本发明专利技术公开了能够与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）相结合的分离的人单克隆抗体，以及相关的基于抗体的组合物和分子。人抗体可以在能够通过进行Ｖ－Ｄ－Ｊ重组和同种型转换产生人单克隆抗体多种同种型的转染瘤或非人转基因动物（例如转基因小鼠）中产生。本发明专利技术还公开了包含人抗体的药物组合物、能够产生人抗体的非人转基因动物和杂交瘤，以及使用人抗体的治疗和诊断方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗丙型肝炎病毒(HCV)人抗体及其用途相关申请本申请要求提交于2007年2月21日的美国临时专利申请No. 60/902,432的优先权和权益，因其所有的主题均与本申请相同。上述 申请所公开的全部内容都通过引用方式结合于本文中。
技术介绍
丙型肝炎病毒(HCV)最初被称为"非甲非乙型肝炎病毒" (NANBH)，是一种属于黄病毒科的正链、单链RNA病毒。其基因组 包含一个编码大约3000个氨基酸残基的多蛋白的长可读框(Cho0等人 (1989) Science 244:359-362 )。多蛋白被宿主细胞和病毒蛋白酶加工成为 三种主要的结构蛋白以及几种病毒复制所必需的非结构蛋白。HCV的核 苷酸序列是高度可变的，最趋异的分离林(isolate)仅共享60%的核苷 酸序列同源性。已经鉴定出几种具有略微不同的基因组序列的不同HCV 基因型。目前基于序列数据，将来自全世界的分离抹分组为6种主要类型， 每组包含几种亚型(Simmonds等人(1995) Hepatology 21: 570-83 )。类 型1 -3几乎占据了欧洲所有的感染，类型4在埃及和扎伊尔流行，类 型5在南非流行，类型6在香港流行。该病毒主要经过血液和血液产品传〗番。大部分的感染个体或者在 1990年(开始执行血液供给的HCV筛查)以前接受过输血，或者使用 过静脉内药物。全世界大约2-4亿人患慢性HCV感染，其中大约2-5百 万人在美国。慢性HCV感染大约占总感染的80%，可持续终生，并且 经常导致发展成为肝硬化和肝癌。由于该病毒存在非常严重的抗原变异性，因而针对HCV的疫苗发展緩慢。即使当疫苗可以获得时，该疫苗也不能减轻全世界数百万慢性HCV携带者所面临的问题。尽管存在一些中和抗体，但是大多数HCV抗体对清除感染不起主要作用。但是，这些中和抗体倾向于是毒抹特异性的，并对新出现的毒才朱无效。目前，唯——种针对HCV诱发的肝病具有确证效果的治疗为使用a-IFN的治疗，但是这种方法仅取得有限的成功。即使是a-IFN治疗的最佳临床试验，也仅报告40-50%的慢性患者有响应，并且当治疗停止之后，这些个体中的50%复发。还有证据显示a-IFN治疗对于一些HCV基因型的效果较差。目前，尚未研发出抗HCV感染的传统药物(除了 a-IFN之外)。因此，需要改进的用于治疗和预防HCV感染的免疫治疗。
技术实现思路
本专利技术提供了一种能够与许多HCV分离林特异性结合、并抑制病毒感染细胞的能力的全人重组抗HCV单克隆抗体，从而解决了上述问题。在一个实施方案中，这通过抗体在体外(例如在HCV假病毒中和试验中)中和(即抑制或阻断)HCV的能力得到证实。在另一个实施方案中，这通过抗体抑制受试者(例如动物或人)的体内HCV感染性的能力得到证实。本专利技术的人单克隆抗体可以有效地、实际上无限量地、以高度纯化的形式制备。因此，该抗体适于预测、诊断和/或治疗接触过HCV的或怀疑接触了 HCV的个体。该抗体可以使用本领域已知的多种制备人抗体的技术来制备。例如，正如此处所列举的，抗体可以在表达人免疫球蛋白基因片段的转基因动物中产生，例如在包含人Ig基因座的转基因小鼠中产生。此外，抗体可以单独给药，或与例如抗HCV疫苗或其它抗体联合给药，以增加感染HCV的受试者(例如动物和人)的存活率。因此，本专利技术具有一些优势，包括但不限于下述10一用于预测、诊断和/或治疗受试者中的HCV的全人重组抗HCV抗体，例如预防或抑制受试者中HCV介导的发病或死亡；- 一种组合物(例如药物组合物)和/或一种试剂盒，包含可以单独使用或与市售的治疗HCV感染的疫苗联合使用的一种或多种全人重组抗HCV抗体；以及-一种用于治疗感染HCV的受试者的改进的被动免疫治疗方法，其可以单独使用，或者与主动免疫治疗(例如HCV疫苗)联合使用。在一个实施方案中，本专利技术的人单克隆抗体或其抗原结合部分能够与HCVE2蛋白质的非构象表位特异性结合。特定的抗体或其抗原结合部分能够与HCVE2蛋白质的表位特异性结合。这样的表位可以位于例如HCVE2蛋白质的氨基酸1-50、 50-100、 100-150、 150-200、 200-250、250-300、 300-350、 350-400、 400-450、 450-500、 500-550、 550-600、600-650、 650-700、 700-746之内，或位于其任何间隔、部分或范围之内。在一个实施方案中，抗体或其抗原结合部分能够与位于大约氨基酸残基412-464、 412-423或413-420之间的表位特异性结合。在另一个实施方案中，HCVE2蛋白质的表位包含氨基酸残基412-423。在另一个实施方案中，HCVE2蛋白质的表位由氨基酸残基412-423组成。在一个实施方案中，HCVE2蛋白质包含氨基酸残基413、 418和/或420。在其它实施方案中，人单克隆抗体或其抗原结合部分的特征为与HCVE2蛋白质特异性结合的Kd小于大約10xl(T6M。在一个特定的实施方案中，抗体或其抗原结合部分与HCVE2蛋白质(或其片段)特异性结合的KD为至少大约10 x 10—7 M、至少大约10 x l(T8 M、至少大约10x10—9M、至少大约10x 10—1GM、至少大约10xl(yHM、至少大约10x 10"M或更有利的KD。在各种其它实施方案中，抗体或其抗原结合部分包含一个重链可变区，该重链可变区包含与克隆83-128 (SEQ ID NO: 1)、 95-2 (SEQ ID NO:3)或073-1 (SEQ ID NO: 5)产生的抗体的重链可变区氨基酸序列至少80%、 85%、 90%、 95%、 98%、 99%或更高程度相同的氨基酸序列。在其它实施方案中，抗体或其抗原结合部分包含一个轻链可变区，该轻链可变区包含与克隆83-128 (SEQ ID NO: 2)、 95-2 (SEQ ID NO: 4)或073-1 (SEQ ID NO: 6)产生的抗体的轻链可变区氨基酸序列至少80%、85%、 90%、 95%、 98%、 99%或更高程度相同的氨基酸序列。在另外其它的实施方案中，抗体或其抗原结合部分包含一个重链可变区和一个轻链可变区，该重《连可变区包含与克隆83-128 (SEQ ID NO:1)、 95-2 (SEQ ID NO: 3)或073-1 (SEQ ID NO: 5)产生的抗体的重链可变区氨基酸序列至少80%、 85%、 90%、 95%、 98%、 99%或更高程度相同的氨基酸序列，该轻链可变区包含与克隆83-128 (SEQ IDNO: 2)、 95-2(SEQ ID NO: 4)或073-1 (SEQ ID NO: 6)的轻链可变区氨基酸序列至少80%、 85%、 90%、 95%、 98%、 99%或更高程度相同的氨基酸序列。在其它某些实施方案中，抗体或其抗原结合部分能够与表位特异性结合，该表位与克隆83-128、 95-2或073-1产生的抗体所结合的表位相重叠，和/或与克隆83-128、 95-2或073-1产生的抗体竟争结合HCV或其部分。抗体或其抗原结合部分的重链和轻链可变区通常包含一个或多个互补决定区(CDR)。包括CDR1、 CDR2和CD本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种能够与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２蛋白质上的非构象（线性）表位相结合并且抑制病毒感染细胞的能力的分离的人单克隆抗体或其抗原结合部分。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：T布罗埃林，S索罗安，GJ巴布科克，D阿姆布罗西诺，WD小托马斯，
申请(专利权)人：马萨诸塞州大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。