具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌，它的 16S rDNA具有SEQ ID No.1的序列，该菌株在固体培养基中呈淡桔红色，圆形， 边缘整齐，光滑湿润，直径为1-2mm；菌体的形态为稍粗杆菌，长度在10μm 左右；形成芽孢，芽孢为椭圆形；好氧，革兰氏染色阳性，接触氧化酶阴性， 能以BTEX混合物或其中的单一物质为唯一碳源，可实现高效降解BTEX混合 物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及苯系化合物生物处理
，尤其涉及一种具有降解苯系化 合物能力的解淀粉芽孢打菌及其应用。
技术介绍
苯系化合物是一类易挥发的单环芳香类化合物，包括苯、甲苯、乙苯、二甲苯等，简称为BTEX，广泛应用于石油、化工、农药、纺织、造纸、油漆、制 鞋等工业的生产过程，是环境中分布较广的一类有毒化合物。BTEX具有三致 效应，被许多国家列入优先控制污染物，且已被确认为强致癌物质。研发废水、 废气中BTEX的污染控制技术显得十分重要和迫切。目前，生物降解技术是降 解这类物质的最有效方法之一。采用生物法净化废水、废气中BTEX等有毒化合物的关键之一便是获得具 有高效降解BTEX能力的优良菌株。人们已经分离出了多株单环芳香类化合物 降解菌，主要有假单胞菌(i^e^fomoww)、不动杆菌c/wetok cfe。、红球菌 (i /zO(iococcws)、罗尔其Jf通氏菌(i a/加m'a)、产碱杆菌(嚴fl/扭es)、黄杆菌 属(F/avo6ac&Www)、抱并瓦毒属真菌(C7(io/ /H'a/op/zora)、诺卡氏菌(iVocaWa) 等。这些降解菌株仅能降解某一种或两种苯系化合物，且大多数菌株的降解效 率有待进一步提高，而对BTEX混合物中各物质均能实现高效降解的菌株并不 多见。经检索有关专利文献，仅发现有关于芽孢杆菌(万a7/w 6atov/m^ i^4 CGMCC iVo.M92)在厌氧条件下反硝化降解苯的报道，尚未见本专利技术中在好氧 条件下应用Bac/〃M am少/o/^we/a'ms降解BTEX的报道。该降解菌的发现对 BTEX类污染物生物净化的工程实践具有重要意义
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种具有降解苯系化合物能 力的解淀粉芽孢杆菌及其应用。为了实现本专利技术的目的，本专利技术采用的技术方案如下提供一种具有降解 苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌，它的16S rDNA具有SEQ ID No. 1的序 列。该菌株在固体培养基中呈淡桔红色，圆形，边缘整齐，光滑湿润，直径为 l-2mm;菌体的形态为稍粗杆菌，长度在10pm左右；形成芽孢，芽孢为椭圆形； 好氧，革兰氏染色阳性，接触氧化酶阴性，能以BTEX混合物或其中的单一物 质为唯一碳源。本专利技术的有益效果是本专利技术的具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢 杆菌可实现高效降解BTEX混合物。本专利技术的具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌于2008年10月29 日保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为湖北省武汉市武昌 珞珈山武汉大学内)，保藏编号为CCTCC NO: M208181。附图说明图1为Sac/〃M w^/o/—,e/ac/my byf-5显微镜和扫描、透射电镜照片，其中， a为革兰氏染色显微镜图片，b为芽孢染色显微镜图片，c为扫描电镜图片，d 为透射电镜图片；图2为Bac/〃ws awy/o/z々we/ac/era byf-5的系统发育树图3为不同温度下菌Bac/〃ws awy/o/z々we/ac&ra byf-5对BTEX的降解曲线图4为不同pH下菌Bac/〃w am_y/o/&we/ac/era byf-5对BTEX的降解曲线图； 图5为菌5a7/ws awj/o/^we/ac/ms byf-5对不同初始浓度的苯的降解曲线图6为菌Bac/〃w amy/o/z々we/ac/ms byf-5对不同初始浓度的甲苯的降解曲线图7为菌万a7/w am少/o/Z^^/ac/era byf-5对不同初始浓度的乙苯的降解曲线图8为菌Sa'〃ws amj/o/^we/acz'ms byf-5对不同初始浓度的邻二甲苯的降解 曲线图9为菌5ac/〃ws aw_y/o/7^e/ac/era byf-5对混合底物的降解曲线图。具体实施例方式本专利技术提供了一种具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌(^MZ7/Ma，fo/—咖c/ms1)， 申请人:将其编号为byf-5。所述S(3'〃ws 附y/o/z々Me/ac/e似byf-5来源于中国石化浙江镇海炼化污水处 理厂曝气池中的活性污泥中，经驯化、分离、纯化获得。该菌株在固体培养基中呈淡桔红色，圆形，边缘整齐，光滑湿润，直径为 l-2mm;菌体的形态为稍粗杆菌，长度在lOpm左右；形成芽孢，芽孢为椭圆形； 好氧，革兰氏染色阳性，接触氧化酶阴性，能以BTEX混合物或其中的单一物 质为唯一碳源，其生理生化特征如表1所示。Sac/Z/ws a^y/o/^we/ac/my byf-5的 16S rDNA具有SEQ ID No. 1的序列。表1.5a'〃ws aw_y/o/—咖c/ms byf-5的生理生化特征实验项目结果M.R(甲基红)+V.P实验+淀粉水解酶_吲哚实验+硝酸盐还原——明胶实验—H2S实验+葡萄糖+乳糖 _其中，+ 表示能利用或反应阳性；一表示不能利用或反应阴性 所述5腦'〃ws應y/。/—咖c/ms byf-5的16S rDNA的Genebank的登录号为 FJ169474,已于2008年10月29日保藏在中国典型培养物保藏中心(简称 CCTCC，地址为湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学内)，保藏编号为CCTCC NO: M 208181。本专利技术的Baa'〃us aw_y/o/^we/ac/ms byf-5可用于污水体系中苯系化合物的 高效降解，具体方法为将Bac/〃ws amy/o/^we/ac/era byf-5 CCTCC M 208181悬浮 于含有苯系化合物的污水中，在15-35C， pH5-9的条件下培养。本专利技术的Bacz7/ws amy/o/z々i^/ac/era byf-5在污水中的最佳培养温度为30°C ， 最佳pH为8。下面根据实施例详细描述本专利技术，本专利技术的目的和效果将变得更加明显。 实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。实施例中的百分含量，如无 特别说明，均为质量百分含量。实施例l.Bac/〃w amy/oge/adembyf-5的分离、纯化及其鉴定1. 5ac/〃us 鹏—《w咖c z'era by f- 5的分离及纯化5 cz7/m aw_y/owe/ac/em byf-5是从浙江镇海炼化污水处理厂曝气池的活 性污泥中取样，经驯化、分离及纯化得到的革兰氏阳性菌。具体步骤如下(1) 污泥定向驯化取浙江镇海炼化污水处理厂曝气池的活性污泥。活性污泥进行苯系化合物 (BTEX)定向驯化，每5天为一驯化周期，驯化3个月，直至活性污泥对苯系 化合物实现稳定高效降解。(2) 菌株的筛选与纯化 利用苯系物降解菌筛选培养基对活性污泥进行菌株筛选。苯系物降解菌筛选培养基成分KH2P04， (X5g; K2HP04， 0.5g; NaCL， 0.01g; NH4CL， lg; MgCl2 6H20， 0.2g; CaCL2， 0.02g; MnS04， 0. 339mg; ZnS04， 0.428mg;钼 酸铵，0.347mg;琼脂，15g;蒸馏水，1000ml; pH 7.2-7.4。苯系物另外分别添 加苯，200mg/l;甲苯，200mg/l;乙苯，200mg/l;邻二甲苯200mg/l。按照菌株分离纯化的常规方法，在恒本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，它的１６ＳｒＤＮＡ具有ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ．１的序列。保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为ＣＣＴＣＣ　ＮＯ：Ｍ　２０８１８１。

【技术特征摘要】
1、一种具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，它的16SrDNA具有SEQ ID No.1的序列。保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NOM 208181。2、 权利要求1所述具有降解苯系化合物能力的解淀粉芽孢杆菌在降解BTEX混 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建孟，张丽丽，王家德，叶峰，吴石金，
申请(专利权)人：陈建孟，张丽丽，王家德，叶峰，吴石金，
类型：发明
国别省市：86