一种木姜叶柯总黄酮的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以植物木姜叶柯为原料提取的木姜叶柯总黄酮，开发一种降血糖的新药，提供了一种制备木姜叶柯总黄酮的方法，用本发明专利技术的方法获得的木姜叶柯总黄酮的纯度可达８０％以上，根皮苷含量达６５％以上，工艺简单，耗能低，工艺条件合理稳定可行。用木姜叶柯总黄酮，开发的降血糖胶囊能够给糖尿病人提供了一种方便，容易接受和能长期服用的口服降糖制剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物制备，更具体地说是降血糖类的植物药品及保健品的制备方法。
技术介绍
木姜叶柯为壳斗科柯属植物Lithocarpus litseifolius Chun.，主要分布于中国广西百色、凌云、平果、那坡、隆林、大明山和河池等地区的山地密林中，资源丰富。木姜叶柯主要成分是黄酮类成分，含量最高达到12.6％，主要包括根皮苷、三叶苷、3-羟基根皮苷。药理研究发现根皮苷及其同分异构体三叶苷对糖代谢的调节具有药动学方面的协同作用，根皮苷能逆转胰岛素抵抗性，使胰岛素抵抗大鼠的糖耐量和胰岛素敏感性恢复正常，纠正高血糖狗的胰高血糖素对葡萄糖的敏感性，抑制高血糖家兔肠道对糖的吸收，部分逆转糖尿病的肝糖代谢基因的表达，增高葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性，催化磷酸戊糖途径。1988年美国专利US 4760135公开了根皮苷及根皮素衍生物用于降血糖药物的制造，但是根皮苷在肠道可被糖苷酶水解(Diedrich，Arch.Biochem.Biophys.，1972，153(1)：155)，Barrow对比了灌胃和腹腔注射给药两种途径，证明只有腹腔注射的大鼠体内发现有原形药物(Barrow，Biochem.J.1977，125(2)：24)，这种水解活性具有明显的动物种族差异(Ramaswamy，Comp.Biochem.Physiol.A.，1972，43(1)：173)。由于US4760135用的是单一活性化合物根皮苷，无法避免肠道糖苷酶的水解，因此，必须注射给药才能生效。而糖尿病患者对长期注射给药方式是难以接受的。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了给糖尿病患者提供一种以木姜叶柯总黄酮为原料的新型药物，以利于糖尿病患者能长期、方便地服用，特别是提供了这种药物的制备方法。研究发现，三叶苷是肠道糖苷酶的抑制剂，又是此酶的底物。但是其抑制糖苷酶的作用远大于被水解的作用(Evans，Arch.Biochem.Biophys.，1980，199(2)：342)；由于三叶苷具有抑制肠道糖苷酶对根皮苷的水解，保护根皮苷不受糖苷酶的水解，可提高根皮苷的生物利用度。又由于根皮苷与三叶苷共同存在于木姜叶柯中，成为具有药动学协同作用的天然配方。从木姜叶柯中提取的混合提取物-木姜叶柯总黄酮，其中包括根皮苷和三叶苷，可以避免根皮苷在肠道的水解，因而口服给药也有效。因此，糖尿病患者更加容易接受。木姜叶柯总黄酮可以抑制肠道对糖的吸收，减少血糖来源；抑制肾糖重吸收，促进糖的排泄，降低血糖，减轻高血糖对各个器官组织的毒性作用；提高组织细胞对胰岛素的敏感性，改善胰岛素的抵抗性；促进磷酸戊糖途径和肌糖原的合成，增加糖的氧化。由于它在糖代谢过程中可以减少血糖来源和增加血糖去路等多个环节进行调整，所以木姜叶柯总黄酮成了一种新型降血糖药物的主要有效成分。本专利技术提出的一种木姜叶柯总黄酮制备方法，包括提取、浓缩、真空干燥工序，其特征在于：以乙醇为溶剂，对木姜叶柯干叶进行加热回流提取，提取液经处理后再用聚酰胺树脂吸附分离，最后再以乙醇为洗脱剂将聚酰胺树脂上的木姜叶柯总黄酮洗脱。-->上述的一种木姜叶柯总黄酮制备方法，其特征在于：1.乙醇加热回流提取：a.木姜叶柯干叶，按重量加5-15倍量20-70％体积浓度的乙醇；b.回流提取1--4次，每次0.5--3小时；c.回流提取温度为50-90℃。2.聚酰胺树脂法分离纯化：a.吸附：上柱根皮苷量与聚酰胺树脂的质量体积比＜23∶1(即相当于0.3g原生药/mL树脂)；上样液根皮苷浓度为6-8mg/mL(相当于0.1g原生药/mL)；上柱流速为0.5-2BV/h；b.洗脱：以乙醇为洗脱剂；洗脱剂用量为10-30BV；洗脱流速为1-3BV/h。上述的一种木姜叶柯总黄酮制备方法，其特征在于：1.乙醇加热回流提取：a.木姜叶柯干叶，按重量加10倍量70％体积浓度的乙醇；b.回流提取三次，每次2小时；c.回流提取温度为80-90℃。2.聚酰胺树脂法分离纯化：a.吸附：上柱根皮苷与聚酰胺树脂质量体积比＜23∶1(即相当于0.3g原生药/mL树脂)；上样液根皮苷浓度为7mg/mL(相当于0.1g原生药/mL)；上柱流速为1BV/h；b.洗脱：20％乙醇为洗脱剂；洗脱剂用量为20BV；洗脱流速为2BV/h。上述的一种木姜叶柯总黄酮制备方法，其特征在于：聚酰胺树脂规格为80-100目。收集20BV的洗脱液，洗脱液减压回收乙醇，浓缩，真空干燥，获得本专利技术的降血糖提取物——木姜叶柯总黄酮。本专利技术的技术方案和操作方法是这样选择和确定的。黄酮类化合物的提取一般采用溶剂提取法，如热水提取、碱性水或碱性稀醇提取、有机溶剂提取、系统溶剂提取等方法(陈晓青，等.中草药成分分离分析技术与方法，第1版.北京：化学工业出版社现代生物技术与医药科技出版中心，2006：62-65.)。而从木姜叶柯中提取黄酮成分主要有水煎煮提取法(廖晓峰，等.从多穗柯中提取二氢查耳酮(DHC)类甜味剂的研究.广州食品工业科技，1999，15(1)：35-38.；于丽静，等.多穗柯中二氢查耳酮的提取、纯化与含量测定.中国食品添加剂，2007，(1)：176-179.；董华强，等.微波辅助提取多穗柯嫩叶黄酮工艺研究.农业工程学报，2007，23(2)：213-217.)和乙醇提取法(肖坤福，等.多穗柯中黄酮类物质提取工艺的研究.食品科学，2004，25(5)：112-115.；李胜华，等.多穗柯总黄酮提取工艺及其含量动态变化研究.食品科学，2008，29(6)：139-141.；赵红芳，杨亚玲，周强.云南甜茶中总黄酮的提取及其抗过敏活性研究.河北化工，2006，29(5)：10-11.)。热水提取法是提取黄酮苷类化合物的常用方法，易于工业化大生产，但热水浸提时易溶于水的杂质较多，后处理较复杂，提取效率也不太高。由于黄酮类化合物大多具有酚羟基，因此可用碱性水或碱性稀醇浸提，浸出液经酸化后可析出黄酮类化合物。但用碱性溶剂提取时，所用的碱浓度过高，加热时容易破坏黄酮类化合物母核；而且浸出液酸化时，析出的黄酮类化合物的稀醇或酸水中有一定的溶解-->度，降低了产品收率。所以不太适宜于工业化生产。乙醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂。其他有机溶剂虽然选择性强，但容易挥发，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，价格较贵，设备要求也比较高，操作需要有通风设备，在大量提取中草药原料或工业化生产时，直接应用这类溶剂有一定的局限性。综合考虑各方面因素，我们选用比较常用的、比较经典的、易于操作的、工艺简单的乙醇提取与水提取进行比较，从而选出比较好的提取溶剂。1.木姜叶柯总黄酮的提取1.1提取溶剂的选择  取木姜叶柯嫩叶粗粉分别用乙醇和水提取，以木姜叶柯总黄酮中的主要有效成分根皮苷提取量为考察指标，优选出较好的提取溶剂。1.1.1水煎煮提取  取木姜叶柯嫩叶粗粉100g，水煎煮提取二次，每次加10倍量水，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至稠膏，真空干燥，称重，测定其根皮苷含量，计算根皮苷提取量。1.1.2乙醇回流提取  取木姜叶柯嫩叶粗粉100g，加热回流二次，每次加10倍量70％乙醇，每次2小时，合并回流液，滤过，滤液减压回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥，称重，测定其根皮苷含量，按下式计算根皮苷提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木姜叶柯总黄酮制备方法，包括提取、浓缩、真空干燥工序，其特征在于：以乙醇为溶剂，对木姜叶柯干叶进行加热回流提取，提取液经处理后再用聚酰胺树脂吸附分离，最后再以乙醇为洗脱剂将聚酰胺树脂上的木姜叶柯总黄酮洗脱。

【技术特征摘要】
1.一种木姜叶柯总黄酮制备方法，包括提取、浓缩、真空干燥工序，其特征在于：以乙醇为溶剂，对木姜叶柯干叶进行加热回流提取，提取液经处理后再用聚酰胺树脂吸附分离，最后再以乙醇为洗脱剂将聚酰胺树脂上的木姜叶柯总黄酮洗脱。2.根据权利要求1所述的一种木姜叶柯总黄酮制备方法，其特征在于：(1)乙醇加热回流提取：a.木姜叶柯干叶，按重量加5-15倍量20-70％体积浓度的乙醇；b.回流提取1--4次，每次0.5--3小时；c.回流提取温度为50-90℃；(2)聚酰胺树脂法分离纯化：a.吸附：上柱根皮苷与聚酰胺树脂的质量体积比＜23∶1；上样液根皮苷浓度为6-8mg/mL；上柱流速为0.5-2BV/h；b.洗脱：以乙醇为洗脱剂；...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦宝伟，李茂，蒋珍藕，曾宪彪，邱宏聪，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中医药研究院，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]