新型溶纤维蛋白酶、其制备方法及用途技术

本发明专利技术涉及一种新型溶纤维蛋白酶（亦称溶血纤维蛋白酶）及其制备方法与用途。本溶纤维蛋白酶经实验证明具有分解纤维蛋白（ｆｉｂｒｉｎ）及纤维蛋白原（ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ）的能力，但不会活化溶血纤维蛋白酶原（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ）。由于本新型酶不具备活化溶血纤维蛋白酶原的能力，使本发明专利技术的物质在应用时（如中风后处理）可避免发生不可预测的出血现象。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种新型溶纤维蛋白酶、其制备方法及用途。
技术介绍
当血管受损时，通过凝血作用于伤口处形成血液凝块，以作为暂时性的屏障，阻 止血液自伤口流出，并抵抗血管内压力而使伤口得以复原。血液凝块主要是由称为纤维蛋 白(fibrin)的初级蛋白所构成，纤维蛋白是由其前体纤维蛋白原(fibrinogen)在凝血 酶(thrombin)作用下转变成的(Voet和Voet， 1990)。在健康的人体中，血液凝块的稳定 性，包括血块收縮性(blood clot retraction)及溶纤性(fibrinolyticproperties)等， 受到血液凝块形成过程中所具有的结构性、生物性、生理性及化学性特征的影响(Weisel， 2007)。 在生理平衡的环境下，血液凝块最终会被溶纤维蛋白酶(plasmin)分解，以避免 在血管中形成栓塞(thrombosis)。若血液凝块未正常分解，将会阻碍血液运送养分到各组 织而造成疾病，例如心脏血管疾病、高血压等(Haines和Bussey， 1995)。 目前用于治疗血栓相关疾病的药物包括抗凝血剂、抗血小板凝集剂及血栓溶解 剂(thrombol本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种溶纤维蛋白酶，其特征为：　　（ａ）Ｎ末端序列为：ＡＳＹＮＧＸＳＳ；其中，Ａ代表丙氨酸残基，Ｓ代表丝氨酸残基，Ｙ代表酪氨酸残基，Ｎ代表天冬酰胺残基，Ｇ代表甘氨酸残基及Ｘ代表未测出；　　（ｂ）如图４Ａ所示的ＬＣ／ＭＳＭＳ图谱；及　　（ｃ）分子量为２０－２３ｋＤ。

【技术特征摘要】
一种溶纤维蛋白酶，其特征为(a)N末端序列为ASYNGXSS；其中，A代表丙氨酸残基，S代表丝氨酸残基，Y代表酪氨酸残基，N代表天冬酰胺残基，G代表甘氨酸残基及X代表未测出；(b)如图4A所示的LC/MSMS图谱；及(c)分子量为20-23kD。2. 根据权利要求1所述的溶纤维蛋白酶，其中，溶纤维蛋白酶由菇蕈分离而得。3. 根据权利要求1所述的溶纤维蛋白酶，其中，溶纤维蛋白酶由裂褶菌分离而得。4. 根据权利要求3所述的溶纤维蛋白酶，其为单体。5. 根据权利要求1至4中任一项所述的溶纤维蛋白酶，其具有分解纤维蛋白及纤维蛋 白原的能力，但不会活化溶纤维蛋白酶原。6. 根据权利要求1至4中任一项所述的溶纤维蛋白酶，其可用于制备用于治疗血栓相 关疾病的药物。7. —种制备如根据权利要求1所述的溶纤维蛋白酶的方法，其包括(a) 将可产生溶纤维蛋白酶的菇蕈进行液体培养；(b) 将步骤(a)得到的培养液中的菇蕈菌丝体滤除；(c) 将步骤(b)得到的培养液以尺寸排阻型分离膜划分，得到第一滤液及第二滤液，其 中第一滤液包含可通过分离膜的相对较小的分子，而第二滤液包含不可通过分离膜的相对 较大的分子；(d) 使步骤(c)得到的第一滤液中的蛋白质沉淀，得到粗蛋白质；及(e) 将步骤(d)得到的粗蛋白质纯化，得到溶纤维蛋白酶。8. 根据权利要求7所述的方法，其中，菇蕈为裂褶菌。9. 根据权利要求7所述的方法，其中，步骤(c)的尺寸排阻型分离膜为陶瓷滤膜。10. 根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈秀男，
申请(专利权)人：陈秀男，
类型：发明
国别省市：71[中国|台湾]