【技术实现步骤摘要】
本公开涉及结合人sirp-αv1多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)、人sirp-αv2多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)或两者的分离的抗体，以及与所述抗体相关的多核苷酸、载体、宿主细胞和方法。
技术介绍
1、信号调控蛋白α(sirp-α)是细胞表面受体家族的一部分，在免疫系统调控中起关键作用(参见例如，barclay,a.n.和brown,m.h.(2006)nat.rev.immunol.6:457-64)。sirp-α在各种细胞的表面上表达，所述细胞包括白细胞诸如树突状细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和巨噬细胞。sirp-α包括与外部刺激(诸如配体)相互作用的胞外结构域和介导多种细胞内信号的胞内结构域。
2、sirp-α的主要作用之一是其通过与cd47的相互作用调控免疫应答。cd47在多种细胞类型的表面上表达。当cd47的igsf结构域结合免疫细胞(例如巨噬细胞)上表达的sirp-α的胞外结构域(例如，d1结构域)时，这在免疫细胞中转导了sirp-α介导的信号，所述信号阻止cd47表达细胞的吞噬。因此，cd47用于向免疫系统传达所谓的“不要吃我”信号，以防止对健康细胞的吞噬(参见例如，wo2015/138600和weiskopf,k.等人(2013)science 341:88-91)。然而，cd47也显示出被多种癌症高度表达，在这种背景下它与sirp-α的相互作用被认为可以让肿瘤模拟健康的“不要吃我”信号，以便逃避免疫监视和巨噬细胞的吞噬作用(参见例如，majeti,r.等人(2009)cell 138:2
3、已知sirp-α是人、猴和小鼠中的高度多态性蛋白。例如，已经在nod和c57bl/6小鼠品系中的sirp-α蛋白之间鉴定了20种氨基酸差异，并且这些多态性导致与这些小鼠品系中的人造血干细胞的cd47结合和植入相关的功能性后果。在人类中，已鉴定出sirpa基因的至少10种不同的等位基因(takenaka,k.等人(2007)nat.immunol.8:1313-23；zhao,x.等人(2011),pnas.108:18342-47；van der heijden,j.(2014).genetic variation in humanfc gamma receptors:functional consequences of polymorphisms and copy numbervariation(博士论文))。
4、由于sirp-α-cd47相互作用在正常免疫功能和肿瘤发生中的重要性，以及sirp-α的多态性和其他sirp家族受体的存在，鉴定具有不同的结合特异性以及种内和/或种间交叉反应性的抗体对于开发对人类群体有效的临床候选物以及在各种动物模型中表征这些候选物具有重要意义。因此，需要调节sirp-α功能，例如其与cd47的结合相互作用的研究工具和潜在的临床候选物。还需要分离具有多种sirp-α结合特异性和对cd47-sirp-α结合具有影响的抗体的方法，以便理解并有效地靶向该关键相互作用。
5、本文引用的所有参考文献，包括专利申请、专利公开、非专利文献和uniprotkb/swiss-prot登录号均以引用的方式整体并入本文，如同指明每个单独的参考文献具体且单独地以引用的方式并入。
技术实现思路
1、为了满足这些和其他需要，本文尤其提供了结合人sirp-α多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)的分离的抗体。在一些实施方案中，所述抗体结合人sirp-αv1多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)、人sirp-αv2多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)或两者。在一些实施方案中，所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvlvaagetatlrctatslipvgpiqwfrgagpgreliynqkeghfprvttvsdltkrnnmdfsirignitpadagtyycvkfrkgspddvefksgagtelsvrakps(seq id no:5)的人sirp-αv1多肽的胞外结构域。在一些实施方案中，所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvsvaagesailhctvtslipvgpiqwfrgagpareliynqkeghfprvttvsestkrenmdfsisisnitpadagtyycvkfrkgspdtefksgagtelsvrakps(seq id no:6)的人sirp-αv2多肽的胞外结构域。在一些实施方案中，所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvlvaagetatlrctatslipvgpiqwfrgagpgreliynqkeghfprvttvsdltkrnnmdfsirignitpadagtyycvkfrkgspddvefksgagtelsvrakps(seq id no:5)的人sirp-αv1多肽的胞外结构域并且结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvsvaagesailhctvtslipvgpiqwfrgagpareliynqkeghfprvttvsestkrenmdfsisisnitpadagtyycvkfrkgspdtefksgagtelsvrakps(seq id no:6)的人sirp-αv2多肽的胞外结构域。在一些实施方案中，所述抗体结合三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种不同的人sirp-α变体多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种不同的人sirp-α变体多肽中的每一种包含含有选自由seq id no:5、6和76-83组成的组的氨基酸序列的胞外结构域。在一些实施方案中，所述抗体结合猴sirp-α多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，猴sirp-α多肽为食蟹猴sirp-α多肽。在一些实施方案中，所述抗体结合至少两种不同的猴sirp-α变体多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，所述抗体结合包含氨基酸序列seq id no:11的食蟹猴sirp-α多肽的胞外结构域、包含氨基酸序列seq id no:12的食蟹猴sirp-α多肽的胞外结构域或两者。在一些实施方案中，所述抗体结合鼠类sirp-α多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，所述抗体结合两种或更多种不同的鼠类sirp-α变体多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，所述抗体结合一种或多种鼠类sirp-α多肽的胞外结构域，并且其中一种或多种鼠类sirp-α多肽各自包含选自由se q id no:7-10组成的组的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体结合人sirp-β多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，所述抗体结合人sirp-γ多肽的胞外结构域(例如，d1结构域)。在一些实施方案中，所述抗体不结合人sirp-β多本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种结合人SIRP-α多肽的胞外结构域的分离的抗体，其中所述抗体结合人SIRP-αv1多肽的胞外结构域、人SIRP-αv2多肽的胞外结构域或两者。
2.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列EEELQVIQPDKSVLVAAGETATLRCTATSLIPVGPIQWFRGAGPGRELIYNQ KEGHFPRVTTVSDLTKRNNMDFSIRIGNITPADAGTYYCVKFRKGSPDDVE FKSGAGTELSVRAKPS(SEQ ID NO:5)的人SIRP-αv1多肽的胞外结构域。
3.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列EEELQVIQPDKSVSVAAGESAILHCTVTSLIPVGPIQWFRGAGPARELIYNQ KEGHFPRVTTVSESTKRENMDFSISISNITPADAGTYYCVKFRKGSPDTEFK SGAGTELSVRAKPS(SEQ ID NO:6)的人SIRP-αv2多肽的胞外结构域。
4.如权利要求1-3中任一项所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列EEE
5.如权利要求1-4中任一项所述的抗体，其中所述抗体结合猴SIRP-α多肽的胞外结构域。
6.如权利要求5所述的抗体，其中所述猴SIRP-α多肽为食蟹猴SIRP-α多肽。
7.如权利要求5或6所述的抗体，其中所述抗体结合至少两种不同的猴SIRP-α变体多肽的胞外结构域。
8.如权利要求6或7所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列SEQ ID NO:11的食蟹猴SIRP-α多肽的胞外结构域、包含氨基酸序列SEQ ID NO:12的食蟹猴SIRP-α多肽的胞外结构域或两者。
9.如权利要求1-8中任一项所述的抗体，其中所述抗体结合鼠类SIRP-α多肽的胞外结构域。
10.如权利要求9所述的抗体，其中所述抗体结合两种或更多种不同的鼠类SIRP-α变体多肽的胞外结构域。
...【技术特征摘要】
1.一种结合人sirp-α多肽的胞外结构域的分离的抗体，其中所述抗体结合人sirp-αv1多肽的胞外结构域、人sirp-αv2多肽的胞外结构域或两者。
2.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvlvaagetatlrctatslipvgpiqwfrgagpgreliynq keghfprvttvsdltkrnnmdfsirignitpadagtyycvkfrkgspddve fksgagtelsvrakps(seq id no:5)的人sirp-αv1多肽的胞外结构域。
3.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvsvaagesailhctvtslipvgpiqwfrgagpareliynq keghfprvttvsestkrenmdfsisisnitpadagtyycvkfrkgspdtefk sgagtelsvrakps(seq id no:6)的人sirp-αv2多肽的胞外结构域。
4.如权利要求1-3中任一项所述的抗体，其中所述抗体结合包含氨基酸序列eeelqviqpdksvlvaagetatlrctatslipvgpiqwfrgagpgreli ynqkeghfprvttvsdltkrnnmdfsirignitpadagtyycvkfrk...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·庞斯，B·J·希姆，万虹，T·CC·郭，S·E·考德，W·D·哈里曼，S·伊斯奎尔多，
申请(专利权)人：ALX肿瘤生物技术公司，
类型：发明
国别省市：
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