一种链带藻NMX451的获得和遗传转化的方法技术

本发明专利技术公开了一种链带藻NMX451的获得和遗传转化的方法，涉及产油微藻的筛选及其遗传转化技术。自野外环境分离获得的一种绿藻经18SrDNA序列分析和形态鉴定，确定该藻为链带藻属成员，其序列为SEQNO.1；其遗传转化的方法是：①构建带有抗性基因的核基因转化质粒；②通过电转移的方法转化链带藻NMX451；③PCR检测转化子是否为阳性转化子；④DNA印迹杂交证明外源基因整合进入宿主DNA。该藻株能够耐受高浓度碳酸氢钠，含油脂量达到细胞干重的27.63%；其藻细胞中也含有较高比例的亚麻酸；利用本发明专利技术可以将外源基因导入链带藻NMX451，使其获得对于zeocin的抗性，也可以同时表达有经济价值的蛋白。

【技术实现步骤摘要】
—种链带藻NMX451的获得和遗传转化的方法
本专利技术涉及产油微藻的筛选及其遗传转化技术，尤其涉及一种链带藻NMX451的获得和遗传转化的方法。具体地说，本专利技术是从野外采集水样，通过分离纯化得到一种能进行开放式养殖的产油藻株——链带藻NMX451，并利用基因重组的手段，构建一个带有表达外源抗性基因的质粒，运用电脉冲的方法将DNA转移进链带藻细胞中，经过zeocin抗性筛选获得转化子，其中带有抗性片段或外源基因的质粒整合进入到了宿主基因组中。
技术介绍
微藻是一大类低等植物，其中许多种是单细胞的，可进行光合作用，固定二氧化碳，释放氧气，合成油脂或多糖作为贮藏物。相对于高等植物，微藻具有繁殖快和单位面积产出高的特点。从油藻提取的油脂可以经过与甲醇反应转化为生物柴油，被认为最有可能替代日渐枯竭的石油来源的柴油，其含有的16碳和18碳的脂肪酸对于生物柴油的生产最为有利。藻类的油脂也含有不饱和脂肪酸，可以添加到动物饲料中促进生长，其中α-亚麻酸也是促进大脑发育、预防人类心脑血管病、抗衰老等非常好的保健品。筛选获得一种培养容易、生长快和产油高的藻种是生产出具有市场竞争力的油藻生物质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种链带藻NMX451，其特征在于：?用含有碳酸氢钠的BG11中培养、分离获得的一种绿藻，在显微镜下观察其形态符合链带藻Desmodesmus属特征，其18S?rDNA序列SEQ?NO.1通过系统关系分析证明属于一种链带藻，命名为链带藻NMX451，即Desmodesmus?sp.NMX451；该藻株能够耐受高浓度碳酸氢钠，含油脂量达到细胞干重的27.63%；其藻细胞中也含有较高比例的亚麻酸；2013年7月17日将该藻株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC?NO：M2013350。

【技术特征摘要】
1. 一种链带藻NMX451，其特征在于: 用含有碳酸氢钠的BGll中培养、分离获得的一种绿藻，在显微镜下观察其形态符合链带藻Desmodesmus属特征,其18S rDNA序列SEQ N0.1通过系统关系分析证明属于一种链带藻，命名为链带藻NMX451,即Desmodesmus sp.NMX451 ;该藻株能够耐受高浓度碳酸氢钠，含油脂量达到细胞干重的27.63%;其藻细胞中也含有较高比例的亚麻酸；2013年7月17日将该藻株保藏于中国典型培...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔任秋，徐旭东，余桂兰，高宏，方仙桃，
申请(专利权)人：中国科学院水生生物研究所，中国石油化工股份有限公司，
类型：发明
国别省市：