System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的试剂盒及其应用制造技术_技高网

一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的试剂盒及其应用制造技术

技术编号:40836380 阅读:7 留言:0更新日期:2024-04-01 15:01
本发明专利技术涉及一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括裂解试剂和抑制剂去除试剂;所述裂解试剂包括磷酸钠、氯化锂、高氯酸钠、乙醇和十二烷基苯磺酸钠;所述抑制剂去除试剂包括硫酸铝、醋酸钾和醋酸。本发明专利技术还包括采用所述试剂盒从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的方法和所述试剂盒在从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA中的应用。本发明专利技术可以实现粪便样本痕量幽门螺旋杆菌DNA的提取,无需繁琐的操作,提取时间短,只需要30分钟左右就可以通过高通量的方式以大样本、高收率提取到高质量的DNA,所得的DNA产物可以以高度灵敏性直接用于下游检测例如qPCR检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉核酸提取试剂领域,尤其涉及一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna的试剂盒及其应用。


技术介绍

1、幽门螺杆菌(hp)人群感染率为40%至60%,主要通过口口或粪口传播,感染后引起胃粘膜的慢性炎症。患者感染了hp后,在胃上皮细胞表面定居,破坏胃黏膜的自我保护机制,引发腹胀等慢性胃炎、消化性溃疡,或引发胃黏膜的恶性转化,引发胃癌等恶性病变。因此,世界卫生组织(who)已把hp列为第一类致癌因子,并明确为胃癌的危险因子。

2、目前对幽门螺杆菌的诊断主要采用c13/c14吹气实验,但其存在着约10%的误诊率,因此不能作为检测幽门螺杆菌的金标准。而且,c13/c14吹气实验具有一定的放射性,可能对人体有一定的伤害。

3、粪便样本中的幽门螺杆菌的核酸标志物可作为一个待发展的检测方向。但是,粪便中的杂质非常多,而且难以重复裂解释放微生物中的核酸。传统的核酸提取方法包括氯仿抽提法、十六烷基三甲基溴化铵(ctab法)、离心吸附柱试剂盒法。其中,氯仿抽提和ctab法由于涉及的步骤繁琐、耗费的时间长、核酸得率低等问题渐渐被淘汰。目前被市场接受的方法是离心柱法,如mo bio laboratories公司提供的power  dnaisolation kit,qiagen公司提供的 pro dnakit、 fast dna stoolmini kit,但是这些方法操作非常繁琐,需要反复离心,而且售价极为昂贵,单个样本的提取费用为30至50元rmb。此外,该方法也不能进行高通量的操作。

4、因此,高度需要高效且具有实际可操作性的基础研究工具及试剂来提取粪便样本中微量的幽门螺旋杆菌dna,同时可以去除粪便样本中的pcr抑制剂,以得到高纯度的dna样本来用于后续的检测例如qpcr检测。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna的方法,所述方法操作简单、快捷,可以适用于高通量的检测,可以针对粪便样本中痕量的幽门螺旋杆菌dna进行提取,并去除粪便样本中的pcr抑制剂。

2、为了实现本专利技术的上述目的,本专利技术在第一方面提供了一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于配制裂解液的裂解试剂和用于配制抑制剂去除液的抑制剂去除试剂;其中,所述裂解试剂包括磷酸钠、氯化锂、高氯酸钠、乙醇和十二烷基苯磺酸钠;所述抑制剂去除试剂包括硫酸铝、醋酸钾和醋酸。

3、本专利技术在第二方面提供了一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna的方法,所述方法采用第一方面所述的试剂盒来提取。

4、本专利技术在第三方面提供了本专利技术第一方面所述的试剂盒在从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna中的应用。

5、相对于现有技术,本专利技术具有如下有益效果:

6、(1)本专利技术提供一种粪便样本中痕量幽门螺旋杆菌dna的提取方法,无需繁琐的操作,提取时间短、只需要30分钟左右就可以通过高通量的方式提取高质量的dna。

7、(2)本专利技术提供了一种可以几乎完全去除粪便样本中pcr抑制剂的dna提取方法,使下游qpcr实验顺利完成。

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【技术保护点】

1.一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于配制裂解液的裂解试剂和用于配制抑制剂去除液的抑制剂去除试剂;其中,所述裂解试剂包括磷酸钠、氯化锂、高氯酸钠、乙醇和十二烷基苯磺酸钠;所述抑制剂去除试剂包括硫酸铝、醋酸钾和醋酸。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:

4.根据权利要求1至3中任一项所述的试剂盒,其特征在于:

5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒,其特征在于:

6.一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的方法,其特征在于,所述方法采用权利要求1至5中任一项所述的试剂盒来提取。

7.一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

10.权利要求1至5中任一项所述的试剂盒在从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌DNA中的应用。</p>...

【技术特征摘要】

1.一种用于从粪便样本中提取幽门螺旋杆菌dna的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于配制裂解液的裂解试剂和用于配制抑制剂去除液的抑制剂去除试剂;其中,所述裂解试剂包括磷酸钠、氯化锂、高氯酸钠、乙醇和十二烷基苯磺酸钠;所述抑制剂去除试剂包括硫酸铝、醋酸钾和醋酸。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:

4.根据权利要求1至3中任一项所述的试剂盒,其特征在于:

5.根据权利要求1至4中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员:邹永龙曲峰何宗顺张佳斌
申请(专利权)人:苏州白垩纪生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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