本发明专利技术属于分析化学领域，具体地说是一种动物源食品中ＰｈＩＰ的测定方法，用有机溶剂萃取动物源食品中的ＰｈＩＰ，并由固相萃取柱净化，高效液相色谱质谱进行检测其含量，本发明专利技术的有益效果：利用固相萃取柱净化，样品处理方便快捷，用高效液相色谱－质谱检测器检测动物源性食品中的ＰｈＩＰ，和紫外、荧光检测器相比，能更好地去除基质干扰，使定性更准确，选择性更强，灵敏度更高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学领域，具体地说是一种动物源食品中PhIP的测定方法。
技术介绍
PhIP (2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑吡啶)是一种“危险的”杂环胺化合 物，美国政府2005年已将它列为致癌物。美国科学家09年4月发表的研究报告称，烤肉食 品的烹制过程中会产生这种物质，在小白鼠身上进行的实验表明，PhIP能够诱发前列腺癌。动物源性食品，除了有大量的蛋白质，氨基酸等之外，制作过程中还可能加入多种 调味剂，包括香精香料，食用油等，因此食品基质相当复杂。国外有用高效液相色谱和紫外 或荧光检测器检测油炸食品中杂环胺类的报道，而国内尚无此类检测的报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种用有机溶剂萃取动物源食品中的PhIP，并由固相萃取柱净化， 高效液相色谱质谱进行检测其含量。本专利技术的具体内容为一种测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于用有机溶剂萃取动物源食品中 的PhIP，并由固相萃取柱净化提取液，高效液相色谱质谱进行检测其含量，其中，所述的用 有机溶剂萃取动物源食品中的PhIP，并由固相萃取柱净化包括以下步骤(1)有机溶剂提取样品2 IOg于玻璃烧杯中，加入30 50mL有机溶剂，高速勻浆，静置备用；(2)固相萃取柱的净化提取液A.固相萃取柱的活化分别以1 3mL甲醇，1 3mL去离子水，1 3mL0. 1 0. 5mM乙酸铵水溶液活化 待用的固相萃取柱，B.提取液的净化取勻浆提取后的样品提取溶液1 5mL加入至已活化的固相萃取柱上，再以1 5mL 4+6的0. 1 0. 5mM乙酸铵水溶液和甲醇混合溶液洗脱，收集全部流出液，过0. 45um滤 膜，高效液相色谱质谱分析；所述的高效液相色谱质谱测定分析样液A.以甲醇和0. 乙酸胺体系为流动相，等度洗脱，用C8，C18等反相色谱柱分离。B.质谱采集采用选择离子扫描方式。所述动物源性食品是炸鸡翅、猪肉等。所述固相萃取柱采用C18、C8或PSA键合硅胶柱。所述提取用有机溶剂为丙酮、甲醇或乙腈。所述提取过程采用高速勻浆机或振荡器。所述被测物为2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑吡啶。本专利技术的有益效果利用固相萃取柱净化，样品处理方便快捷，用高效液相色 谱-质谱检测器检测动物源性食品中的PhIP，和紫外、荧光检测器相比，能更好地去除基质 干扰，使定性更准确，选择性更强，灵敏度更高。具体实施例方式实施例一1.样品的提取烤熟的鸡翅弃去骨头，鸡肉经食品粉碎机粉碎，准确称取5. 0于150mL烧杯中，准 确加入50mL甲醇，用高速勻浆机勻浆，静置20分钟，使分层，待净化。2. C18固相萃取柱活化分别以3mL甲醇，3mL去离子水，3mL0. ImM乙酸铵水溶液淋洗C18固相萃取柱。弃去流出液。3.样品的净化取提取好的样品上清液Iml于活化好的SPE柱中，以较慢的速度过柱，并用ImL 4 6的0. ImM乙酸铵水溶液+甲醇溶液洗脱，收集全部流出液。取适量过0. 45 μ m滤膜， 上机分析。4.仪器测定液相色谱条件测试条件色谱柱 Agilent Eclipse 反相柱,2. 1 X 100mm, 3. 5 μ m流动相MeOH )+0. 1%乙酸铵缓冲盐=60+40流速 0. 3mL/min进样体积40 μ L柱温30°C质谱条件离子源 Ion source ESI (Positive)干燥气、流速 Drying gas flow (L/min) 10力 Nebulizer pressure (psig) 35干燥气温度 Drying gas temperature ("C ) 300毛细管电压 Capillary voltage (V) 4000击碎电压 Fragmentor (V) 210选择特征离子2255.定性和定量定性根据化合物在色谱柱上的保留时间和特征离子进行定性。特征离子225。定量根据化合物的特征离子225，外标法进行定量。权利要求一种测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于用有机溶剂萃取动物源食品中的PhIP，并由固相萃取柱净化提取液，高效液相色谱质谱进行检测其含量，其中，所述的用有机溶剂萃取动物源食品中的PhIP，并由固相萃取柱净化包括以下步骤(1)有机溶剂提取样品2～10g于玻璃烧杯中，加入30～50mL有机溶剂，高速匀浆，静置备用；(2)固相萃取柱的净化提取液A.固相萃取柱的活化分别以1～3mL甲醇，1～3mL去离子水，1～3mL0.1～0.5mM乙酸铵水溶液活化待用的固相萃取柱，B.提取液的净化取匀浆提取后的样品提取溶液1～5mL加入至已活化的固相萃取柱上，再以1～5mL 4+6的0.1～0.5mM乙酸铵水溶液和甲醇混合溶液洗脱，收集全部流出液，过0.45um滤膜，高效液相色谱质谱分析；所述的高效液相色谱质谱测定分析样液A.以甲醇和0.1％乙酸胺体系为流动相，等度洗脱，用反相色谱柱分离。B.质谱采集采用选择离子扫描方式。2.如权利要求1所述的所述的测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于所述动物 源性食品是炸鸡翅、猪肉。3.如权利要求1所述的测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于所述固相萃取柱 采用C18、C8或PSA键合硅胶柱。4.如权利要求1所述的测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于所述提取用有机 溶剂为丙酮、甲醇或乙腈。5.如权利要求1所述的测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于所述提取过程采 用高速勻浆机或振荡器。6.如权利要求1所述的测定动物源食品中PhIP的方法，其特征在于所述被测物为 2_氨基-1-甲基-6-苯基咪唑吡啶。全文摘要本专利技术属于分析化学领域，具体地说是一种动物源食品中PhIP的测定方法，用有机溶剂萃取动物源食品中的PhIP，并由固相萃取柱净化，高效液相色谱质谱进行检测其含量，本专利技术的有益效果利用固相萃取柱净化，样品处理方便快捷，用高效液相色谱-质谱检测器检测动物源性食品中的PhIP，和紫外、荧光检测器相比，能更好地去除基质干扰，使定性更准确，选择性更强，灵敏度更高。文档编号G01N30/02GK101893609SQ20101011164公开日2010年11月24日 申请日期2010年2月22日 优先权日2010年2月22日专利技术者俞安敏, 冯颖, 刘平年, 李广滨, 李青山, 王培华, 陈志强 申请人:通标标准技术服务(上海)有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种测定动物源食品中ＰｈＩＰ的方法，其特征在于：用有机溶剂萃取动物源食品中的ＰｈＩＰ，并由固相萃取柱净化提取液，高效液相色谱质谱进行检测其含量，其中，所述的用有机溶剂萃取动物源食品中的ＰｈＩＰ，并由固相萃取柱净化包括以下步骤：（１）有机溶剂提取：样品２～１０ｇ于玻璃烧杯中，加入３０～５０ｍＬ有机溶剂，高速匀浆，静置备用；（２）固相萃取柱的净化提取液：Ａ．固相萃取柱的活化：分别以１～３ｍＬ甲醇，１～３ｍＬ去离子水，１～３ｍＬ０．１～０．５ｍＭ乙酸铵水溶液活化待用的固相萃取柱，Ｂ．提取液的净化：取匀浆提取后的样品提取溶液１～５ｍＬ加入至已活化的固相萃取柱上，再以１～５ｍＬ４＋６的０．１～０．５ｍＭ乙酸铵水溶液和甲醇混合溶液洗脱，收集全部流出液，过０．４５ｕｍ滤膜，高效液相色谱质谱分析；所述的高效液相色谱质谱测定分析样液：Ａ．以甲醇和０．１％乙酸胺体系为流动相，等度洗脱，用反相色谱柱分离。Ｂ．质谱采集采用选择离子扫描方式。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王培华，李青山，冯颖，俞安敏，刘平年，李广滨，陈志强，
申请(专利权)人：通标标准技术服务上海有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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