.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个位置的取代包括去除一个或 多个正电荷并添加一个或多个负电荷。7.权利要求6的分离的纤维素酶变体，其中去除一个或多个正电荷并添加一个或多个 负电荷包括用带负电荷的氨基酸替换赖氨酸或精氨酸。8.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个位置的取代包括一个或多 个的 K129E、K157E、K194E、K288E、K327E、K356E、R63Q、R77Q、R153Q、R203Q、R294Q、R378Q、 N161D、N197D、N237D、N247D、N254D、N285D、N289D、N339D、N344D、N382D、Q147E、Q204E、Q239E 和Q281E，其中位置是通过与SEQ ID NO :3所述的参照纤维二糖水解酶II (CBH2)的氨基酸 序列对应而编号的。9.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中变体包括在一个或多个选自146、151、189、 208、211、M4、277和405的其它位置的其它取代，其中其它位置是通过与SEQ ID NO :3所 述的参照纤维二糖水解酶II(CBH2)的氨基酸序列对应而编号的。10.权利要求9的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个其它位置的其它取代包括 用中性氨基酸替换天冬氨酸或谷氨酸。11.权利要求9的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个其它位置的其它取代包括 一个或多个的 D151N、D189N、D21 IN、D277N、D405N、E146Q、E208Q 和 E244Q，其中位置是通过 与SEQ ID NO :3所述的参照纤维二糖水解酶II (CBH2)的氨基酸序列对应而编号的。12.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中在一个或多个位置的取代选自1、2、3、4、 5、6、7、8、9和10个位置。13.权利要求1的分离的纤维素酶变体，其中纤维素酶变体源自亲本纤维素酶，所 述亲本纤维素酶选自红褐肉座菌(Hypocrea jecorina)CBH2、康宁肉座菌(Hypocrea koningii)CBH2、特异腐质霉(Humicola insolens)CBH2、解纤维素醋弧菌(Acremonium cellulolyticus)CBH2、 二 孢蘑菇(Agaricus bisporus)CBH2、尖镰孢(Fusarium os...
【专利技术属性】
技术研发人员：LG卡斯康佩雷拉，T卡佩尔，BR凯莱门，A刘，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：US
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