抗人制造技术

本发明专利技术属于抗体领域，具体涉及一种抗人

【技术实现步骤摘要】
抗人CD4抗体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于抗体领域，具体涉及一种抗人
CD4
抗体及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]CD4
‑
T
淋巴细胞是人体免疫系统中一种重要的免疫细胞，简称为
CD4
细胞
。T
淋巴细胞属于白细胞中的淋巴细胞类，在免疫系统中扮演很重要的角色
。
人体内有两种主要的
T
淋巴细胞，其中一种就称为
CD4
细胞，
CD4
主要由辅助
T(Th)
细胞表达，是
Th
细胞
TCR
识别抗原的受体，与
MHCⅡ类分子的非多肽区结合，参与
Th
细胞
TCR
识别抗原过程
。
这些
CD4
细胞又称为免疫系统的辅助手
(helper)
，能指挥身体对抗微生物，例如病毒
。
由于艾滋病病毒
(HIV)
的攻击对象正是人体的
CD4
细胞，因此
CD4
记数能够直接反映人体免疫功能，是提供
HIV
感染患者免疫系统损害状况最明确的指标
。
正常成人的
CD4
细胞为每立方毫米
500
‑
1600
个，艾滋病病毒感染者的
CD4
细胞可能会出现进行性或不规则性下降，提示感染者的免疫系统受到了严重损害，当
CD4
细胞小于每立方毫米
200
个时就可能会发生多种严重性机会性感染或肿瘤
。
专利
CN 109996815 A
公开了关于针对
CD4
的单克隆抗体
、
其组合物，以及使用此组合物以预防
、
治疗及功能性治愈
HIV
感染的方法
。
因此，
CD4
检测结果对艾滋病诊断
、
治疗效果的判断和对患者免疫功能的判断有着重要作用
。
[0003]在类风湿关节炎中，特异的
CD4+T
细胞克隆性扩增为其发病机制的研究提供了依据
。
早期类风湿性关节炎病人滑膜中
CD4+T
细胞呈寡克隆状态，随着不同病期其克隆类型也会发生改变，晚期风湿性关节病人滑膜组织中，绝大多数
T
细胞
(
包括优势亚家族
T
细胞
)
呈多克隆状态
[1
‑
2]。
根据此原理，临床上使用抗
CD4
单克隆抗体分子治疗风湿症患者，通过减少
CD4+T
细胞的数量
[3]，达到治疗作用
。
专利
CN 101885769 A
提供了一种全人源抗
CD4
抗体，该抗体分子与辅助
T
细胞膜上的表面抗原分化簇
4(CD4
抗原
)
特异性地结合；该抗体在制备治疗或诊断淋巴细胞瘤
、
艾滋病
、
类风湿性关节炎
、
同种异体器官移植排斥反应等疾病中具有潜在的应用
。
[0004]CD4
抗体是一类可以特异性结合
CD4
的多克隆抗体，主要用于体外检测
CD4
的免疫学实验
。CD4
抗体经常用于流式细胞术和免疫荧光应用，以识别表达
CD4
分子的免疫细胞亚群
。
已知表达
CD4
表面标志物的细胞包括胸腺细胞
、
成熟
T
细胞的特定亚群
、
单核细胞
、
巨噬细胞
、
树突细胞和
NKT
细胞
。
通过抗
CD
抗体与标记物的偶联，利用流式细胞仪和免疫监测方法，观察和计算
CD
分子的数量及数量变化，对于疾病及药物的机理研究，疾病的预防及诊断等领域有着重大的意义
。
因此，亟需开发新的
CD4
抗体，用以满足临床需求
。
[0005][1]Coronzy JJ,Bartz2Bazzanella P,Hu W,et al.Dominant clonotypes in the repertoire of peripheral CD4+T cell in rheumatoid arthritis.[J].Clin Invest,1994,94(5):2068
‑
2076.
[0006][2]Olive C,Gaenby PA,Serjeantson SW.Analysis of T cell receptor V alpha and beta gene usage in synovia of patients with rheumatoid arthritis.[J].Immunol Cell Biol,1991,69:349
‑
354.
[0007][3]Sawitzki B,Lehmann M,Vogt K et
；
Bag
·
I up
‑
regulation in anti
‑
CD4 mAb.Heated allo.Activated T cell corlfcrresistance to acfivationinducedcell death(AICD).[J].TmnBplant Immunol,2002
；
9(2
·
4):83
‑
91.

技术实现思路

[0008]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种抗人
CD4
抗体的具体氨基酸序列，通过该序列可以利用现有技术获得表达抗人
CD4
抗体的基因工程细胞，提高了
CD4
抗体的产率和生产稳定性，并且该抗体亲和力高，特异性强，对于疾病及药物的机理研究，疾病的预防及诊断具有重大意义
。
[0009]术语：
[0010]本专利技术中，
CDR(complementarity
‑
determining regions
，
CDR)
叫做互补决定区或互补决定簇
。
它位于免疫球蛋白的超变区，超变区是抗体的抗原结合位，与抗原决定簇的结构互补
。
一般包括
CDR1、CDR2、CDR3。
[0011]本专利技术中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗人
CD4
抗体，其特征在于，包括重链和轻链，所述的重链包括重链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，所述的轻链可变区包括
LCDR1、LCDR2
和
LCDR3
，其中：
(1)HCDR1
为
SEQ ID NO.1
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列；
(2)HCDR2
为
SEQ ID NO.3
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.4
所示的氨基酸序列；
(3)HCDR3
为
SEQ ID NO.5
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.6
所示的氨基酸序列；
(4)LCDR1
为
SEQ ID NO.7
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.8
所示的氨基酸序列；
(5)LCDR2
为
SEQ ID NO.9
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.10
所示的氨基酸序列；
(6)LCDR3
为
SEQ ID NO.11
所示的氨基酸序列，或
SEQ ID NO.12
所示的氨基酸序列
。2.
根据权利要求1所述的抗人
CD4
抗体，其特征在于，所述的抗人
CD4
抗体重链可变区的氨基酸序列为
SEQ ID NO.13
或与
SEQ ID NO.13
具有
80
％以上序列相似性的序列；或所述的抗人
CD4
抗体重链可变区的氨基酸序列为
SEQ ID NO.14
或与
SEQ ID NO.14
具有
80
％以上序列相似性的序列；所述的抗人
CD4
抗体轻链可变区的氨基酸为
SEQ ID NO.15
或与
SEQ ID NO.15
具有
80
％以上序列相似性的序列；或所述的抗人
CD4
抗体轻链可变区的氨基酸为
SEQ ID NO.16
或与
SEQ ID NO.16
具有
80
％以上序列相似性的序列
。3....

【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，汤波，褚建达，褚冰儿，赵鑫萍，徐飞，张娅，施嘉敏，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：