【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制药领域，涉及抗cd33抗体和抗cd33抗体-药物偶联物及其用途，具体涉及一种抗人cd33抗体与具有细胞杀伤效果的药物形成抗体-药物偶联物，以及该抗体-药物偶联物的制备方法和应用。
技术介绍
1、cd33是一种髓系细胞分化抗原，由364个氨基酸组成，是一种分子量为67kd的ⅰ型跨膜糖蛋白，在分化起始阶段主要在髓系血细胞中分布。cd33属于免疫球蛋白超家族成员，包含igv和igc2两个免疫球蛋白样胞外结构域，以及两个酪氨酸依赖的信号传导基序itims胞内结构，可作为抑制受体，调控抑制性信号转导过程。如在免疫应答反应中，cd33作为一种抑制性受体招募细胞质磷酸酶，促使细胞质磷酸酶脱磷酸化，从而阻碍信号分子的转导。同时，cd33也是唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素蛋白(sialic acid-binding ig-relatedlectin,siglec)家族的成员，通过与唾液酸结合识别细胞表面的聚糖，从而参与细胞间相互作用以及介导白细胞与内皮细胞的粘附等。cd33已被鉴定出三种选择性剪切类型，分别是具有较小二硫键连接v与c结构域的同种型cd33m、具有较高分子量的变体cd33m，以及缺失igv结构域的cd33m。
2、cd33被发现在90％以上的急性髓性白血病(aml)患者原始粒细胞中表达，在髓系细胞中是特异性白血病抗原。急性髓性白血病是一种存在于血液系统中的恶性肿瘤，具有难治性、易复发性和治疗致死性等特点。这种致命疾病会导致骨髓产生异常的成髓细胞，造成红细胞、血小板和白细胞数量急剧下降。有研究表明，在靶向
3、2000年以cd33为靶点的adc药物吉妥珠单抗(gentuzumab ozogamicin)(mylotarg，go)经美国食品和药物管理局(fda)批准上市，mylotarg通过抗cd33人源化igg4单抗与卡其霉素偶联而成，主要用于难控制或复发的急性粒细胞白血病患者治疗，当mylotarg与cd33抗原结合后在癌细胞内释放卡其霉素，诱导肿瘤细胞凋亡。但由于临床疗效不佳，出现了严重的致命性肝损伤等副反应，该药物于2010年主动撤市。在撤市并调整给药方案后，mylotarg在2017年重新获得fda批准，用于一线治疗急性髓细胞性白血病。
4、在靶向cd33的治疗药剂中，人源化igg1单克隆抗体林妥珠单抗(lintuzumab)在临床试验中，与阿糖胞苷的联合使用并未表现出比单独的阿糖胞苷好，因此在2010年终止了lintuzumab的研发。seattle genetics制药公司研发的一种靶向cd33的adc临床候选药物sgn-cd33a，在三期试验中出现了致命的感染等副反应，观察到较高的患者死亡率，因此在2017年宣布终止该项试验。由抗cd33 igg1单抗与dm-4偶联而成的adc药物ave9633，由于临床活性效果不佳，已于2009年终止了ave9633的临床研究。也有研究将从长春花中提取到的生物碱长春新碱，通过碳化二亚胺化的方式，与cd33抗体多肽偶联，用于促进长春新碱的肿瘤靶向性，提升药物疗效。cd33是一种通过研究验证的aml靶点，有足够的平均抗原密度，除adc外，也是其他新型疗法的抗原选择。目前针对cd33的免疫疗法，包括单抗，双抗，三抗，adc均有企业布局，正处于临床评估或处于临床前开发阶段。
5、抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,adc)是一类由靶向特异性抗原的单克隆抗体(mab)以及具有强效细胞毒性的小分子药物(payload)通过生物活性的连接子(linker)偶联而成的新型生物药。adc药物通过抗体特异性识别，引导小分子药物到达癌细胞靶点，内吞进入癌细胞并释放出细胞毒性药物，从而特异性杀死癌细胞。adc从提出至今一直在不断地创新优化，在肿瘤治疗方面取得了成功。临床研究证明，adc药物药效高，并且能够有效降低小分子细胞毒性药物对健康组织的毒害，是目前抗肿瘤药物研发的热点，也成为了癌症治疗领域的重要手段之一。cd33作为特异性免疫治疗aml的优良靶点，已有adc药物被获批准上市，cd33更是一个具有潜力的adc药物开发靶点。
技术实现思路
1、本公开提供了一种抗人cd33抗体-药物偶联物，是一款人源化抗人cd33抗体与具有细胞杀伤效果药物偶联得到的抗体-药物偶联物，与现有的同类型药物相比，具有良好的分子稳定性和良好的临床前药效，预期有优秀的临床治疗效果。
2、为此，本公开的第一方面，提供了一种如通式ⅰ所示的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，
3、
4、其中：
5、所述抗体-药物偶联物中的药物为如下式ⅱ所示的喜树碱类抗肿瘤药物或其立体异构体，
6、
7、ab选自抗cd33抗体或其抗原结合片段；
8、m1、m2、m3各自独立地选自且m1、m2、m3互不相同；或者，m1、m2、m3各自独立地选自式a1、式a2、式a3所示结构，且m1、m2、m3互不相同；
9、
10、其中y为支架，选自c1-c6烷基、取代c1-c6烷基或c3-c8环烷基；优选y为c1-c6烷基；ac为亲水结构单元；左侧波浪线所示位置与ab相连，右侧波浪线所示位置与b相连或l相连；
11、b存在或不存在，当b存在时选自修饰单元；
12、l选自连接单元，优选为含肽连接单元；
13、x选自-nh-、-o-或-s-，优选为-o-；
14、r1和r2相同或者不同，且各自独立地选自氢、氘、卤素、c1-c6烷基、取代c1-c6烷基、c3-c8环烷基、c3-c8环烷基c1-c6烷基、c1-c6烷氧基c1-c6烷基、3-7元杂环基、取代3-7元杂环基、c6-c10芳基、取代c6-c10芳基、5-10元杂芳基、取代5-10元杂芳基；
15、r3和r4相同或者不同，各自独立地选自氢、氘、卤素、c1-c6烷基、取代c1-c6烷基、c3-c8环烷基、c3-c8环烷基c1-c6烷基、c1-c6烷氧基c1-c6烷基、3-7元杂环基、取代3-7元杂环基、c6-c10芳基、取代c6-c10芳基、c6-c10芳基c1-c6烷基、5-10元杂芳基、取代5-10元杂芳基；优选r3、r4各自独立地选自氢、c1-c6烷基、取代c1-c6烷基、c3-c8环烷基、c3-c8环烷基c1-c6烷基或c6-c10芳基c1-c6烷基；
16、或者，r3、r4及其所连接碳原子构成c3-c8环烷基、3-7元杂环基、取代3-7元杂环基；优选r3、r4及其所连接碳原子构成c3-c8环烷基；
17、r5选自氢、氘、卤素、c1-c6烷基、取代c1-c6烷基、c3-c8环烷基c1-c6烷基、c1-c6烷氧基c1-c6烷基，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种如通式Ⅰ所示的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，
2.如权利要求1所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述M1、M2、M3各自独立地选自且M1、M2、M3互不相同；或者，M1、M2、M3各自独立地选自式A1、式A2、式A3所示结构，且M1、M2、M3互不相同；
3.如权利要求1或2中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：M1、M2、M3选自以下(1)-(7)中的任意一个组合，且M1、M2、M3互不相同，
4.如权利要求1-3中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元B存在或不存在，当所述修饰单元B存在时，非限制性地选自可增强亲水性的结构或其立体异构体。
5.如权利要求1-4中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元B存在或不存在，当所述修饰单元B存在时，所述修饰单元B非限制性地选自如下式所示的可增强亲水性的结构
6.如权利要求1-5中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述连接单元L为L1-L2，
7.如权利要求1-6中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：
8.如权利要求1-7中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述喜树碱类抗肿瘤药物非限制性地选自以下化合物或其立体异构体，
9.如权利要求1-8中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述的抗体-药物偶联物非限制性地选自以下结构，
10.如权利要求1-9中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗CD33抗体或其抗原结合片段的轻链可变区包含如SEQID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10所示的CDR1、CDR2、CDR3，重链可变区包含如SEQ IDNO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示的CDR1、CDR2、CDR3。
11.如权利要求1-10中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗CD33抗体或其抗原结合片段的轻链可变区如SEQ IDNO：7所示，重链可变区如SEQ ID NO：1所示。
12.如权利要求1-11中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗CD33抗体包含来源于人免疫球蛋白的恒定区；
13.如权利要求10-12中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗CD33抗体进一步包含半胱氨酸定点插入；
14.如权利要求1-13中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述药学上可接受的盐包括与结构式中酸性官能团形成的钠盐、钾盐、钙盐或镁盐以及与结构中碱性官能团形成的醋酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、硝酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乳酸盐、油酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐、甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐或对甲苯磺酸盐。
15.一种如式Ⅲ所示的连接子药物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，
16.如权利要求15所述的连接子药物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述M’选自或如下式A’所示的接头单元，优选选自如下式A’所示的接头单元；
17.如权利要求15或16中所述的连接子药物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述接头单元M’非限制性地选自如下式所示的结构，
18.如权利要求15-17中任一项所述的连接子药物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元B存在或不存在，当所述修饰单元B存在时，非限制性地选自可增强亲水性的结构或其立体异构体。
19.如权利要求15-18中任一项所述的连接子药物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元B存在或不存在，当所述修饰单元B存在时，所述修饰单元B非限制性地选自如下式所示的可增强亲水性的结构或其立体异构体，
20.如权利要求15-19中任一项所述的连接子药物...
【技术特征摘要】
1.一种如通式ⅰ所示的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，
2.如权利要求1所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述m1、m2、m3各自独立地选自且m1、m2、m3互不相同；或者，m1、m2、m3各自独立地选自式a1、式a2、式a3所示结构，且m1、m2、m3互不相同；
3.如权利要求1或2中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：m1、m2、m3选自以下(1)-(7)中的任意一个组合，且m1、m2、m3互不相同，
4.如权利要求1-3中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元b存在或不存在，当所述修饰单元b存在时，非限制性地选自可增强亲水性的结构或其立体异构体。
5.如权利要求1-4中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：修饰单元b存在或不存在，当所述修饰单元b存在时，所述修饰单元b非限制性地选自如下式所示的可增强亲水性的结构或其立体异构体，
6.如权利要求1-5中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述连接单元l为l1-l2，
7.如权利要求1-6中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：
8.如权利要求1-7中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述喜树碱类抗肿瘤药物非限制性地选自以下化合物或其立体异构体，
9.如权利要求1-8中任一项所述的抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述的抗体-药物偶联物非限制性地选自以下结构，
10.如权利要求1-9中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗cd33抗体或其抗原结合片段的轻链可变区包含如seqid no：8、seq id no：9、seq id no：10所示的cdr1、cdr2、cdr3，重链可变区包含如seq idno：2、seq id no：3、seq id no：4所示的cdr1、cdr2、cdr3。
11.如权利要求1-10中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗cd33抗体或其抗原结合片段的轻链可变区如seq idno：7所示，重链可变区如seq id no：1所示。
12.如权利要求1-11中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗cd33抗体包含来源于人免疫球蛋白的恒定区；
13.如权利要求10-12中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，所述抗cd33抗体进一步包含半胱氨酸定点插入；
14.如权利要求1-13中任一项所述抗体-药物偶联物或其立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱义，万维李，卓识，张勇，于天姿，
申请(专利权)人：成都百利多特生物药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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