食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂的快速检测方法技术

本发明专利技术公开一种食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂的快速检测方法，该方法是先对待测样品进行预处理，提取富集违法添加的苯二氮卓类化合物，再结合胶体金免疫层析法，从而实现对食品、药品或保健品中添加苯二氮卓类化合物的快速检测。本发明专利技术测定目标覆盖面广，操作简单、检测速度快，检测结果易观察，可实现对大批量样品的快速筛查，从大批量样品中将违法添加苯二氮卓类化合物的样品挑选出来，大大降低了成本，减少了工作量。本发明专利技术的预处理方法可有效富集待测物的浓度，使检测结果更加灵敏和准确。本发明专利技术适用于食品、药品或保健品中各种常见剂型，可填补行内缺乏系统筛查方法，有效施行食品药品市场监管，保障人民饮食和用药安全。

Rapid detection method of benzene two nitrogen compound doping in food, medicine or health care product

The invention discloses a method for rapid detection of food, medicine or health products in benzene two nitrogen compounds Zhuo doping, the method is to sample pretreatment, benzene two nitrogen compounds Zhuo extraction and enrichment of illegal additives, combined with colloidal gold immunochromatography, so as to realize the rapid detection of add benzene two nitrogen Zhuo compound food, drugs or health products. The determination of target coverage, simple operation, fast detection speed and detection result is easy to observe and can realize the rapid screening of large quantities of samples, selected from large quantities of samples, the illegal addition of benzene two nitrogen compounds Zhuo samples, greatly reduce the cost, reduce the workload. The pretreatment method of the invention can effectively enrich the concentration of the analyte to be detected, and the detection result is more sensitive and accurate. The invention is suitable for various common dosage forms in food, medicine or health care products, and can be used to fill in the system lack of systematic screening method, effectively implement the supervision of the food and drug market, and guarantee the safety of the people's diet and medication.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品、药品或保健品的检测氮卓类化合物掺杂的快速检测方法。顷域，具体涉及食品、药品或保健品中苯二
技术介绍
随着现代社会竞争的日渐激烈，压力越来越大，许多人患了焦虑症和抑郁症，从而 诱发睡眠障碍症和失眠。患者需要依靠药物来缓解这些症状，常用的药物有地西泮(安 定)、阿普唑仑(佳静安定)、艾司唑仑等等，属于二类精神药物，其使用受到严格限制，因此 对于长期需服药的患者来说，具有镇静催眠功效的食品、中成药或保健食品可能成为他们 的首选。 苯二氮卓类药物(BZ)是目前临床常用的镇静催眠药物，它克服了巴比妥类引起 的多种缺点，在国外已为社会化的OTC药物，减轻了许多患者的症状。不法商人正是利用了 苯二氮卓类药物的特点，擅自在食品、中成药及保健食品中非法添加苯二氮卓类化合物的 方式从而达到快速起效的目的，再利用其长期服用副作用小的卖点，谎称纯中药制剂，吹 嘘和夸大疗效，使得消费者认为服用后真的有效，以为觅得良药，服用者在毫无知情的情 况下服用会对健康带来很大的风险，尤其会对这类药物产生躯体上和精神上的依赖，不仅 如此，在服用时无意中还充当假劣商品的宣传者。 苯二氮卓类药物大多数属于1，4-苯骈二氮卓类衍生物，在化学结构上具有共同的母核，由于侧链取代基团的不同而产生了一系列的苯二氮卓类药物，其不同的衍生物具有不同的药理特性。临床常用的有地西泮、氯氮卓、硝西泮、氯硝西泮、劳拉西泮、艾司唑仑等20余种。该类药物易溶于丙酮、氯仿，在乙醇、甲醇中溶解，几乎不溶于水。目前对苯二氮卓类药物非法添加的检测，主要是采用高效液相色谱_质谱/质谱联用技术，这种技术需要昂贵的检测仪器，检测条件也较复杂，还会遇到对操作人员的培训、仪器的维护保养等等的问题，因此非常不利于日常食品药品的监管。 此外，文献记载的还有采用高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法、薄层扫描法等对苯二氮卓类药物进行测定，但是这些方法均需对样品进行复杂的前处理过程，同时需要色谱柱、薄层板等各种耗材，检验所需的时间也较长，同样不适用现场监管。 胶体金免疫层析法，是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上，利用待检物与金标试剂的特异性结合，从而可通过肉眼观察到显色结果。利用这种方法制备检测试纸条，具有体积小、携带方便、不需要仪器设备、操作简单、可现场检测、3 5min出结果以及结果肉眼可辨等诸多优点，非常适合对大批量样品进行现场初筛。 中国技术专利CN2938101Y给出一种快速检测苯二氮卓类药的胶体金试纸， 可基于胶体金免疫层析法对苯二氮卓类药进行检测。 然而食品、药品或保健品的组方成分非常复杂，苯二氮卓类化合物的非法掺杂的量未知，且具有镇静催眠功效的食品、药品或保健品大多为固体制剂，无法实现金标试剂与 待检物特异性的结合，从而无法充分发挥胶体金免疫层析法的检测优势。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种成本低、操作简单，能有效富集待测成分，检测结果易观察且准确率高的，基于胶体金免疫层析技术对食品、药品或保健品 中苯二氮卓类化合物掺杂进行快速检测的方法。本专利技术的上述目的是通过如下方案予以实现的 —种，该方法是基于胶体金免疫层析技术，在对食品、药品或保健品先进行预处理，富集待测苯二氮卓类化合物，再结合胶体金免疫层析法，从而实现对苯二氮卓类化合物的快速检测。 因为食品、药品或保健品，通常都是胶囊剂、片剂或丸剂等固体制剂，其组方成分复杂，对检测结果影响很大，因此为提高检测的灵敏度和准确性，本专利技术结合胶体金免疫层析技术以及待测样品的特点，对预处理方法进行了试验摸索，最后发现一种能覆盖目前的主流的苯二氮卓类化合物的提取方法，可有效富集待测物(苯二氮卓类化合物)浓度的预处理方法，其步骤如下 采用有机溶剂作为提取试剂，取待测样品适量，加入有机溶剂，振摇后，加水稀释， 过滤后收集滤液，收集的滤液用于后续胶体金免疫检测。 上述预处理过程中，有机溶剂可以是氯仿、甲醇或乙醇等本领域技术人员常用有 机溶剂。考虑到本专利技术的快速检测方法要在食品药品安全监督现场进行，为了保障操作者 安全及对环境无污染，本专利技术优选无水乙醇作为提取溶剂。 上述预处理过程中，有机溶剂的使用量以可以浸没待测样品为宜，实际操作时可 选择1 2ml的使用量，基本可覆盖不同剂型的不同重量的需要。 上述预处理过程中，为了保证提取完全，振摇时间需不少于IO秒，以适应各种剂 型的需要。 上述预处理过程中，振摇后加水稀释，此时的加水量需考虑试纸的耐受程度、提取 液的过滤以及尽可能减少用量，方便操作和节约成本等条件，因此本专利技术人对振摇后加水 稀释的加水量进行试验研究。 通过试验发现，用于后续加样的滤液中，若有机溶剂的浓度大于50% (有机溶剂 占滤液总体积的百分比)，则苯二氮卓类胶体金标记试纸不能正常使用，因而使用前需加入 lml以上的水进行稀释。同时，考虑到提取液在过滤时要消耗一些溶液，因此在实际操作时， 振摇后加水稀释至总体积为10ml，既确保试纸的灵敏度，又保证有足够的提取液进行滤过， 以备后续的操作，并且用于承载10ml容量的容器，体积小，便于携带、方便大批量样品进行 快筛试验。 待测样品经过上述预处理操作后，其所得滤液中待测物质(苯二氮卓类化合物) 的纯度和含量都满足胶体金检测试纸的使用要求，此时的溶液采用胶体金免疫层析试纸对 其进行检测，则检测结果清晰，灵敏度高，准确度高。 可用于检测苯二氮卓类化合物的胶体金免疫层析试纸已经为市售产品，但该试纸 目前只能用于检测液体样品中是否含有苯二氮卓类化合物，而无法对固体、膏体类样品进4行检测，本专利技术通过一步预处理步骤，从而可以将这类试纸用于固体或膏体类样品中苯二 氮卓类化合物的检测。 检测方法以及结果判断均为本领域技术人员所公知的常识。 将经过预处理的待测样品的滤液滴加到样品垫上，几分钟后观察显色结果，如果 胶体金检测试纸上的控制线(C)和反应线(T)均为紫红色，也就是胶体金检测试纸上出现 两条紫红色条带，则判定为阴性，待测样品中未添加苯二氮卓类药物；胶体金检测试纸上的 控制线(C)有一条色带，而反应线(T)无色带出现，则判定为阳性，待测样品中添加有苯二 氮卓类药物；如果胶体金检测试纸上的控制线(C)和反应线(T)均无色带出现，或只出现反 应线(T) 一条色带，说明实验无效，应用新的胶体金检测试纸重新测试。 本专利技术的快速检测方法中，测试试纸可制备成条形或者板形。 本专利技术人对66批测试样品，分别采用本专利技术的快速检测方法进行检测，同时采用 高效液相色谱法(二极管阵列检测器)验证，对13批阳性样品采用液质联用技术进行确 证，结果发现，本专利技术的快速检测方法其结果正确率为100%，假阳性、假阴性率为0，完全 可胜任现场的监督检查。 与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果 1.本专利技术的检测方法的测定目标覆盖面广本专利技术检测方法其测定目标覆盖目 前主流的苯二氮卓类药物品种，包括艾司唑仑(舒乐安定)、三唑仑(三唑安定)、奥沙西泮 (舒宁)、地西泮(安定)、阿普唑仑(佳静安定)、硝西泮(硝基安定)、氯氮卓、氯硝西泮和 劳拉西泮等等，而现有法定检测方法仅对苯二氮卓类药物中的艾司唑仑、地西泮和氯硝西 泮三种进行测定，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂的快速检测方法，其特征在于该方法是先采用有机溶剂对待测样品进行预处理，再采用胶体金免疫层析技术，对食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂进行快速检测。

【技术特征摘要】
一种食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂的快速检测方法，其特征在于该方法是先采用有机溶剂对待测样品进行预处理，再采用胶体金免疫层析技术，对食品、药品或保健品中苯二氮卓类化合物掺杂进行快速检测。2. 根据权利要求1所述快速检测方法，其特征在于所述有机溶剂为氯仿、甲醇或无水 乙醇。3. 根据权利要求2所述快速检测方法，其特征在于所述有机溶剂为无水乙醇。4. 根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁雪萍，刘杜妙，林暖丹，李惠敏，
申请(专利权)人：广东省惠州市药品检验所，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]