外源性乳酸菌株在制备预防与内氏放线菌有关的疾病的组合物中的用途制造技术

对于口腔微生物区系是外源性的乳酸菌株在制备用于减少哺乳动物牙菌斑并治疗或预防根龋及其它与内氏放线菌有关疾病的组合物中的用途，其中所述乳酸菌株具有粘附于牙齿表膜并产生生长抑制因子的能力。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及掺入到口腔微生物区系中的外源性乳酸菌株，其可调节内氏放线菌的定居并减轻与内氏放线菌有关的疾病的严重程度。
技术介绍
口腔(口腔)含有定居和非-定居的微生物区系。前者包括能够在口腔表面或多或少建立永久居所的微生物。这些细菌主要集中在舌，口腔粘膜和牙齿上，而牙龈，唇，颊，腭及口腔底部仅有非常稀少的微生物区系生长。牙菌斑是一层在牙齿表面形成的膜，其由细胞外多糖和唾液产物的基质中的细菌细胞组成。牙齿长出后，立即被无定形的唾液层覆盖，所得釉质表膜(AEP)约厚1.3μm，且不会通过普通的刷牙而除去。AEP形成之后，细菌立即在牙齿上沉积，且在8-12小时内，牙菌斑由于其多层结构而变得明显。第一层由主要通过特异性粘附-受体识别而粘附在牙齿上的细菌(最早定居的细菌)组成；它为通过类似的特异性结合或通过简单并列而相互粘附的第二层定居细菌建立了基础。在舌和颊粘膜上，天然的定居微生物区系包括选自链球菌属，韦荣氏球菌属，拟杆菌属和嗜血菌属的微生物。在牙齿上，链球菌属和放线菌属占优势，但也可找到各种革兰氏阳性和阴性球菌及杆菌。这些微生物大多数均是无害的共生体，但其中许多已经被认为是相当多疾病的病原体(Hill，M.J.和Marsh，P.D.编辑Human MicrobialEcology，1990，CRC出版社，Boca Raton Florida，USA)。特别是，内氏放线菌基因种1(原来为内氏放线菌)和2(原来为粘放线菌)是人牙菌斑的共有成员。它们是形成牙菌斑的最强口腔菌株，这是因为它们具有坚固地粘附牙齿并与许多其它细菌种类共同聚集的能力，因此在口腔中建立了它们的居所。此外，在稍晚的时候，通常可在根龋处将它们分离出来，且据信它们是这种疾病的主要病原体(Bowden，G.H.等，1999，源于釉质及牙齿健康和龋根表面的样品中的内氏放线菌基因种1和2主要核糖型的差异和分布，J.Dent.Res.78，1800-1809)。暂居微生物区系包括临时存在于口腔中，但不会建立永久居所(即使反复口服给予这些细菌)的外源性细菌。所有的食用细菌，特别是乳酸菌是这种暂居微生物区系的一部分。这些外源性乳酸菌的一部分已经显示出能够粘附牙齿的表膜。例如，WO 00/09080(Sociétédes Produits Nestlé)公开了不是口腔定居微生物区系一部分的乳酸菌株，其低度酸化且能够直接粘附牙齿的表膜。这些细菌特别用于治疗或预防由生龋微生物，如变异链球菌和表兄链球菌所引起的龋齿及牙周感染。外源性细菌还可产生抑制口腔中定居微生物区系生长的因子。例如EP759469(Sociétédes Produits Nestlé)描述了由变化微球菌产生的细菌素用于抑制口腔病原体表兄链球菌，血链球菌，变异链球菌和粘放线菌发展的用途。细菌素的应用也是所研究战略其中之一，可用于减少龋齿。这些分子作为预期的抗龋药剂和在调节口腔微生物定居中发挥重要作用的因子吸引了人们的兴趣。值得注意的是，现有技术没有提供任何有关下面这种菌株的信息，即该菌株可通过直接粘附于牙齿表膜而在口腔中定居，并产生因子，如生长抑制因子，从而调节内氏放线菌的定居，减轻与内氏放线菌有关的疾病的严重程度。专利技术概述因此，本专利技术的目的是提供对于口腔微生物区系是外源性的乳酸菌在制备用于减少哺乳动物牙菌斑并治疗或预防根龋或其它与内氏放线菌有关疾病的组合物中的用途，其中所述乳酸菌具有粘附牙齿表面并产生生长抑制因子的能力。所述乳酸菌可选自嗜热链球菌，乳酸乳球菌乳亚种，和乳酸乳球菌乳亚种biovar diacetylactis，特别是可选自菌株CNCMI-1984，CNCMI-1985，CNCMI-1986，CNCMI-1987。因此，通过在牙齿表膜定居并产生生长抑制因子，这种乳酸菌可显著减少内氏放线菌的程度，从而减少牙菌斑，根龋及其它与内氏放线菌有关的感染。本专利技术的另一个目的是提供一种通过减少内氏放线菌的定居而保持口腔健康的组合物，所述组合物含有一种外源性细菌，其具有粘附牙齿表面并产生生长抑制因子的能力。这种组合物至少含有104-109cfu/g的乳酸菌。本专利技术还提供一种预防或治疗哺乳动物与内氏放线菌有关的感染，特别是牙菌斑程度及根龋的方法，该方法包括给予哺乳动物至少含一种乳酸菌株的组合物的步骤，其中所述乳酸菌株具有粘附牙齿表面并产生生长抑制因子的能力，所述组合物可减少内氏放线菌的定居。专利技术详述在下列描述中，将所述口腔定义为人或动物，如宠物的口腔，其包括口腔粘膜(牙龈，唇，颊，腭和口腔底部)，舌和牙齿(包括人造结构)。将术语“生长抑制因子”定义为任何由粘附的外源性乳酸菌产生的细胞外物质，其可使外源性乳酸菌抑制内氏放线菌的生长。本专利技术的第一个目的涉及外源性乳酸菌在制备用于减少牙菌斑并治疗或预防根龋或其它与内氏放线菌有关疾病的组合物中的用途，其中所述乳酸菌具有粘附牙齿表面并产生生长抑制因子的能力。所述乳酸菌可选自嗜热链球菌，乳酸乳球菌乳亚种，和乳酸乳球菌乳亚种biovar diacetylactis，特别是可选自菌株嗜热链球菌(NCC 1529)(CNCMI-1984)，嗜热链球菌(NCC 1561)(CNCMI-1985)，乳酸乳球菌乳亚种(NCC 2211)(CNCMI-1986)，乳酸乳球菌乳亚种biovar dioacetylactis(NCC 2225)(CNCMI-1987)。所述乳酸菌优选是乳源性(即，来源于奶或奶酪)的。本专利技术的乳酸菌是“低度酸化”的，也就是说它比病原菌的酸化程度要小。因此，它可使口腔的pH值约为5.5-7。这些菌株是在具有粘附于牙齿表膜能力的乳酸菌株中选择的，它们的最佳生长温度约为37℃，这是口腔的温度。它们还能够产生生长抑制因子，这一点与它们的粘附性结合，可使它们显著降低内氏放线菌基因种1和2的定居程度。此外，它们能够发酵葡萄糖和蔗糖，且不合成生龋菌株的致病因子——葡聚糖。还可将至少一种乳酸菌株与细菌素联合使用。所述乳酸菌株可包括在食品，宠物食品，化妆用或药用组合物中。因此，这些组合物优选牙膏，漱口水，口香糖，喷雾剂，饮料，糖果，婴儿代乳品，冰淇淋，冷冻甜食，甜色拉调味品，奶制品，奶酪，夸克，酸乳酪，酸奶，咖啡酪或生奶油。所用外源性乳酸菌的量至少为104-109cfu/g。在口腔微生物区系中掺入上述细菌的作用是在大鼠模型中测试的。菌株CNCMI-1985和CNCM-1986能够调节口腔微生物的生态学，显著减少总CFU数。特别是，所述菌株能够显著降低已感染大鼠的内氏放线菌基因种2的定居程度(见实施例)。所选菌株的生化特性发酵模式用api 50 CH bioMerieux带试验(bioMérieux SA，69280Marcy-l′Etoile，法国)对49种单糖进行测试，结果在表1中给出。表1.乳酸乳球菌CNCMI-1987(A)，乳酸乳球菌CNCMI-1986(B)，嗜热链球菌CNCMI-1984(C)，嗜热链球菌CNCMI-1985(D)的糖发酵。+，++，+++，++++表示3，6，24或48小时后开始发酵所述菌株嗜热链球菌(NCC 1529)，嗜热链球菌(NCC 1561)，乳酸乳球菌乳亚种(NCC 2211)，乳酸乳球菌乳亚种biovar d本文档来自技高网...

【技术保护点】
对于口腔微生物区系是外源性的乳酸菌株在制备用于减少哺乳动物牙菌斑并治疗或预防根龋及其它与内氏放线菌有关疾病的组合物中的用途，其中所述乳酸菌株因具有粘附于牙齿表膜并产生生长抑制因子的能力而被选择。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：EM科梅利，B古根黑姆，JR尼泽尔，F斯廷格勒，
申请(专利权)人：雀巢制品公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]