【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗体领域，具体涉及抗人cd11c抗体及其制备和应用。
技术介绍
1、分化簇(cluster of differentiation,cd)专指白细胞膜上的抗原或抗原识别的抗体，又称为白细胞分化抗原。多是细胞膜上的穿膜蛋白或糖蛋白，目前“cd”不仅代表白细胞表面抗原，还有红细胞、血小板和髓系细胞表面抗原，以及其他组织细胞表面或细胞内容的抗原。在生理学上，cd分子有许多用途，通常用作细胞的重要受体或配体。不仅可作为表面标志用于细胞的鉴定和分离，还广泛参与细胞的生长、成熟、分化、发育、迁移、激活。
2、cd11c是一种约150kda的i型跨膜糖蛋白，是一种广泛应用树突状细胞的标志物。它可被用来区分免疫系统中树突状细胞的亚型(参考cd11c在人类和鼠类免疫系统中的表达)，但是cd11c对树突状细胞可能不仅仅是一个标志物(参考cd11c和炎症)。此外，cd11c也被用以癌症研究和诊断(参考cd11c在正常和组织中的表达)。
3、cd11c通常被用作小鼠树突状细胞的标记物。然而，cd11c不仅限于树突状细胞，也可被其它免疫细胞表达。在人体中，单核细胞和树突状细胞都可以表达cd11c(collin etal.,2012)。在肠道巨噬细胞中、炎症中的嗜中性粒细胞亚群中、b细胞的一小部分中、自然杀伤细胞及t细胞亚群中，均能检测到cd11c的表达。当cd11c在人类单核细胞来源的和人类普通的树突状细胞中高度表达时，可以在人类肿瘤中发现cd11c+细胞，并且分布在肿瘤浸润淋巴细胞数量较多的区域。此外，同源小鼠模型实
4、杂交瘤制备技术不仅在生物学和免疫学基础研究中具有重要的价值，而且在实践中的应用范围亦极为广泛。然而在利用杂交瘤制备技术制备抗体时，由于杂交瘤不稳定，抗体基因容易丢失，并且传统的杂交瘤制备技术不会对目标抗体的基因序列及蛋白序列进行鉴定，不利于对目标抗体后续的生产、制备及研发工作。基因工程方法可以很好地解决杂交瘤方法中的问题，并且通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应，基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位。然而通过基因工程方法进行抗体的制备必需的条件是明确抗体的序列，因此，挖掘更适用于cd11c检测的单克隆抗体是当前更为合适的研发方向。
技术实现思路
1、针对上述不足，本专利技术提供了两种新的抗人cd11c鼠单抗，并通过设计基因与蛋白序列，建立该基因的稳转cho细胞株进行重组表达，经验证，表达纯化的抗体能够特异性识别人cd11c抗原，抗体表达产量达到g/l级别，远远高于传统的杂交瘤细胞制备抗体的产量。
2、术语：
3、本专利技术中，氨基酸包含天然氨基酸、合成氨基酸、以及以类似于天然氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸在本文中可以由其通常已知的三字母符号或由iupac-iub生物化学命名法委员会所推荐的单字母符号来提及。
4、本专利技术中，互补决定区，本文中又称cdr。本文中公开的互补决定区指抗体的重链或轻链可变区内的抗原结合点，即抗体中引起抗原结合的氨基酸残基。轻链和重链的互补决定区共同组成抗体的抗原结合部位。通常而言，抗体的轻链或重链的通常包含3个决定簇互补区。本文中的互补决定区指重链的互补决定区时，简称为hcdr，并以数字指代3个不同的互补决定区，例如hcdr1、hcdr2、hcdr3。本文中的互补决定区指轻链的互补决定区时，简称为lcdr，并以数字指代3个不同的互补决定区，例如lcdr1、lcdr2、lcdr3。
5、本专利技术中，可变区指免疫球蛋白轻链和重链靠近n端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区。
6、本专利技术中，重链指抗体中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(h链)；轻链指抗体中2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(l链)。
7、本专利技术中，相似性指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性和可取代氨基酸所占的比例。
8、本专利技术中，单克隆抗体指由单一b细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。
9、本专利技术中，鼠源化抗体指将来源于免疫接种过的小鼠的b细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的鼠杂交融合细胞分泌的抗体。
10、本专利技术中，自制鼠抗人cd11c抗体zxclone-hcd11c-02；自制鼠抗人cd11c抗体[zxclone-hcd11c-03]，二者均为抗人cd11c鼠单抗由cho稳转的细胞株生产的重组蛋白，并非由单克隆的杂交瘤细胞进行生产。
11、一方面，本专利技术提供了抗cd11c抗体。
12、所述的抗cd11c抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链互补决定区，所述的轻链包括轻链互补决定区，其中：
13、所述的抗体重链互补决定区包括如seq id no：1、seq id no：2和seq id no：3所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；所述抗体的轻链可变区包括如seq id no：4、seq id no：5和seqid no：6所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；
14、或者，所述的抗体重链互补决定区包括如seq id no：7、seq id no：8和seq idno：9所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；所述抗体的轻链可变区包括如seq id no：10、seq idno：11和seq id no：12所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。
15、具体地，所述的抗cd11c抗体重链可变区氨基酸序列为seq id no：13，轻链可变区氨基酸序列为seq id no：14；或所述的抗cd11c抗体的重链可变区氨基酸序列为seq idno：15，轻链可变区氨基酸序列为seq id no：16。
16、具体地，所述的抗cd11c抗体为单克隆抗体。
17、优选地，所述的抗cd11c抗体为鼠源化抗体。
18、具体地，所述的抗cd11c抗体的重链氨基酸序列为seq id no：17，轻链氨基酸序列为seq id no：18；或所述的抗cd11c抗体的重链氨基酸序列为seq id no：19，轻链氨基酸序列为seq id no：20。
19、另一方面，本专利技术提供了表达前述的抗cd11c抗体的核苷酸。
20、所述的核苷酸可以是通过密码子简并性优化后的序列，用于编码前述的抗cd11c抗体均可。
21、优选地，重链seq id no：17对应的核苷酸序列为seq id no：21所示，轻链氨基酸序列为seq id no：18对应的核苷酸序列为se本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链互补决定区，所述的轻链包括轻链互补决定区，其中：
2.根据权利要求1所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：13，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：14；或所述的抗CD11c抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：15，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：16。
3.根据权利要求1所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体为单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体为鼠源化抗体。
5.根据权利要求1-4所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：17，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：18；或所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：19，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：20。
6.一种核酸，其特征在于，所述的核酸编码权
7.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体包含权利要求6所述的核酸。
8.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包括权利要求7所述的表达载体。
9.一种CD11c的检测方法，其特征在于，通过权利要求15任一项所述的抗CD11c抗体进行检测，所述的方法为非疾病诊断或治疗方法。
10.一种抗CD11c检测试剂盒，其特征在于，所述抗CD11c检测试剂盒包括权利要求1-5任一项所述的抗CD11c抗体，或权利要求6所述的核酸，或权利要求7所述的表达载体，或权利要求8所述宿主细胞。
...【技术特征摘要】
1.一种抗cd11c抗体，其特征在于，所述的抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链互补决定区，所述的轻链包括轻链互补决定区，其中：
2.根据权利要求1所述的抗cd11c抗体，其特征在于，所述的抗cd11c抗体的重链可变区氨基酸序列为seq id no：13，轻链可变区氨基酸序列为seq id no：14；或所述的抗cd11c抗体的重链可变区氨基酸序列为seq id no：15，轻链可变区氨基酸序列为seq id no：16。
3.根据权利要求1所述的抗cd11c抗体，其特征在于，所述的抗cd11c抗体为单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的抗cd11c抗体，其特征在于，所述的抗cd11c抗体为鼠源化抗体。
5.根据权利要求1-4所述的抗cd11c抗体，其特征在于，所述的抗cd11c抗体的重链氨基酸序列为seq id no：17...
【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，褚建达，褚冰儿，赵鑫萍，徐飞，张娅，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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