【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物疫病诊断检测领域，具体涉及特异性结合e2蛋白的抗体或抗原结合片段及其应用，特别是涉及牛病毒性腹泻病毒e2抗原检测免疫层析法试纸的制备与应用。
技术介绍
1、牛病毒性腹泻病毒(bvdv)属于黄病毒科(flaviviridae)、瘟病毒属(pestivirus)，可引起反刍动物病毒性腹泻/黏膜病，牛感染后临床上以发热、黏膜糜烂、溃疡、白细胞减少、腹泻、妊娠母牛流产或产畸型胎儿为主要特征。bvdv感染引起的疾病给全球养牛业造成了巨大的损失，该病毒已被世界动物卫生组织列为重要传染病。我国多个省、市、自治区均检出此病，个别地区阳性率在85％以上。由于没有很好的免疫防护措施，本病呈上升趋势，对牛群的肥育、产奶和繁殖影响极大，给养牛业造成了严重危害。
2、目前bvdv在防制上暂无有效药物和预防措施，主要预防措施有接种bvdv疫苗，检测并淘汰持续期感染的牛只和处于免疫耐受的动物，并辅助消毒净化等。针对该病毒目前有多种检测方法，病原学检测方法包括病毒分离、间接免疫荧光、rt-pcr和荧光定量rt-pcr以及elisa，血清学检测方法主要有中和试验和elisa。基于单克隆抗体的检测方法具有很强的特异性，大大提高检测结果的准确性和可靠性。目前检测bvdv多采用rt-pcr等核酸检测方法，缺乏针对病毒抗原的检测方法。rt-pcr、电镜观察及elisa等检测手段均需要专业人员和设备，不适宜在养殖区域使用。
3、通过建立牛病毒性腹泻病毒免疫层析检测方法可简单、快速、准确地检测bvdv抗原，且不需要专业人员和设备，可
技术实现思路
1、针对现有技术及产品的不足，本专利技术的第一个目的是提供一对特异性结合e2蛋白的抗体或抗原结合片段，能够特异性识别e2蛋白，且形成双抗夹心模式，具有较好的亲和力、特异性及活性。
2、一对特异性结合e2蛋白的抗体或抗原结合片段，包括：
3、抗体f7-3：
4、轻链可变区cdr1序列的氨基酸序列如seq id no:3所示；
5、轻链可变区cdr2序列的氨基酸序列如seq id no:4所示；
6、轻链可变区cdr3序列的氨基酸序列如seq id no:5所示；
7、重链可变区cdr1序列的氨基酸序列如seq id no:6所示；
8、重链可变区cdr2序列的氨基酸序列如seq id no:7所示；
9、重链可变区cdr3序列的氨基酸序列如seq id no:8所示；
10、以及，
11、抗体a3-5：
12、轻链可变区cdr1序列的氨基酸序列如seq id no:9所示；
13、轻链可变区cdr2序列的氨基酸序列如seq id no:10所示；
14、轻链可变区cdr3序列的氨基酸序列如seq id no:11所示；
15、重链可变区cdr1序列的氨基酸序列如seq id no:12所示；
16、重链可变区cdr2序列的氨基酸序列如seq id no:13所示；
17、重链可变区cdr3序列的氨基酸序列如seq id no:14所示。
18、作为优选，所述抗体f7-3和a3-5为单克隆抗体。
19、作为优选，所述抗体f7-3和a3-5为鼠源抗体。
20、本专利技术的第二个目的是提供一种核酸，所述核酸编码上述抗体或抗原结合片段。
21、本专利技术的第三个目的是提供一种载体，所述载体包括上述核酸。
22、本专利技术的第四个目的是提供一种细胞，所述细胞包括上述载体。
23、本专利技术的第五个目的是提供上述抗体或抗原结合片段在制备e2蛋白相关疾病的检测产品中的应用。
24、作为优选，所述e2蛋白相关疾病为牛病毒性腹泻病毒感染。
25、本专利技术的第六个目的是提供一种检测试剂盒，包含上述抗体或抗原结合片段。
26、作为优选，所述抗体f7-3作为标记抗体，所述抗体a3-5作为包被抗体。
27、与现有技术相比，本专利技术的有益效果至少在于：
28、本专利技术的两株抗e2单克隆抗体对bvdv具有较好的亲和力和特异性，且能够形成双抗体夹心模式，可以用于e2蛋白相关疾病，尤其是牛病毒性腹泻中bvdv的检测，开发免疫层析法检测试剂盒，用于大规模筛查监测牛病毒性腹泻疾病的发生。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一对特异性结合E2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：
2.如权利要求1所述的一对特异性结合E2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体F7-3和A3-5为单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的一对特异性结合E2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体F7-3和A3-5为鼠源抗体。
4.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1-3任一项所述抗体或抗原结合片段。
5.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求4所述核酸。
6.一种细胞，其特征在于，所述细胞包括权利要求5所述载体。
7.权利要求1-3任一项所述特异性结合E2蛋白的抗体或抗原片段在制备E2蛋白相关疾病的检测产品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述E2蛋白相关疾病为牛病毒性腹泻病毒感染。
9.一种检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-3任一项所述抗体或抗原结合片段。
10.根据权利要求9所述的一种检测试剂盒，其特征在于，所述抗体F7-3作为标记抗体，所述抗
...【技术特征摘要】
1.一对特异性结合e2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括：
2.如权利要求1所述的一对特异性结合e2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体f7-3和a3-5为单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的一对特异性结合e2蛋白的抗体或抗原片段，其特征在于，所述抗体f7-3和a3-5为鼠源抗体。
4.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1-3任一项所述抗体或抗原结合片段。
5.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求4所述核酸。
【专利技术属性】
技术研发人员：王冬冬，孙晓笛，任秋曲，夏婉瑶，吴银飞，
申请(专利权)人：杭州傲锐生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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