一种抗人CD45抗体或其抗原结合片段及其制备方法技术

技术编号：40422104 阅读：6 留言：0更新日期：2024-02-20 22:41

本发明专利技术属于生物技术领域，提供了一种抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其轻链互补决定区具有如SEQ ID NO:1‑6所示的氨基酸序列，或与其相比具有至少1个氨基酸差异；重链互补决定区具有如SEQ ID NO:7‑12所示的氨基酸序列，或与其相比具有至少1个氨基酸差异。所述抗人CD45抗体或抗原结合片段可特异性识别人CD45抗原，亲和力、抗体特异性均与阳性抗体CD45[2D1]接近。本发明专利技术提供的所述抗人CD45抗体制备方法，无需通过动物杂交瘤方式制备，因而步骤简单，且不会导致抗体基因容易丢失，抗体表达产量远高于传统的杂交瘤细胞制备抗体的产量。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种抗人cd45抗体或其抗原结合片段及其制备方法。

技术介绍

1、传统的科研，诊断检测抗体都是通过动物杂交瘤的方式制备，在制备这些抗体时，由于杂交瘤不稳定，抗体基因容易丢失。此外，传统的杂交瘤制备技术不会对目标抗体的基因序列及蛋白序列进行鉴定，不利于对目标抗体后续的生产，制备及研发工作。

2、cd45是细胞膜上信号传导的关键分子，在淋巴细胞的发育成熟，功能调节及信号传递中具有重要意义。一些报道称除了成熟红细胞和血小板之外，cd45在骨髓前体细胞、外周血和淋巴结成熟细胞、90％以上髓系白血病细胞、大多数淋系白血病和淋巴瘤细胞均有表达，同时在非造血组织中无表达，这一特点使其成为研究恶性血液系统靶向治疗的理想抗原。

3、cd45在白血病鉴别诊断和免疫分型中具有重要意义，利用cd45可以鉴别白血病的微小残留病灶，目前抗cd45单克隆抗体主要应用于血液系统疾病的免疫分型检测。由于cd45广泛高表达于几乎所有白血病标本，与抗体结合后无内化效应，尤其重要的是在非造血组织无表达，目前已经成为造血干细胞患者靶向放射免疫治疗的首选抗原。

4、中国专利申请202080086243.5公开了特异性结合至人类cd45之抗cd45抗体、其抗原结合片段及抗体药物结合物(adc)。该等抗体及adc可用于包括耗尽患者之cd45+细胞之方法在内之治疗方法中。

5、美国专利申请us202318153181公开了一种人源化的结合cd45的抗体分子、构建体，例如包含特异性针对cd45的结合结构域

6、目前本领域需要更多的抗人cd45单抗。

技术实现思路

1、为了实现上述技术目的，本专利技术提出了以下技术方案：

2、第一方面，本专利技术提供一种抗人cd45抗体或其抗原结合片段，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区和重链可变区；

3、其中轻链可变区具有：

4、(1)氨基酸序列如seq id no:1所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no:2所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no:3所示的lcdr3；或

5、(2)氨基酸序列如seq id no:4所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no:5所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no:6所示的lcdr3；或

6、(3)与seq id no:1所示的氨基酸序列相比具有至少1个氨基酸差异的lcdr1、与seq id no:2所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的lcdr2和与seq id no:3所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的lcdr3；或

7、(4)与seq id no:4所示的氨基酸序列相比具有至少1个氨基酸差异的lcdr1、与seq id no:5所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的lcdr2和与seq id no:6所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的lcdr3；

8、重链可变区具有：

9、1)氨基酸序列如seq id no:7所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no:8所示的hcdr2和氨基酸序列如seq id no:9所示的hcdr3；或

10、2)氨基酸序列如seq id no:10所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no:11所示的hcdr2和氨基酸序列如seq id no:12所示的hcdr3；或

11、3)与seq id no:7所示的氨基酸序列相比具有至少1个氨基酸差异的hcdr1、与seqid no:8所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的hcdr2和与seq id no:9所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的hcdr3；或

12、4)与seq id no:10所示的氨基酸序列相比具有至少1个氨基酸差异的hcdr1、与seq id no:11所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的hcdr2和与seq id no:12所示的氨基酸序列相比至少具有1个氨基酸差异的hcdr3；

13、其中所述氨基酸差异通过氨基酸添加、取代、缺失、替换或修饰实现。

14、在一些实施方案中，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链可变区具有如seq id no:13所示的氨基酸序列，或与如seq id no:13所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

15、所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链可变区具有如seq id no:14所示的氨基酸序列，或与如seq id no:14所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性。

16、在一些实施方案中，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如seq id no:15所示的氨基酸序列，或与如seq id no:15所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

17、所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如seq id no:16所示的氨基酸序列，或与如seq id no:16所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性。

18、在一些实施方案中，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链具有如seq idno:17所示的氨基酸序列，或与如seq id no:17所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

19、所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链具有如seq id no:18所示的氨基酸序列，或与如seq id no:18所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性。

20、在一些实施方案中，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的重链具有如seq idno:19所示的氨基酸序列，或与如seq id no:19所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

21、所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的重链具有如seq id no:20所示的氨基酸序列，或与如seq id no:20所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性。

22、seq id no:1：sasssvsymh；seq id no:2：gtsnlas；seq id no:3：hqwngypwt；seqid no:4：rssksllhssgityly；seq id no:5：rmsnlas；seq id no:6本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人CD45抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区和重链可变区；

2.根据权利要求1所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人CD45抗体或其抗原结合片段的轻链可变区具有如SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列，或与如SEQID NO:13所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

3.根据权利要求1或2所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人CD45抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列，或与如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

4.根据权利要求3所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人CD45抗体或其抗原结合片段的轻链具有如SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列，或与如SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％

5.根据权利要求4所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人CD45抗体或其抗原结合片段的重链具有如SEQ ID NO:19所示的氨基酸序列，或与如SEQ ID NO:19所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

6.一种分离的多核苷酸，其特征在于，其编码权利要求1-5中任一所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段。

7.一种重组表达载体，其特征在于，其包含权利要求6所述的分离的多核苷酸。

8.一种宿主细胞，其特征在于，其包含权利要求7所述的重组表达载体。

9.一种根据权利要求1-5中任一所述的抗人CD45抗体或其抗原结合片段的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下至少一种步骤：

10.一种用于非疾病诊断目的的CD45蛋白的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：

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【技术特征摘要】

1.一种抗人cd45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段包含轻链可变区和重链可变区；

2.根据权利要求1所述的抗人cd45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链可变区具有如seq id no:13所示的氨基酸序列，或与如seqid no:13所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

3.根据权利要求1或2所述的抗人cd45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的重链可变区具有如seq id no:15所示的氨基酸序列，或与如seq id no:15所示的氨基酸序列至少具有80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的序列同一性；或

4.根据权利要求3所述的抗人cd45抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗人cd45抗体或其抗原结合片段的轻链具有如seq id no:17所示的氨基酸序列，或与如seq id n...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，何乃莹，褚冰儿，赵鑫萍，徐飞，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：

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