本发明专利技术涉及医学诊断试剂，尤其涉及用于急性心肌梗塞早期诊断的快速检测试剂及测试条。本发明专利技术提供了一种双指标联合检测试剂，包含抗人心脏型脂肪酸结合蛋白Ｈ－ＦＡＢＰ和抗人心肌肌钙蛋白ｃＴｎＩ的特异性抗体。本发明专利技术还提供了一种包含抗Ｈ－ＦＡＢＰ和ｃＴｎＩ特异性抗体的胶体金标记免疫层析测试条，用于快速检测急性心肌梗塞。本发明专利技术的双指标联合检测试剂，即可对急性心肌梗塞患者早期诊断，又可防止对长期、症状轻微的慢性心梗病人的漏诊，比较好的解决了检测时间存在差异带来的影响。本发明专利技术的胶体金标记免疫层析测试条为急性心肌梗塞的早期诊断提供了快速、方便、价廉、实用的检测工具，可望用于各级医院，也可用于病人的自我监测。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学诊断试剂，尤其涉及快速诊断急性心肌梗塞的诊断试剂及测试条。
技术介绍
急性心肌梗塞AMI是内科常见的急危重症，已成为严重影响人类健康的疾病，其 发病后1 6小时是溶栓治疗和介入手术治疗的黄金时间，而快速诊断发病6小时内的早 期AMI是决定治疗的关键环节。按照世界卫生组织(WHO)推荐典型的胸痛、心电图改变和 心肌酶异常三项指标中有两项符合，即可诊断AMI。然而，在我国约25 %的AMI病人无症状， 约30%的病例无典型心绞痛表现；采用心电图诊断AMI的准确性平均约60%，诊断非Q波 心肌梗死缺乏特异性，对不稳定心绞痛和小范围AMI难以鉴别，而具有确诊意义的病理性Q 波常在发病6 8小时以后才出现，因而AMI早期心电图确诊率很低。心肌损伤生化标志物的检测在急性心肌梗塞的诊断、监测、危险评估、预后和引 导治疗等方面都起到了重要作用，目前常用的心肌损伤生化标志物有肌酸激酶同功酶 (CK-MB)、肌钙蛋白I (Troponin I)或肌钙蛋白T (cTnl或cTnT)、肌红蛋白(Myoglobin)等。 例如，美国心脏病学会规定联合使用肌红蛋白(Myoglobin)，CK-MB和肌钙蛋白I (Troponin I)三个标志物作为心肌梗塞检测的常规手段。但是，目前的心肌损伤生化标志物的在急性 心肌梗塞早期诊断，尤其是发病6小时以内的早期诊断的敏感性和特异性方面仍有不足。肌酸激酶同功酶(CK-MB) =CK-MB在肌酸激酶的三个同工酶中，CK-MB对于诊断AMI 具有高度敏感性，从19世纪80年代至1995年一直被认为是诊断AMI的“金标准”。然而， CK-MB存在于心肌和骨骼肌细胞中，影响诊断特异性。CK-MB在胸痛作之后5 6小时会升 高2倍，12 24小时达到峰值。因此，不能作为早期标志物。肌钙蛋白肌钙蛋白(Cardiac troponins, cTn)是横纹肌收缩的主要蛋白，有三 个亚单位Tnc，TnI和TnT。cTn不能透过细胞膜进入血循环，故健康人血内不含或含极低 量的cTnT和cTnl。当心肌缺血或缺氧发生变性坏死，细胞膜破损，cTnl和cTnT进入细胞 间质。1989年首次报道检测cTnT，后来在1992年对cTnT的检测进一步描述。由于cTnT、 cTnl对心肌细胞损伤有高度的敏感性和特异性，被人们认为是诊断AMI的“金标准”。但肌 钙蛋白在AMI后的早期释放动力学与CK-MB相似，需要几个小时释放至血液中，才能进行检 测，因此这两种肌钙蛋白不能作为早期标志物。肌红蛋白(Myo)肌红蛋白是19世纪70年代以来用于诊断AMI的第一个非酶蛋 白。它的分子量小，发病后1小时能快速释放到血液中，具有高敏感性和阴性预测值，对于 早期筛选AMI非常有价值。然而，肌红蛋白不仅大量存在于心肌细胞，还存在于骨骼肌细胞 等多种组织中，故炎症、局部缺血、SLE、休克、皮肌炎等亦可引起MYO升高，其作为AMI的诊 断指标特异性较低。人们一直致力于研究新的用于AMI早期诊断的生化标志物，近年来，有研究者对 心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)作为急性心肌梗塞的标志物进行了研究。H-FABP是一种低分子量的胞浆蛋白，分子量约15000Dt，是重要的细胞内脂肪酸载体蛋白。Van Nieuwen FA 等在Circulation，1995，92 2848报告了 FABP存在于心脏及某些骨骼肌中，但是在心肌中 它的含量比骨骼肌中要高几倍，心肌缺氧时，在AMI早期就可查到FABP在血中升高。Tanaka T等在Clin Biochem, 1991,24 :195_201报道了 10例AMI患者发病1.5 4小时内的早期 标本中FABP都升高而CK-MB仍在正常范围。Tsuji R等在Int JCardiol, 1993,41 209-217 报道了在发病早期阶段(O 3小时)FABP和CK-MB的临床灵敏度分别为91. 4%和20%， FABP 显著高于 CK-MB。Glatz 等在 Clin Chim Acta, 1998，272 87 报告了 83 例 AMI 患者不 同标志物的诊断灵敏度分别为FABP 78%, myoglobin 53%, CK-MB 57% ；而且myoglobin 和CK-MB活性增加的患者，99%也表现有FABP浓度增加。Suzuki等在Nippon Kyobu Geka Gakkai Zasshi, 1996,44 :760_764报告了 FABP在心肌再灌注后60分钟内立即出现高峰， 远在CK-MB和cTnT之前。此外，Glatz等在Clin Chim Acta, 1998，272 87报告健康人血 浆FABP水平为(2. 1 士 1. l)ug/L，上限(鉴别值)为5ug/L，FABP还可以用作判断围手术期 心肌损伤的指标。上述研究提示H-FABP作为AMI早期诊断的生化标志物具有一定的优越 性，但是，如何与其他指标配合使用未见报道。另外，在AMI检测方法上，目前国内常用的方法为酶联免疫法、化学发光法，该方法需要特定的仪器，成本高、操作较复杂、检测时间长，不适宜于AMI患者自检或初次就诊 的基层医院和急诊室进行快速筛选诊断。因此，本领域迫切需要更灵敏、更具特异性的AMI早期诊断标志物或标志组合，以及用于快速诊断AMI的产品。
技术实现思路
本专利技术的目的在于将可用于急性心肌梗塞早期检测的生化标志物心脏型脂肪酸 结合蛋白(H-FABP)和肌钙蛋白I(CTnI)与成熟的胶体金免疫层析快速诊断技术结合起来， 设计出一种快速诊断急性心肌梗塞检测试纸，用于AMI的早期筛选诊断，以解决各级医院， 尤其是基层医院的急诊室缺乏快速、简便筛查早期AMI有效手段的难题。本专利技术的第一方面，提供了一种用于检测急性心肌梗塞的免疫检测试剂，包括针对人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的单克隆抗体；和针对人心肌肌钙蛋白I(cTnl)的单克隆抗体。在一个优选的方案中，针对人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的单克隆抗体选 自7C8和2G4中的一种，其中7C8由保藏号为CGMCC No. 3428的小鼠杂交瘤细胞株产生，2G4 由保藏号为CGMCCNo. 3427的小鼠杂交瘤细胞株产生；针对人心肌肌钙蛋白I (cTnl)的单克 隆抗体选自3D2和2E5中的一种，其中3D2由保藏号为CGMCC No. 3425的小鼠杂交瘤细胞 株产生，2E5由保藏号为CGMCCNo. 3426的小鼠杂交瘤细胞株产生。保藏单位为中国微生菌 种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)(地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号)， 保藏日期为2009年11月9日。在一个优选的方案中，上述用于检测急性心肌梗塞的免疫检测试剂，针对人心脏 型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的单克隆抗体包括抗原表位不同的第一抗体和第二抗体；针 对人心肌肌钙蛋白I(cTnl)的单克隆抗体包括抗原表位不同的第一抗体和第二抗体。所述 的针对人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的第一抗体选自7C8和2G4中的一种，第二抗体为另一种；所述的针对人心肌肌钙蛋白I(cTnl)的第一抗体选自3D2和2E5中的一种，第二 抗体为另一种。在更优选的方案中，针对人心脏型脂肪酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于免疫学方法检测急性心肌梗塞的试剂，包括以下组分：针对人心脏型脂肪酸结合蛋白（Ｈ－ＦＡＢＰ）的单克隆抗体；和针对人心肌肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎＩ）的单克隆抗体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张云涛，席仲兴，杨福军，彭林峰，张正雷，张甲菊，
申请(专利权)人：兰州生物制品研究所，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]
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