【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物多糖制备，尤其涉及一种粉体硬葡聚糖及其制备方法。
技术介绍
1、硬葡聚糖又称为小核菌多糖，是高分子量，非离子型的支链葡聚糖，它是以β-d-(1-3)吡喃葡萄糖基为主链，每三个葡萄糖由β-d-(1-6)吡喃葡萄糖基为侧链的葡聚糖。硬葡聚糖具有优良的增稠性、假塑性、耐高温、高盐及较广范围的ph适应性，可广泛用于石油、油漆、陶瓷、食品等行业。
2、现有技术中传统的后提取步骤一般采用过滤、离心、萃取等工艺，但由于硬葡聚糖分子在水溶液中形成稳定的三螺旋结构，在发酵液中形成非常稳定的微凝胶或超分子结构，严重影响了硬葡聚糖的提取纯化。同时，硬葡聚糖通常由真菌发酵生产，产物中含有菌丝量大，也会影响产品性能的发挥。因此，需要找到一种从硬葡聚糖发酵液中提取纯度高、收率高、产品性能好的硬葡聚糖的方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种提取纯度高、收率高、产品性能好的硬葡聚糖的制备方法。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种硬葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：
4、(1)对硬葡聚糖发酵液进行破碎后加入酸性蛋白酶和溶菌酶处理，得到发酵液1；
5、(2)用稀碱液将发酵液1的ph调节至8.5～9.5，进行剪切和微波处理，过滤得到发酵液2；
6、(3)将发酵液2调节ph至6.5～7.5，浓缩，制得膏体硬葡聚糖；
7、(4)将膏体硬葡聚糖使用纯水进行稀释
8、优选的，步骤(1)中所述破碎的压力为70～90mpa。
9、优选的，步骤(1)中所述酸性蛋白酶的用量为每1000ml发酵液用30～50u，所述酸性蛋白酶的处理条件为：50～55℃，5～7h。
10、优选的，所述溶菌酶的的用量为每1000ml发酵液用30～50u，所述溶菌酶的处理条件为50～55℃，20～28h。
11、优选的，步骤(2)中所述稀碱液为质量百分比为1～3％的氢氧化钠水溶液；
12、所述剪切的转速为20000～28000rpm，剪切时间为2～5min，剪切在80～90℃下进行，剪切完成后，维持80～90℃的温度1～2h；
13、所述微波处理为用间歇式，微波频率为750～900mhz，处理3～5次，每次10～20s，间隔2.5～3.5min；
14、所述过滤为超滤，所述超滤膜截留的分子量为4×104～8×104dal。
15、优选的，步骤(3)中用质量百分比浓度为5～12％的盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或几种调节ph；
16、所述浓缩是在95～100℃的条件下，维持1～2h。
17、优选的，步骤(4)中所述纯水和膏体硬葡聚糖的体积比为2～3:1；
18、所述一次萃取的溶剂为60～70％(v/v)乙醇或体积分数为65～75％(v/v)异丙醇，萃取时间为30～60min；
19、所述一次固液分离的转速为5000～7000rpm，时间为10～15min。
20、优选的，步骤(4)中脱色是使用大孔吸附树脂，脱色条件为45～65℃，ph 4～6，脱色处理30～60min。
21、优选的，步骤(4)中所述二次萃取的溶剂为90～95％(v/v)乙醇溶液，萃取时间为30～60min；
22、所述二次固液分离的转速为6000～8000rpm，时间为10～15min。
23、优选的，所述干燥为喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度100～180℃、出风温度60～80℃、风机风量70～80m3/h、进料速度为0.45～0.65l/h。
24、本专利技术还提供了由上述制备方法制备得到的硬葡聚糖。
25、本专利技术提供的一种硬葡聚糖的制备方法制备得到的硬葡聚糖产品纯度高、收率高、产品性能优异。本专利技术通过破碎将促进菌体内部的多糖溶出，通过酸性蛋白酶(cas：9025-49-4)降解发酵液和菌丝体中的蛋白质，通过溶菌酶(cas：12650-88-3)降解菌体的细胞壁使得胞内多糖进一步的溶出，加入稀碱液能够降低后续处理过程中发酵液的黏度，其协同剪切和微波处理将更多的葡聚糖分子解离溶解在溶液中；而在较高的温度下保持一段时间，能够进一步提升葡聚糖分子的溶解度，提高溶解的效率；通过对萃取剂和脱色剂的选择提升了产品的纯度。本专利技术制备得到的硬葡聚糖产品的纯度在98％左右，产品收率可达到94.0％，1％(w/v)溶液粘度可达到1624mpa·s。
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1.一种硬葡聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述破碎的压力为70～90MPa；
3.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述溶菌酶的的用量为每1000ml发酵液用30～50U，所述溶菌酶的处理条件为50～55℃，20～28h。
4.如权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述稀碱液为质量百分比为1～3％的氢氧化钠水溶液；
5.如权利要求4所述制备方法，其特征在于，步骤(3)中用质量百分比浓度为5～12％的盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或几种调节pH；
6.如权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述纯水和膏体硬葡聚糖的体积比为2～3:1；
7.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，步骤(4)中脱色是使用大孔吸附树脂，脱色条件为45～65℃，pH 4～6，脱色处理30～60min。
8.如权利要求7所述制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述二次萃取的溶剂为90～95％(v/v)乙醇溶液，萃取时间为30～6
9.如权利要求8所述制备方法，其特征在于，所述干燥为喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度100～180℃、出风温度60～80℃、风机风量70～80m3/h、进料速度为0.45～0.65L/h。
10.如权利要求1～9任一项所述制备方法得到的硬葡聚糖。
...【技术特征摘要】
1.一种硬葡聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述破碎的压力为70～90mpa；
3.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述溶菌酶的的用量为每1000ml发酵液用30～50u，所述溶菌酶的处理条件为50～55℃，20～28h。
4.如权利要求3所述制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述稀碱液为质量百分比为1～3％的氢氧化钠水溶液；
5.如权利要求4所述制备方法，其特征在于，步骤(3)中用质量百分比浓度为5～12％的盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或几种调节ph；
6.如权利要求5所述制备方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：张禹，张国沛，张少华，贾敬敏，林宏博，
申请(专利权)人：河北鑫合生物化工有限公司，
类型：发明
国别省市：
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