一种检测黄热病病毒的荧光定量RT-PCR试剂盒及其检测方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测黄热病病毒的荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒，包括ＲＴ－ＰＣＲ缓冲液，逆转录反应酶混合物和ＤＥＰＣ水，正向引物５’－ＧＴＴＡＧＡＧＲＡＧＡＧＣＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡ－３’；反向引物５’－ＡＧＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＴＣＲＣＡＧＡＣＣ－３’；荧光探针５’－ＦＡＭ－ＴＧＡＣＧＣＣＷＧＧＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧ－ＢＨＱ１－３’，Ｒ代表Ａ或Ｇ，Ｗ代表Ａ或Ｔ。应用该试剂盒检测黄热病病毒，提取待测样品的ＲＮＡ，在反应管中加入反应物扩增，结果判定。本发明专利技术在２２株黄热病病毒完全保守的３－ＵＴＲ位点设计了引物和探针，建立了黄热病病毒的荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测方法，可应用在临床、口岸检验黄热病病毒。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测黄热病病毒的荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒，包括ＲＴ－ＰＣＲ缓冲液和逆转录反应酶混合物，其特征在于，还包括：　正向引物：５’－ＧＴＴＡＧＡＧＲＡＧＡＧＣＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡ－３’；　反向引物：５’－ＡＧＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＴ ＣＲＣＡＧＡＣＣ－３’；　荧光探针：５’－ＦＡＭ－ＴＧＡＣＧＣＣＷＧＧＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧ－ＢＨＱ　１－３’；　其中，Ｒ代表Ａ或Ｇ；Ｗ代表Ａ或Ｔ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：师永霞，相大鹏，李小波，黄吉城，郑夔，洪烨，郭波旋，幸芦琴，钟玉清，
申请(专利权)人：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]