一种胶体金标记的快速检测条制造技术

技术编号:3997226 阅读:217 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术“一种胶体金标记的快速检测试纸条”,属于生物检测领域。包括粘连在片状载体材料上的反应层,所述反应层一端到另一端依次为相邻接的点样区、胶体金结合区、检测区、回收区,所述点样区铺有玻璃纤维,所述胶体金结合区铺有胶体金结合垫,所述检测区铺有硝酸纤维素膜,其特征在于:所述反应层还包括胶体金结合垫与片状载体材料之间的一层无纺布。本发明专利技术进一步采用无纺布作为胶体金结合垫的材料,实验数据证明,本发明专利技术的快速检测试纸条在检测速度,试剂稳定性方面都显著优于现有其他胶体金标记检测试纸。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,特别涉及一种胶体金标记的快速检测试条。
技术介绍
免疫胶体金技术(Immunogold labelling techique)是上世纪80年代继荧光素、 放射性同位素和酶三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。该技术主要利用了 金颗粒具有高电子密度的特性,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,形成肉眼可见 的红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法 中。该技术主要是将特 异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维膜上,胶体金结合垫为吸附或涂抹有胶体金标 记试剂在玻璃纤维膜,当待测样品加到试纸条一端的样品垫上后,通过毛细作用向前移动 到胶体金结合垫上并溶解胶体金结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的 抗原或抗体区域时,待测物金标试剂复合物与之发生特异性结合而被截留,胶体金标记聚 集在检测带上,可通过目测得到直观的显色结果;而游离的标记物则越过检测带,从而达到 与检测物自动分离的目的。胶体金颗粒本身为红色,不需要加入发色试剂,省却了酶标的致 癌性底物及终止液的步骤,对人体无毒害,金标记物比酶标记物更稳定,试验结果可以长期 保存而不腿色。免疫胶体金层析技术作为诊断试剂广泛应用到临床后,由于它的快速简便、 准确,具有高度特异性和高敏感性,结果直观可靠,而且试剂和样品用量极少,无需仪器设 备,简化了烦琐的常规操作过程,同时也减小了因操作引起的误差,是一种目前发展最快的 复合型免疫层析技术。被认为是微生物和传染病及寄生虫病诊断技术标准化最有前途的新 技术之一,并且可以进一步研发定量或半定量检测试纸条以及通用检测试纸条,因此该技 术具有巨大的发展潜力和应用前景。目前生产的胶体金检测试纸条,是在条状的一定长度的双面胶带一面上粘附着反 应层,反应层依次由点样区、胶体金结合区、检测区、检测物回收区组成;点样区为玻璃纤维 或硝酸纤维素膜;胶体金结合区铺着一层固定有胶体金标记物的玻璃纤维;检测区为硝酸 纤维素膜,其上固定有检测带和质控带;检测物回收区通常为吸水性能较强的纤维材料,如 粗纤维吸水膜,相连区域之间的膜材料有部分重叠,且膜材料从下层往上依次为检测区、胶 体金结合区、点样区,有利于检测物在膜材料之间泳动。制作时这些膜材料直接与双面胶 带粘合,然后将双面胶的另一面贴在一个与胶带相同规格的塑料板上即得到检测试纸条, 在检测过程中,当液态待检物滴加到样品吸收膜上,在毛吸作用下,待检物泳动到胶体金垫 上,溶解胶体金结合区域的胶体金标记试剂并相互反应生成复合物,在纤维膜的毛吸作用 下,复合物向检测区泳动,这个过程中,承载胶体金标试剂的玻璃纤维或其它膜材料与双面 胶之间的粘连界面会对胶体金标记试剂的泳动产生阻力,影响检测速度,同时影响胶体金 的化学稳定性,影响检测的灵敏性,并导致试纸条的有效期缩短,对生产厂家造成经济损 失,而目前未见解决这一问题的文献或生产报道。
技术实现思路
本专利技术根据上述领域的缺陷,提供一种胶体金标记的快速检测试纸条。一种胶体金标记的快速检测试纸条,包括粘连在片状载体材料上的反应层,所述 反应层一端到另一端依次为相邻接的点样区、胶体金结合区、检测区、回收区,所述点样区 铺有玻璃纤维,所述胶体金结合区铺有胶体金结合垫,所述检测区铺有硝酸纤维素膜,其特 征在于所述反应层还包括胶体金结合垫与片状载体材料之间的一层无纺布。所述胶体金结合垫为固定有胶体金标记试剂的一层无纺布。 所述胶体金结合垫表面到点样区的玻璃纤维表面覆盖有一层无纺布。所述胶体金结合垫是将胶体金均勻涂抹于无纺布上。所述无纺布密度25-30g/m2,吸水性60-70ml/m2,扩散性瞬间扩散,释放性全 部释放所述片状载体材料为双面胶。所述双面胶的另一面粘附于硬质防水载体板上。本专利技术提供一种胶体金标记的检测试纸条,通过在胶体金结合点垫与片状载体材 料之间加一层无纺布材料。待测样品从点样区泳动到胶体金标结合垫后与其上的胶体金标记 试剂结合一起泳动到检测区,由于胶体金结合垫与载体材料没有直接粘连,粘连界面不会对 胶体金标记标记复合物造成阻力,检测物的泳动速度大大提高,有实验数据证明,本专利技术的检 测试剂条对一般阳性样品(约100mIU/ml)在20秒以内即可在检测区读出检测结果,而其它 现有检测试纸条需要60-80秒才会显示检测结果,即泳动速度提高了 3倍,见表1。本专利技术还提供一种采用无纺布制作胶体金结合垫的检测试剂条,通过对比试验, 发现,本专利技术的检测试剂条上的胶体金标记试剂的稳定性较好。见表2本专利技术进一步优选在胶体金结合区表面至点样区的玻璃纤维表面在覆盖一层无 纺布,由于点样区的玻璃纤维主要提供检测试剂泳动所需要的定向的毛吸作用力,而玻璃 纤维具有疏水性,对检测样品的稳固能力较差,样品容易浮在玻璃纤维表面,由于无纺布具 有良好的吸附能力和释放液体的能力,在表层最先承接检测样品,先吸收了检测样品中的 部分水份,样品中的蛋白质等检测靶标物质被同时渗透到玻璃纤维上,无纺布直接与硝酸 纤维膜接触,这样玻璃纤维和无纺布上的液体通过层析作用很快扩散到硝酸纤维膜上进行 反应,不但可提高检测灵敏性,还可以提高反应速度。本专利技术中制备检测试纸条的胶体金结合垫,采用浸透法制的,即将胶体金_抗原/ 抗体复合物浸透无纺布并涂抹均勻,干燥而得,如此操作可获得性质稳定,充分吸附结合胶 体金抗体/抗原复合物的胶体金结合垫。本专利技术的检测试剂条的其它部分为常规结构,采用常规材料,如检测区采用硝酸 纤维素膜,其上设置检测带和质控带。而本专利技术优选采用密度为25-30g/m2,吸水性为60-70ml/m2,并且要保证液体既能 在无纺布上快速扩散开,又能保证液体通过层析作用在5-10秒钟内全部释放。通过试验发 现,无纺布的密度直接影响产品的性能,太低,无纺布的吸水量太少,达不到产品的检测浓 度,太高,就会导致液体不易在无纺布布上扩散和释放。因此我们把无纺布的技术指标及质 量要求进行了规定,作为无纺布的内控标准附图说明图1检测试纸条层结构示意图1-点样区2-胶体金结合垫3-检测区4-回收区 5_片状载体材料Ia-玻璃纤维Ib-无纺布2a_胶体金结合垫2b_无纺布,3a_硝酸纤维 素膜,4a_吸水纤维具体实施例方式本专利技术提供一种 胶体金标记的快速检测试纸条,包括粘连在片状载体材料5上的 反应层,所述反应层一端到另一端依次为相邻接的点样区1、胶体金结合区2、检测区3、回 收区4,所述点样区铺有玻璃纤维la,所述胶体金结合区2铺有胶体金结合垫2a,所述检测 区3铺有硝酸纤维素膜3a,其特征在于所述反应层还包括胶体金结合垫2a与片状载体材 料5之间的一层无纺布lb。当待测样品从点样区1泳动到胶体金标结合垫2a后与其上的 胶体金标记试剂结合一起泳动到检测区3,由于胶体金结合垫2a不与载体材料5直接粘连, 粘连界面不会对胶体金标记试剂结合复合物造成阻力,检测物的泳动速度大大提高。本专利技术还提供一种采用无纺布制作胶体金结合垫2a的检测试剂条,通过对比试 验,发现,本专利技术的检测试剂条上的胶体金标记试剂的稳定性较好。本专利技术进一步优选在所述胶体金结合垫2a表面至点样区1的玻璃纤维Ia表面覆 盖有一层无纺布2b,由于无纺布具有良好的吸附能力,在点样区表层最先承接本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种胶体金标记的快速检测试纸条,包括粘连在片状载体材料上的反应层,所述反应层一端到另一端依次为相邻接的点样区、胶体金结合区、检测区、回收区,所述点样区铺有玻璃纤维,所述胶体金结合区铺有胶体金结合垫,所述检测区铺有硝酸纤维素膜,其特征在于:所述反应层还包括胶体金结合垫与片状载体材料之间的一层无纺布。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:祝明
申请(专利权)人:蓝十字生物药业北京有限公司
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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