【技术实现步骤摘要】
201610057232
【技术保护点】
一种低β‑葡萄糖苷酶纤维素酶添加剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤一、选取菌种:选取木霉属中的里氏木霉作为生产纤维素酶的菌株;步骤二、制备斜面孢子:将选取的里氏木霉接种至PDA斜面培养基中,并置于生化培养箱中,在温度为24~30℃、相对湿度为95~97%的恒温恒湿暗环境下培养5~7天,直至里氏木霉菌丝表面形成一层分生孢子层,于4℃温度下保存备用;步骤三、制备孢子悬液:用无菌水洗下步骤二处理得到的分生孢子,并稀释孢子浓度至108个/mL,备用;步骤四、制备种子液:在250mL的三角瓶中装入50mL液态种子培养基,并用纱布封口,灭菌处理后,在无菌环境中取1mL经步骤三得到的孢子悬液接种至液态种子培养基中,然后置于恒温培养振荡器中培养2~3天,使孢子萌发得到纤维素酶种子液,备用;步骤五、制备发酵料:将秸秆、稻草、麦麸等纤维原料粉碎至20目以下,预处理并灭菌处理后冷却,得到无菌发酵料;步骤六、发酵产酶培养:将步骤四得到的种子液与步骤五得到的无菌发酵料以质量比为1:10~12的比例均匀接种至液体培养基中,接种量为4~5%,并按照50~60%的装入量装入发酵罐中,发酵罐中的发酵液初始pH ...
【技术特征摘要】
1.一种低β-葡萄糖苷酶纤维素酶添加剂的制备方法,其特征在于:包括如下步
骤:
步骤一、选取菌种:选取木霉属中的里氏木霉作为生产纤维素酶的菌株;
步骤二、制备斜面孢子:将选取的里氏木霉接种至PDA斜面培养基中,并置
于生化培养箱中,在温度为24~30℃、相对湿度为95~97%的恒温恒湿暗环
境下培养5~7天,直至里氏木霉菌丝表面形成一层分生孢子层,于4℃温度
下保存备用;
步骤三、制备孢子悬液:用无菌水洗下步骤二处理得到的分生孢子,并稀释
孢子浓度至108个/mL,备用;
步骤四、制备种子液:在250mL的三角瓶中装入50mL液态种子培养基,并
用纱布封口,灭菌处理后,在无菌环境中取1mL经步骤三得到的孢子悬液接
种至液态种子培养基中,然后置于恒温培养振荡器中培养2~3天,使孢子萌
发得到纤维素酶种子液,备用;
步骤五、制备发酵料:将秸秆、稻草、麦麸等纤维原料粉碎至20目以下,预
处理并灭菌处理后冷却,得到无菌发酵料;
步骤六、发酵产酶培养:将步骤四得到的种子液与步骤五得到的无菌发酵料
以质量比为1:10~12的比例均匀接种至液体培养基中,接种量为4~5%,
并按照50~60%的装入量装入发酵罐中,发酵罐中的发酵液初始pH值控制
在4~7、温度控制在28~32℃进行发酵产酶处理,发酵时间为72~96小时;
步骤七、制备纤维素酶液:将经过步骤六处理得到的发酵液在离心机中离心
处理,得到纤维素酶液,备用;
步骤八、吸附脱附处理:取经步骤七得到的纤维素酶液与纤维吸附基质以一
定的比例混合加入离心机中,并加入2~4倍水静置,静置一段时间后,开启
离心机离心脱附处理,去除液相中的β-葡萄糖苷酶;
步骤九、...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱汉静,朱汉生,刘镏,陈冬劲,
申请(专利权)人:江苏康维生物有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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