【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗体领域，具体涉及一种抗人cd56抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、cd56是一组相关的细胞表面糖蛋白，在胚胎发生发育以及神经细胞的相互联系中发挥重要的作用。cd56抗原主要表达于神经元、星形细胞、施万细胞、nk细胞和小部分活化的t淋巴细胞。此抗体在以下肿瘤中阳性表达，包括肺小细胞癌、间皮瘤、类癌、胰岛细胞肿瘤、有神经内分泌分化的胰腺肿瘤、merkel(梅克尔)细胞癌、肝细胞癌、某些肾细胞癌、某些卵巢癌、某些子宫内膜癌、甲状腺滤泡和乳头癌、神经母细胞瘤、神经节胶质瘤、少突神经细胞胶质瘤、视网膜母细胞癌、nk大颗粒淋巴细胞白血病、骨髓瘤和肝脏的窦组织细胞。cd56在以下肿瘤中阴性表达：鼻咽癌、黑色素瘤、脑膜瘤、结肠癌、滤泡中心细胞淋巴瘤、毛细胞白血病和ewing肉瘤。此抗体主要确定神经外胚层来源的肿瘤以及肺小细胞癌诊断。
2、专利cn 107488231 b提供了一种抗cd56抗体，该抗体包括：包括重链可变结构域、轻链可变结构域、恒定区；所述重链可变结构域为与该抗体的重链互补性决定区相同的结构域，所述轻链可变结构域为与该抗体的轻链互补性决定区相同的结构域。抗cd56抗体亲和力高、内化效率快和特异性好，可有效用于制备抗肿瘤、免疫系统和神经系统疾病的诊断和治疗药物。专利cn 107744592 b提供了一种抗cd56抗体与海兔毒素偶联复合物明的抗体偶联复合物保留了抗cd56抗体的靶向结合cd56的高亲和能力又具有海兔毒素高效杀伤细胞的能力，在提高药物治疗效果的同时减少药物对机体的毒副作用，能够用于制备诊
3、单克隆抗体免疫疗法不同于传统的治疗方法，该方法毒副反应轻，适应人群广，有重要的临床应用价值。目前临床上通常通过免疫组织化学(ihc)病理实验检测肿瘤细胞中cd56蛋白的表达状况。但是免疫组化在所有应用的抗体当中没有一个抗体是足够敏感和足够特异。这样就要求在制作免疫组化的过程当中用一组抗体来综合判断肿瘤的性质，单靠一个或者是两个抗体就会出现偏差。免疫组化在实验的过程当中会有很多不可控的因素，比如说一抗的选择，二抗的时间长短以及显色时间的长短。这就会造成免疫组化结果的不稳定。对不同的实验室之间也会造成免疫组化的结果不同或者甚至相反。免疫组化虽然能帮助病理医生诊断疾病，但还应该更客观和更全面以及综合的来判断免疫组化的结果。ihc实验的核心为特异性结合cd56蛋白的单克隆抗体，其性能的优劣直接决定着整个检测的灵敏度和特异性。因此，研制出一种可以大量制备，亲和力和特异性更高的针对cd56蛋白的单克隆抗体具有重要的意义。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种抗人cd56抗体的具体氨基酸序列，通过该序列可以利用现有技术获得表达抗人cd56抗体的基因工程细胞，提高了cd56抗体的产率和生产稳定性，并且该抗体亲和力高，特异性强，有望用于制备抗肿瘤、免疫系统和神经系统疾病的诊断和治疗药物。
2、术语：
3、本专利技术中，cdr(complementarity-determining regions，cdr)叫做互补决定区或互补决定簇。它位于免疫球蛋白的超变区，超变区是抗体的抗原结合位，与抗原决定簇的结构互补。一般包括cdr1、cdr2、cdr3。
4、本专利技术中，可变区指免疫球蛋白轻链和重链靠近n端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区。
5、本专利技术中，重链指抗体中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(h链)；轻链指抗体中2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(l链)。
6、本专利技术中，相似性指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性和可取代氨基酸所占的比例。
7、本专利技术中，单克隆抗体指由单一b细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。
8、本专利技术中，鼠源化抗体指将来源于免疫接种过的小鼠的b细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的鼠杂交融合细胞分泌的抗体。
9、一方面，本专利技术提供了一种抗人cd56抗体，所述的抗人cd56抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括hcdr1、hcdr2、hcdr3，所述的轻链可变区包括lcdr1、lcdr2、lcdr3，其中：
10、(1)hcdr1为seq id no.1所示的氨基酸序列，或seq id no.2所示的氨基酸序列；
11、(2)hcdr2为seq id no.3所示的氨基酸序列，或seq id no.4所示的氨基酸序列；
12、(3)hcdr3为seq id no.5所示的氨基酸序列，或seq id no.6所示的氨基酸序列；
13、(4)lcdr1为seq id no.7所示的氨基酸序列，或seq id no.8所示的氨基酸序列；
14、(5)lcdr2为seq id no.9所示的氨基酸序列，或seq id no.10所示的氨基酸序列；
15、(6)lcdr3为seq id no.11所示的氨基酸序列，或seq id no.12所示的氨基酸序列。
16、具体地，所述的抗人cd56抗体重链可变区的氨基酸序列为seq id no.13或与seqid no.13具有80％以上序列相似性的序列；
17、或所述的抗人cd56抗体重链可变区的氨基酸序列为seq id no.14或与seq idno.14具有80％以上序列相似性的序列；
18、所述的抗人cd56抗体轻链可变区的氨基酸为seq id no.15或与seq id no.15具有80％以上序列相似性的序列；
19、或所述的抗人cd56抗体轻链可变区的氨基酸为seq id no.16或与seq id no.16具有80％以上序列相似性的序列。
20、优选地，所述的抗人cd56抗体重链可变区氨基酸序列为seq id no.13或seq idno.14；轻链可变区氨基酸序列为seq id no.15或seq id no.16。
21、具体地，所述的抗人cd56抗体重链氨基酸序列为seq id no.17，或与seq idno.17具有65％以上序列相似性的序列；
22、或所述的抗人cd56抗体重链氨基酸序列为seq id no.18，或与seq id no.18具有65％以上序列相似性的序列；
23、所述的抗人cd56抗体轻链氨基酸序列为seq id no.19，或与seq id no.19具有65％以上序列相似性的序列；
24、或所述的抗人cd56抗体轻链氨基酸序列为seq id no.20，或与seq idno.20具有65％以上序列相似性的序列。
25、优选地，所述的抗人cd56抗体重链氨基酸序列为seq id no.17或seq id no.18，轻链氨基酸序列为seq id no.19或seq id n本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗人CD56抗体，其特征在于，包括重链和轻链，所述的重链包括重链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中：
2.根据权利要求1所述的抗人CD56抗体，其特征在于，所述的抗人CD56抗体重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.13或与SEQ ID NO.13具有80％以上序列相似性的序列；
3.根据权利要求1所述的抗人CD56抗体，其特征在于，所述的抗人CD56抗体重链氨基酸序列为SEQ ID NO.17，或与SEQ ID NO.17具有65％以上序列相似性的序列；
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗人CD56抗体，其特征在于，为单克隆抗体；优选为鼠源化抗体。
5.表达权利要求1-4任一项所述的抗人CD56抗体的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的核苷酸序列，其特征在于，重链SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18对应的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22，轻
7.包括权利要求6所述的核苷酸序列的表达载体。
8.包括权利要求1-4任一项所述的抗人CD56抗体或权利要求5-6任一项所述的核苷酸序列或权利要求7所述的表达载体的细胞。
9.一种CD56检测方法，其特征在于，通过权利要求1-4任一项所述的抗人CD56抗体进行检测，所述的方法为非疾病诊断或治疗方法。
10.一种CD56检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的抗人CD56抗体或权利要求5-6任一项所述的核苷酸序列或权利要求7所述的表达载体或权利要求8所述的细胞。
...【技术特征摘要】
1.一种抗人cd56抗体，其特征在于，包括重链和轻链，所述的重链包括重链可变区，所述的轻链包括轻链可变区；所述的重链可变区包括hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述的轻链可变区包括lcdr1、lcdr2和lcdr3，其中：
2.根据权利要求1所述的抗人cd56抗体，其特征在于，所述的抗人cd56抗体重链可变区的氨基酸序列为seq id no.13或与seq id no.13具有80％以上序列相似性的序列；
3.根据权利要求1所述的抗人cd56抗体，其特征在于，所述的抗人cd56抗体重链氨基酸序列为seq id no.17，或与seq id no.17具有65％以上序列相似性的序列；
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗人cd56抗体，其特征在于，为单克隆抗体；优选为鼠源化抗体。
5.表达权利要求1-4任一项所述的抗人cd56抗体的核苷酸序列。
6.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，褚建达，褚冰儿，赵鑫萍，徐飞，张娅，施嘉敏，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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