肽经口输递的改进制造技术

通过一种提供在非天然酰胺化位点被酰胺化的活性肽的药物组合物提高经口给药的活性肽生物利用度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请基于2003年1月21日提交的第60/441,856号美国临时申请并要求上述申请的优先权。
技术介绍
本专利
本专利技术涉及经口给药的肽类药品，其活性化合物包含多种氨基酸和至少一个在它们分子结构内的肽键，并涉及提高这种肽活性化合物经口给药的生物利用度的方法。相关技术的描述许多人激素、神经递质、细胞因子、生长因子和其它重要的生物化合物都以肽作为它们分子结构的实质部分。许多疾病应答实际是提高患者体内这些肽化合物的水平。治疗有效量的这些生物相关肽可以通过许多方式施用于患者。然而，正如下面将要讨论的，优选的经口给药对于这种类型的活性化合物是很困难的。例如，鲑鱼降钙素是一种肽类激素，它能够降低钙从骨骼的释放。当被用于处理骨相关疾病或钙疾病(比如骨质疏松症、佩吉特病(乳头乳晕湿疹样癌)、恶性高钙血症等)时，它有帮助维持骨密度的功效。已经分离到许多种降钙素(人降钙素、鲑鱼降钙素、鳗鱼降钙素、依降钙素(elkatonin)、猪降钙素和鸡降钙素)。在这些不同的降钙素类型之间具有显著的结构非同源性。比如、在构成人降钙素和鲑鱼降钙素的氨基酸之间只有50％的一致性。尽管在分子结构上有差异，鲑鱼降钙素能够被用于人类治疗上述钙应答疾病。另外一种肽类激素的例子是甲状旁腺素(PTH)。PTH是由甲状旁腺产生的，是血钙水平的主要调节剂。PTH是一种多肽，合成的多肽可用Erickson和Merrifield披露的方法制备(The Proteins，Neurath等编，Academic Press，New York，1976，第257页)，并用Hodges等的方法(1988，Peptide Research 1，19)或Atherton，E.和Sheppard，R.C.的方法(Solid Phase Peptide Synthesis，IRL Press，Oxford，1989)修饰。当血钙降至低于正常水平时，甲状旁腺释放PTH，并通过骨钙的再吸收、通过增加从肠吸收钙、以及通过增加从肾小管内的初生尿液中重吸收钙来提高血钙水平。尽管持续地注入低水平的PTH能够从骨骼中除掉钙，实际上间歇地注射同样的低剂量能够促进骨骼生长。Tregear在美国专利第4,086,196号中描述了人PTH类似物，并声称，在体外细胞测试中前27到34位的氨基酸在刺激腺嘌呤环化酶上最有效。Rosenblatt在美国专利第4,771,124号中披露了hPTH类似物的性质，其中Trp23被苯丙氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、缬氨酸、酪氨酸、β-萘丙氨酸或者α-萘丙氨酸取代，可作为PTH拮抗剂。这些修饰过的hPTH类似物有2到6个末端氨基酸被除去，导致被用于治疗骨质疏松时失去最重要的拮抗活性。这些类似物被设计为PTH或者PTH相关的肽类的抑制剂。这些类似物被主张用于治疗与一些肿瘤相关的高钙血症。Pang等(WO93/06845，1993年4月15日公开)描述了hPTH类似物，其涉及用众多氨基酸取代Arg25、Lys26、Lys27，包括丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸或者缬氨酸。据称它们可有效治疗骨质疏松，且对血压和平滑肌的影响最小。PTH通过激活两种第二信使系统起作用Gs蛋白活化的腺嘌呤环化酶(AC)和Gq蛋白活化的磷脂酶Cβ。后者导致激活膜结合蛋白激酶C(PKC)的活性。已知PKC的活性需要PTH残基29-32(Jouishomme等，(1994)J.Bone Mineral Res.9，(1179-1189))。已经证实骨骼生长的增加，即在骨质疏松的治疗中有用的效应，是与肽序列提高AC活性的能力关联的。天然的PTH序列被证实具有所有这些活性。人hPTH-(1-34)序列通常表示如下Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys HisLeu Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys LeuGln Asp Val His Asn Phe-OH(SEQ ID NO1)美国专利5,955,425和6,110,892披露了不同的PTH类似物。下列线性类似物(平头hPTH)、hPTH-(1-31)-NH2只有AC刺激活性，并且被证实在切除卵巢的鼠模型的骨骼重建中是完全活跃的(Rixon，R.H.等，(1994)J.Bone Miner.Res.9，1179-1189；Whitfield等，(1996)，Calcified Tissue Int.58，81-87；和Willick等，美国专利5,556,940)。Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys HisLeu Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys LeuGln Asp Val-NH2(SEQ ID NO2)。在以前的技术中使用的肽类药物通常通过注射或者经鼻给药。胰岛素是一种通常通过经注射给药的肽类药物的例子。一种优选且更方便的经口给药的方式似乎存在问题，因为肽类活性化合物对胃肠的降解很敏感。例如，在以前的技术中报道了当鲑鱼降钙素和甲状旁腺素经口给药时可获得可重复的血药水平的能力，这样的水平是很低的。这被认为是因为这些肽类激素在胃肠道里缺乏足够的稳定性，并且透过肠壁转运到血液中的状况很差。然而注射和经鼻给药比起经口给药，显然更加不方便，且对患者造成更大不适。通常，这种不方便和不适导致患者对治疗方案不顺从。因此，有必要对像胰岛素、鲑鱼降钙素、甲状旁腺素以及其它肽类药物更有效和可重复的经口给药方式在这里更详细的讨论。胃和肠的蛋白水解酶能够降解肽，使它们在吸收进入血管之前被失活。任何数量的在胃蛋白酶(代表性地具有酸性最适pH范围)水解降解下幸存的肽，后来将遭遇小肠蛋白酶和胰腺分泌的酶(代表性地具有中性至碱性的最适pH范围)。特殊的困难起因于像鲑鱼降钙素这样的肽具有相对大的分子量以及其携带电荷的分布。这可能使鲑鱼降钙素更加难以渗透沿肠壁分布的粘液，或者穿过肠刷状缘膜进入血液。一种提高经口给药的肽的效力的方式是保护它们免遭胃肠蛋白水解酶，同时又提高它们从肠内的吸收，从而提高它们的生物利用度。改进口服效力在几个原因上是很重要的。首先，肽和蛋白质很贵，不管是用化学合成还是重组DNA技术生产。因此，越是能够增加生物利用度的方法，在治疗药物口服组合物中需要的剂量越少。其次，口服肽的生物利用度越高，个体吸收的日剂量的变化就越小。第三，口服肽的生物利用度越高，对于肽产品降解的担心就越少，因为这样的降解产物能够作为肽结合激发生物活性的受体的激动剂或者拮抗剂。专利技术概述因此，本专利技术的一个目的是提供一种治疗有效的口服药物组合物以便可靠输递药物肽，例如生理活性肽试剂，比如胰岛素、鲑鱼降钙素、甲状旁腺素、加压素或其类似物和这里讨论的其它物质。本专利技术的另一个目的是提供提高这些肽的生物利用度的治疗方法。本专利技术的再一个目的是提供通过口服施用鲑鱼降钙素或PTH 1-31NH2治疗骨相关疾病和钙疾病的方法。在一方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种经口输递生理活性肽试剂的药物组合物，其包含治疗有效量的所述活性肽，其中，所述活性肽在一个非天然酰胺化的位点被酰胺化。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：NM梅达，W斯特恩，JP吉力干，
申请(专利权)人：尤尼金实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]