一种制造技术

本发明专利技术属于分子生物学病原核酸快速检测技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种BVDV快速检测试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术属于分子生物学病原核酸快速检测
，具体为一种
BVDV
快速检测试剂盒及其检测方法
。

技术介绍

[0002]牛病毒性腹泻（
Bovine viral diarrhea
，
BVD
）是由牛病毒性腹泻病毒（
Bovine viral diarrhea virus
，
BVDV
）引起的一种以腹泻为临床特征的传染病，可导致怀孕母牛的流产
、
死胎
、
畸胎或新生犊牛的持续感染，它具有高度传染性，但症状和病变较轻，发病率高而死亡率低
。
除了牛之外，其它的偶蹄目动物，如绵羊
、
山羊
、
野生反刍动物和猪，都可被感染
。
除牛以外的反刍动物不会感染粘膜病，但是会引起它们的繁殖力下降
。
所有年龄的动物都易感染
。
本病潜伏期7天～
14
天
。
在临床上分为急性
、
慢性结果
。
急性病牛主要表现为突然发病，体温升高，重度腹泻，白细胞减少，大量流涎，口腔粘膜糜烂和溃疡，可在发病后几天死亡
。
病母牛所产的犊牛发生下痢，在口腔
、
皮肤
、
肺和脑有坏死灶，在体温升高的同时白细胞减少
。
慢性病例临床症状不明显或逐渐发病，生长发育受阻，消瘦，体重逐渐下降
。
比较特殊的症状是鼻镜上的糜烂，糜烂可在鼻镜上连成一片，表现为间歇性腹泻
、
跛行，病程较长，可在发病几周或数月死亡
。
[0003]直接或间接接触均可传播本病
。
主要由于摄食被病毒污染的饲料
、
饮水而感染，也可由于病畜咳嗽
、
剧烈呼吸喷出的传染性飞沫而使易感动物感染
。
另外通过运输工具，饲养用具或者通过自然界的某些宿生如鹿
、
羊
、
猪也可以传播本病
。
应用被病毒污染的其他疫苗或未经消毒的注射器，也可引起本病，带毒公牛能长期从精液中排出病毒，通过配种可传染给母牛
。
持续性感染的母牛可以通过胎盘传染给胎儿，可引起流产及犊牛的先天损失，也可能产下貌似正常的持续性感染的犊牛，持续性感染母牛其后裔也常是持续感染牛，形成母系持续感染家族
。
[0004]BVDV
属于黄病毒科瘟病毒属，与古典猪瘟病毒和绵羊边界病病毒关系密切，其有三种不同的基因型
BVDV
‑1型
、BVDV
‑2型
、BVDV
‑3型
。BVDV
的三种基因型都可以引起致细胞病变和非致细胞病变（生物型）感染
。
通常，在牛群中传播的是非致细胞病变的生物型
。BVDV
‑2型和
BVDV
‑3型病毒通常是非致细胞病变病毒，引起过严重的急性感染的爆发和出血型综合症
。
三种基因型都可以引起常见的温和的和不明显的感染
。
目前，行业中急需一种在同一检测体系中实现对不同亚型
BVDV
核酸的快速检测方法
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种
BVDV
快速检测试剂盒及其检测方法，能够快速检测
BVDV
‑1型
、BVDV
‑2型
、BVDV
‑3型并进行定性
。
以解决上述
技术介绍
中提出的问题
。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种用于
BVDV
检测的引物和
Taqman
探针，由正向引物
1、
反向引物
1、Taqman
探针
1、
正向引物
2、
反向引物
2、Taqman
探针
2、
正向引物
3、
反向引物3和
Taqman
探针3组成；
所述正向引物1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示，所述反向引物1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：2所示，所述
Taqman
探针1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：3所示；所述正向引物2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：4所示，所述反向引物2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：5所示，所述
Taqman
探针2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：6所示；所述正向引物3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：7所示，所述反向引物3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：8所示，所述
Taqman
探针3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：9所示；所述
Taqman
探针
1、Taqman
探针2和
Taqman
探针3的荧光基团各不相同
。
[0007]优选的，所述
Taqman
探针的荧光基团选自
FAM、HEX、ROX、VIC
或
Cy5
中的任意一种，所述
Taqman
探针的猝灭基团选自
MGB、BHQ1、BHQ2
或
TMARA
中的任意一种
。
[0008]优选的，所述
Taqman
探针1的荧光基团为
VIC、
猝灭基团为
BHQ1
，所述
Taqman
探针2的荧光基团为
FAM、
猝灭基团为
BHQ1
，所述
Taqman
探针3的荧光基团为
Cy5、
猝灭基团为
BHQ2。
[0009]一种
BVDV
快速检测试剂盒，包括如前述任一的用于
BVDV
检测的引物和
Taqman
探针
。
[0010]一种
BVDV
快速检测方法，其为利用前述任一项的用于
BVDV
检测的引物和
Taqman
探针对待测样本进行
BVDV
检测
。
[0011]优选的，具体步骤为：
S1、
提取待检测样本的
RNA
；
S2、
对步骤
S1
中提取的
RNA
进行逆本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于
BVDV
检测的引物和
Taqman
探针，其特征在于，由正向引物
1、
反向引物
1、Taqman
探针
1、
正向引物
2、
反向引物
2、Taqman
探针
2、
正向引物
3、
反向引物3和
Taqman
探针3组成；所述正向引物1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示，所述反向引物1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：2所示，所述
Taqman
探针1的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：3所示；所述正向引物2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：4所示，所述反向引物2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：5所示，所述
Taqman
探针2的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：6所示；所述正向引物3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：7所示，所述反向引物3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：8所示，所述
Taqman
探针3的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：9所示；所述
Taqman
探针
1、Taqman
探针2和
Taqman
探针3的荧光基团各不相同
。2.
根据权利要求1所述的一种用于
BVDV
检测的引物和
Taqman
探针，其特征在于，所述
Taqman
探针的荧光基团选自
FAM、HEX、ROX、VIC
或
Cy5
中的任意一种，所述
Taqman
探针的猝灭基团选自
MGB、BHQ1、BHQ2
或
TMARA
中的任意一种
。3.
根据权利要求2所述的一种用于
BVDV
检测的引物和
Taqman

【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏程，王帅雯，陈旭，陈刚，
申请(专利权)人：上海吉泰依科赛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：