本发明专利技术涉及一种基于自组装单分子膜的卟啉检测方法，该方法首先将磷酸盐修饰电极浸入不同浓度卟啉的二氯甲烷溶液中反应，瞬间可以看到卟啉溶液颜色发生变化；每次反应后将电极淋洗，然后在含有铁氰化钾探针分子的氯化钾电解质溶液中使用三电极体系进行电化学阻抗扫描，得到的单分子自组装膜的电荷转移阻抗值（Ｒｃｔ）与四苯基卟啉浓度的对数（ｌｇＣ）具有良好的线性关系。本发明专利技术利用比色法和电化学交流阻抗法相结合的方式进行卟啉检测，不但方便快捷、灵敏度高，而且操作简单、费用低廉。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种卟啉的检测方法，尤其涉及。
技术介绍
卟啉及其金属配合物由于优异的光电特性和稳定性而备受研究者的青睐，是当前 的一个研究热点。卟啉种类繁多，结构各异，广泛存在于自然界中，如肌红蛋白、血红蛋白、 细胞色素P-450、过氧化酶中的铁卟啉、叶绿素中的镁卟啉、维生素B12中的钴卟啉等，它们 与生命活动密切相关，在生命体的电子转移过程中发挥着重要的作用。随着对卟啉和金属 卟啉这类大环化合物的合成和深入研究，它们在仿生膜、催化、太阳能利用、医学和分析化 学等方面的研究中起着越来越重要的作用。由此可见，P卜啉化合物的检测对于卟啉症以及 其它卟啉相关病症的诊断、环境污染的监测等具有重要的意义。传统检测卟啉的方法有分 光光度法，荧光法，高效液相色谱法，质谱法，色谱-质谱联用法、薄层色谱法、毛细管电泳 分离-荧光检测法、荧光狭线法、磁圆二色法等方法，但这些方法都不够快速简便，而且仪 器系统的操作和维护比较复杂，测试的费用也比较高。因此，发展快速简便、费用较低，而且 灵敏的卟啉检测方法非常重要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种简单、灵敏、快速的基于自组装单分子膜 的卟啉检测方法。为解决上述问题，本专利技术所述的一种，包括 以下步骤(1)将金电极依次用粒径为0. 3 μ m、0. 05 μ m的三氧化二铝粉末抛光成镜面，再依 次经体积浓度为95%的乙醇、二次蒸馏水超声清洗后，得到处理后的金电极；(2)将所述处理后的金电极经氮气吹干后，插入盛有5mL含有摩尔浓度为ImM或 5mM的铁氰化钾探针分子的摩尔浓度为0. IM氯化钾电解质溶液中，并采用以所述处理后的 金电极为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫 描，得到裸电极的电荷转移阻抗值；(3)将所述处理后的金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后置于含摩尔浓度 为0. OlM 2-巯基乙醇的无水乙醇溶液中自组装30 90min，取出用无水乙醇淋洗并用氮气 吹干金电极表面，制得2-巯基乙醇(2-ME-SAM)修饰的金电极；然后，采用以所述2-巯基乙 醇(2-ME-SAM)修饰的金电极为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极 体系进行交流阻抗扫描，得到2-巯基乙醇修饰金电极的电荷转移阻抗值；(4)将所述2-巯基乙醇(2-ME-SAM)修饰的金电极浸入三乙胺和三氯氧磷的混合 溶液中，通氮气，反应3 6h后，即得到磷酸盐修饰的金电极；将所述磷酸盐修饰的金电极 依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后，插入盛有5mL含有摩尔浓度为ImM或5mM铁氰化钾探针分子的摩尔浓度为0. IM氯化钾电解质溶液中，并采用以所述磷酸盐修饰 的金电极为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗 扫描，得到磷酸盐修饰金电极的电荷转移阻抗值；(5)将所述磷酸盐修饰的金电极浸入含摩尔浓度为10_4M四苯基卟啉的二氯甲烷 溶液中，IOs内溶液颜色由酒红色变为深绿色，测其紫外吸收光谱；反应4. 5h后，得到反应 4. 5h修饰金电极；将所述反应4. 5h修饰金电极取出，依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲 洗、氮气吹干，采用以所述反应4. 5h修饰金电极为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为 参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到反应4. 5h修饰金电极的电荷转移阻抗值；(6)将所述反应4. 5h修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后继续置于所 述含摩尔浓度为IO-4M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应，分别在反应7. Oh,8. Oh和9. Oh 时将电极取出，得到不同反应时间修饰金电极；将所述不同反应时间修饰金电极依次分别 用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以所述不同反应时间修饰金电极为工 作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到不同 反应时间修饰金电极的电荷转移阻抗值；(7)重复所述(1) (4)步骤，然后将所述磷酸盐修饰的金电极浸入摩尔浓度为含 IO-7M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与ICT7M四苯基卟啉反应后修饰 金电极；将所述与KT7M四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水 冲洗、氮气吹干，采用以与IiT7M四苯基卟啉反应后修饰金电极为工作电极、以钼为对电极、 以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与IO-7M四苯基卟啉反应后修 饰金电极的电荷转移阻抗值；(8)将所述与ICT7M四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气 吹干后置于含摩尔浓度为IiT6M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与 10_6M四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与10_6M四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用 氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与10_6M四苯基卟啉反应后修饰金电极 为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到 与KT6M四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与ICT6M四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干 后置于含摩尔浓度为IiT5M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与ICT5M四 苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与IiT5M四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无 水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与10_5M四苯基卟啉反应后修饰金电极为工作 电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与10_5M 四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与ICT5M四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干 后置于含摩尔浓度为5X10_SM四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与 5X 10_5M四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与5X 10_5M四苯基卟啉反应后修饰金电极 依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与5X10_5M四苯基卟啉反应后 修饰金电极为工作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻 抗扫描，得到与5X ICT5M四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与5X10_5M四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后置于含摩尔浓度为10_4M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与10_4M 四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与ICT4M四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、 无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与10_4M四苯基卟啉反应后修饰金电极为工 作电极、以钼为对电极、以Ag/AgCl为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与 IO-4M四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与ICT4M四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干 后置于含摩尔浓度为IiT3M四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应1 3h，取出，得到与ICT3M四 苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与IiT3M四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无 水乙醇、二次蒸馏水冲洗本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种基于自组装单分子膜的卟啉检测方法，包括以下步骤：（１）将金电极依次用粒径为０．３μｍ、０．０５μｍ的三氧化二铝粉末抛光成镜面，再依次经体积浓度为９５％的乙醇、二次蒸馏水超声清洗后，得到处理后的金电极；（２）将所述处理后的金电极经氮气吹干后，插入盛有５ｍＬ含有摩尔浓度为１ｍＭ或５ｍＭ的铁氰化钾探针分子的摩尔浓度为０．１Ｍ氯化钾电解质溶液中，并采用以所述处理后的金电极为工作电极、以铂为对电极、以Ａｇ／ＡｇＣｌ为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到裸电极的电荷转移阻抗值；基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与１０↑［－７］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极为工作电极、以铂为对电极、以Ａｇ／ＡｇＣｌ为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与１０↑［－７］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；（８）将所述与１０↑［－７］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后置于含摩尔浓度为１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应１～３ｈ，取出，得到与１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极为工作电极、以铂为对电极、以Ａｇ／ＡｇＣｌ为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与１０↑［－６］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后置于含摩尔浓度为１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应１～３ｈ，取出，得到与１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯仿、无水乙醇、二次蒸馏水冲洗、氮气吹干，采用以与１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极为工作电极、以铂为对电极、以Ａｇ／ＡｇＣｌ为参比电极的三电极体系进行交流阻抗扫描，得到与１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极的电荷转移阻抗值；将所述与１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极取出用二次蒸馏水冲洗、氮气吹干后置于含摩尔浓度为５×１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉的二氯甲烷溶液中反应１～３ｈ，取出，得到与５×１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极；将所述与５×１０↑［－５］Ｍ四苯基卟啉反应后修饰金电极依次用氯...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：卢小泉，赵东霞，张翠忠，王文婷，忤博万，陕多亮，史海材，
申请(专利权)人：西北师范大学，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]
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