环介导恒温扩增技术快速检测链状亚历山大藻的方法技术

本发明专利技术涉及一种环介导恒温扩增技术快速检测链状亚历山大藻的方法，包括：（１）赤潮藻类的基因组ＤＮＡ提取；（２）４条ＬＡＭＰ扩增引物：ＬＺ－Ｆ３１：５’－ＧＴＴＴＡＡＴＧＣＡＡＡＧＴＡＧＣＴＴＴＣＡ－３’；ＬＺ－Ｂ３１：５’－ＣＴＴＣＡＧＣＴＴＧＴＣＣＣＡＧＴＴ－３’；ＬＺ－ＦＩＰ１：５’－ＣＡＴＣＣＡＧＧＴＴＣＡＡＴＧＣＡＡＡＡＣＡＴ－ＡＴＴＴＡＡＴＧＣＴＧＡＴＴＡＧＣＡＴＴＧＴＴＧ－３’；ＬＺ－ＢＩＰ１：５’－ＧＴＴＴＡＣＡＡＣＣＴＡＡＡＣＡＴＧＧＴＴＴＣＧＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＴＡＣＡＡＡＴＡＴＣＡＡＣＣ－３’；（３）ＬＡＭＰ扩增反应体系；（４）ＬＡＭＰ扩增产物的检测。本发明专利技术的ＬＡＭＰ检测方法具有操作简单快速、对仪器要求不高、特异性强、扩增效率高、结果判定简单等优点，适合对链状亚历山大藻快速鉴定和检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属链状亚历山大藻的DNA分子检测领域，特别是涉及一种环介导恒温扩增 技术快速检测链状亚历山大藻的方法。
技术介绍
近年来，我们沿海多次发生赤潮危害，对渔业造成巨大经济损失，对环境和生态平 衡也造成严重的影响。链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)是一种有毒赤潮藻类，可产生麻痹性 贝毒(Paralytic Shellfish Poison)等毒素，对浮游动植物、甲壳类、贝类、鱼类等的存活、 繁殖和发育存在非常不利的影响，食用被这种赤潮藻污染的鱼和贝类则会直接威胁人类的 健康。链状亚历山大藻在我国南北海域都具有分布，因此，严密检测该藻种是海洋检测工作 中的重要内容。据此进行赤潮的预测预报，对于减少水产养殖业损失，保护海洋生态环境， 有着重要的实际意义。传统的链状亚历山大藻的鉴别检测方法是形态观察，依赖于细胞结构的显微观 察，对操作者有较高的专业要求，而且由于藻类之间相似程度较高，环境对藻类的形态也有 较大影响，此方法存在较大的局限性。现代分子生物学的进步使得各种技术应用到藻类鉴定中，如核糖体序列分析、 RFLP、RAPD、PCR鉴定、荧光原位杂交等，从一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环介导恒温扩增技术快速检测链状亚历山大藻的方法，包括：　　（１）赤潮藻类的基因组ＤＮＡ提取　　（２）ＬＡＭＰ扩增引物　　两个外引物：　　ＬＺ－Ｆ３１：５’－ＧＴＴＴＡＡＴＧＣＡＡＡＧＴＡＧＣＴＴＴＣＡ－３’　　ＬＺ－Ｂ３１：５’－ＣＴＴＣＡＧＣＴＴＧＴＣＣＣＡＧＴＴ－３’；　　两个内引物：　　ＬＺ－ＦＩＰ１：５’－ＣＡＴＣＣＡＧＧＴＴＣＡＡＴＧＣＡＡＡＡＣＡＴ－ＡＴＴＴＡＡＴＧＣＴＧＡＴＴＡＧＣＡＴＴＧＴＴＧ－３’　　ＬＺ－ＢＩＰ１：５’－ＧＴＴＴＡＣＡＡＣＣＴＡＡＡＣＡＴＧＧＴＴＴＣＧＴ－ＧＴＧＣＡＣＡＴＴＴＡＣＡＡＡＴＡＴＣＡＡＣＣ－３’；　　（３）ＬＡＭＰ扩增反应体系　　（４）ＬＡＭ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋科技，张凤英，马春艳，马凌波，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院东海水产研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]