一种免疫细胞低温冻存液及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种免疫细胞低温冻存液及其应用，该低温冻存液包括下述组分：基础冻存液

【技术实现步骤摘要】
一种免疫细胞低温冻存液及其应用


[0001]本专利技术涉及细胞冻存液领域，具体为一种免疫细胞低温冻存液及其应用
。

技术介绍

[0002]免疫治疗技术在未来医疗方向表现出巨大的潜力，其中哺乳动物免疫细胞，例如
T
细胞
、
γδ
T
细胞
、NK
细胞或
293T
细胞，其在同种异体环境中出现抗宿主病的风险较低，在临床治疗中具有极大优势
。
但其中应用的细胞在长期保存方面仍存在客观上的延迟凋亡现象，使其在低温保存复苏后表现出延迟的细胞凋亡，这种凋亡现象导致近半数的免疫细胞无法应用于后续的临床治疗
。
[0003]现有的免疫细胞冻存液利用高浓度（
10%
）
DMSO
和血清（
FBS
）冻存细胞从而达到降低细胞复苏后细胞凋亡比例的目的
。
但这些物质的添加配比引入外源血清，增加了后续免疫治疗时存在的临床风险，同时高浓度的
DMSO
也增加了对细胞及人体的毒害作用
。
此外现有的冻存液在冻存免疫细胞时，存在细胞复苏后延迟凋亡率高的现象，免疫细胞在冻存后复苏
24
小时
、48
小时细胞活率较低
。
因此，急需开发一种免疫细胞在复苏后
24
小时
、48
小时的延迟凋亡现象显著降低的细胞冻存液
。

技术实现思路
r/>[0004]针对上述问题，本专利技术开发了一种免疫细胞低温冻存液及其应用，以降低免疫细胞延迟凋亡现象
。
本专利技术的目的在于提供一种免疫细胞低温冻存液及其应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题
。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种免疫细胞低温冻存液，由基础冻存液和添加组分组成，所述的基础冻存液为依科赛
UC000
‑
N056
细胞冻存液；所述的添加组分，具体为：
60g/L
的葡聚糖
、3g/L
的甘露醇
、5g/L
的异亮氨酸
、20
μ
g/L
的白藜芦醇
、0.2g/L
的抗坏血酸磷酸半镁盐
、0.5g/L
的羟丙基纤维素
。
[0006]优选的，上述免疫细胞低温冻存液用于哺乳动物免疫细胞的低温冻存
。
[0007]优选的，所述的哺乳动物免疫细胞为
T
细胞
、
γδ
T
细胞
、NK
细胞或
293T
细胞中的任意一种
。
[0008]与现有技术相比，本专利技术所达到的有益效果是：本专利技术的免疫细胞低温冻存液，与市场上现有的冻存液相比，成分简单明确，成本低廉
、
且不含外源异体成分，临床安全，显著降低了免疫细胞冻存复苏后发生的延迟凋亡现象，并维持了细胞较高的增殖能力
。
[0009]低温冻存液是一种可降低细胞内降温时冰晶的凝结状态，并对细胞低温冻存时产生的过量活性氧进行清除，从而从两方面对免疫细胞在降温过程中以及低温保存过程中进行保护，使其在复苏后延迟凋亡现象得以改善
。
[0010]本专利技术提供的一种可以低温（
‑
196℃
）保存免疫细胞的低温冻存液，也可在
‑
80℃
保存，成分简单明确，不引入任何动物源或人源成分，临床安全，成本低廉，冻存复苏后可以降低免疫细胞的延迟凋亡比例，并保持复苏后良好的细胞增殖能力
。
[0011]本专利技术的细胞冻存液，在依科赛（
EXCELL
）
UC000
‑
N056
细胞冻存液的基础上，添加了其他设计组分：葡聚糖
、
异亮氨酸
、
甘露醇等，其相互作用可改变细胞内冰晶凝结状态，减少冻存时冰晶形成对免疫细胞的损伤；添加了白藜芦醇
、
抗坏血酸磷酸半镁盐，用作抗氧化剂，可清除细胞内产生的过量自由基，同时对免疫细胞内的细胞器具有一定的保护效果；添加了羟丙基纤维素作为冻存时的增粘剂，降低冻存过程中细胞内冰晶的形成，减少对细胞的冻存损伤
。
通过上述原料的配比组合，能够最大程度上维持免疫细胞低温冻存的细胞状态，降低免疫细胞复苏后延迟凋亡的比例
。
使用本专利技术的免疫细胞冻存液，与现有的其他商业化产品比较，显著降低了免疫细胞复苏后的活率和延迟凋亡现象
。
附图说明
[0012]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制
。
在附图中：图1是本专利技术中实施例1与对照组低温冻存液冻存的免疫细胞，复苏后0小时
、24
小时
、48
小时的细胞活率和细胞数对比图
。
具体实施方式
[0013]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚
、
完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例
。
基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围
。
[0014]以下实施例中，葡聚糖（货号：
D872032
）
、
异亮氨酸（货号：
I6280
）
、
白藜芦醇（货号：
R817263
）均购自麦克林，甘露醇购自阿拉丁（货号：
D433338
），抗坏血酸磷酸半镁盐（货号：
A8960
）
、
羟丙基纤维素（货号：
435007
）均购自西格玛（
Sigma
），依科赛
UC000
‑
N056
细胞冻存液购自依科赛（
EXCELL
）（货号：
UC000
‑
N056
，对应专利公开号
CN115777693A
），
FBS
购自依科赛（
Excell Bio
）货号：
FND500
，
DMSO
购自阿拉丁（
Aladdin
）货号：
D103280
，
T
细胞无血清培养基扩增试剂盒购自依科赛（货号：
BA0042
）
。
[0015]实施例1：一种免疫细胞低温冻存液，包括以下组分：基础冻存液
、60g/L
的葡聚糖
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种免疫细胞低温冻存液，其特征在于，由基础冻存液和添加组分组成，所述的基础冻存液为依科赛
UC000
‑
N056
细胞冻存液；所述的添加组分，具体为：
60g/L
的葡聚糖
、3g/L
的甘露醇
、5g/L
的异亮氨酸
、20
μ
g/L
的白藜芦醇
、0.2g/L
的抗坏血酸磷酸半镁盐
、0.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛馨钰，商春华，孙芳，陈旭，陈刚，
申请(专利权)人：上海吉泰依科赛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：