一种雪柳菌中抗氧化提取物、提取物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种雪柳菌中抗氧化提取物制备方法及其应用，本发明专利技术所述的抗氧化提取物来自雪柳菌，分别命名为XYJ

【技术实现步骤摘要】
一种雪柳菌中抗氧化提取物、提取物的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及天然产物活性成分
，具体地说是一种雪柳菌中抗氧化提取物、提取物的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，自从世界卫生组织提倡将传统药物与现代药物相结合应用于疾病治疗与保健之后，大型真菌作为中药或功能性食品，在食品和医药行业引起了广泛关注。目前，科研人员已经从大型真菌中分离出多种活性成分，包括多糖、多炔类、蛋白质、多酚、萜类、黄酮和甾体等，具有良好的抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、降血糖、抗溃疡、保护肝脏、抗心肌缺血、抗抑郁、降血脂和免疫调节的作用。其中，有关多糖的研究最为广泛，然而，大型真菌中含量丰富的生物活性多糖，包括凝集素，真菌免疫调节多糖，核糖体失活多糖，抗微生物多糖，核糖核酸酶和漆酶等，在食品和医药领域的应用上展现出巨大的潜能。雪柳菌以其具有独特的食用和药用价值受到人们的喜爱和关注。
[0003]雪柳菌是一种叶状层菌属的药用真菌（公开号CN107177510A，一种雪柳叶层孔菌及其在制备药物中的用途，其介绍了雪柳叶层孔菌，即本专利的雪柳菌），常常寄生与雪柳树的根茎上，广发分布于中国和韩国等东亚国家。叶状层菌属是一种栖息在木材中的真菌属，在中国山东省以茶的形式被用作抗炎食品。多糖、甾醇、酸性成分、苯乙烯化合物和多氯化合物是研究最多的叶状层菌属的药用代谢产物。叶状层菌属的主要来源是其子实体，广泛分布于山东、河南等地的野外。然而，叶状层菌属的子实体一般都不大，并且与许多其他栖息在木材中的真菌一样生长缓慢，因此资源并不丰富。此外，由于叶状层菌属的寄生性强，在一定程度上限制了叶状层菌属的人工栽培，目前尚无人工栽培成功的报道。子实体的缺乏可能会限制叶状层菌属的利用和产业化发展。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种提取物抗氧化能力强、制备方法简单高效、经济、环保，易操作实施的雪柳菌中抗氧化提取物、提取物的制备方法及其应用。
[0005]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种雪柳菌中抗氧化提取物，其特征在于该抗氧化提取物为XYJ
‑
P、XYJ
‑
W或XYJ
‑
W
‑
S，所述的XYJ
‑
P是混合物，包含多糖、蛋白、多酚和黄酮；XYJ
‑
W是混合物，包括多糖和蛋白，XYJ
‑
W
‑
S是粗多糖。
[0006]本专利技术所述的XYJ
‑
W
‑
S是粗多糖分子量为13342 Da。
[0007]一种雪柳菌中抗氧化提取物的制备方法，其特征在于步骤如下：1）、将雪柳菌实体30～50
°
C烘干并研磨成粉，加入2～10倍体积蒸馏水，80～100
°
C水浴震荡浸提1～10 h，过滤所得滤渣再次浸提2～5次，合并滤液，4000～8000 rpm离心10～20 min，收集上清液，即得雪柳菌多糖粗提液；
h，过滤所得滤渣再次浸提2次，合并滤液，4000～8000 rpm离心10～20 min，收集上清液，即得雪柳菌多糖粗提液；2)将雪柳菌多糖粗提液用旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩，加入4倍体积无水乙醇，4
°
C放置8,小时，5000 rpm离心15 min，收集沉淀，即得雪柳菌多糖粗提物XYJ
‑
W，剩余的乙醇溶液组分，旋蒸、冻干后，获得雪柳菌提取物XYJ
‑
P组分；3)将雪柳菌多糖粗提物XYJ
‑
W用蒸馏水进行复溶，得到多糖溶液，置于分液漏斗中，用Sevage法除蛋白，剧烈震荡，静置，等到水相和有机相之间的界面出现白色时，将分液漏斗打开，将下层有机相和中间白色絮状物去除，重复上述操作3次；取上层水相，装入分子截留量为 3500Da的透析袋中，在4
°
C冰箱和足量蒸馏水中透析8小时，反复3次，再经旋转蒸发除去残留的有机溶剂，冷冻干燥,即得雪柳菌粗多糖XYJ
‑
W
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S组分；实施例2本专利技术抗氧化提取物的总糖含量测定采用苯酚
‑
硫酸法测定了雪柳菌提取物的总糖含量。将0.050 g葡萄糖准确称重，放入50ml容量瓶中溶解，加入蒸馏水，得到浓度为1g /L的葡萄糖标准溶液，4
°
C冰箱保存。将0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.6 mL的葡萄糖标准溶液分别移液管入20ml带塞子的试管中，用蒸馏水调成1.0 mL，加入5%苯酚溶液1ml，拌匀，加入硫酸5ml，拌匀，37
°
C水浴反应30min，冷却后测定490 nm吸光度。得到线性回归方程。吸光度和浓度分别在纵坐标(Y)和横坐标(X)上绘制。
[0024]准确移液1.0 mL雪柳菌提取物测定液，按标准工作曲线溶液进行显色反应，在490 nm处测定吸光度，计算雪柳菌提取物的不同组分的总糖含量。
[0025]经过计算可知XYJ
‑
P的总糖含量为41.85%、XYJ
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W的总糖含量为52.57%和 XYJ
‑
W
‑
S的总糖含量为64.65%。
[0026]实施例3本专利技术XYJ
‑
W
‑
S的红外光谱和紫外光谱1.0 mg/mL XYJ
‑
W
‑
S溶液在200 ~ 600 nm波段进行紫外光谱扫描，观察光谱中260 nm和280 nm处是否存在吸收峰，检测XYJ
‑
W
‑
S中是否存在蛋白质杂质。
[0027]准确称取雪柳菌提取物样品1.0mg，将干燥后的KBr 150.0mg磨匀，在压片机上以5 ~ 10
ꢀ×ꢀ
104kPa的压力压成透明片，以KBr片为空白。采用红外光谱仪测定多糖样品的红外透过率。扫描范围为400 cm
‑1~ 4000 cm
‑1，分辨率为4 cm
‑1。
[0028]根据紫外吸收光谱，XYJ
‑
W
‑
S在260 nm和280 nm处有小凸起峰，确定可能含有少量核酸和蛋白质（图2）。经傅里叶红外光谱仪测得其具有典型的多糖吸收谱，见附图9。
[0029]实施例4本专利技术XYJ
‑
W
‑
S的碘
‑
碘化钾反应取2 mL的XYJ
‑
W
‑
S样品溶液与1.5 mL的碘试剂(0.2% KI含0.02% I2)混合，在300 ~ 800 nm范围内用紫外可见光度计进行光谱扫描，测定XYJ
‑
W
‑
S样品支链的程度。
[0030]XYJ
‑
W
‑
S样品和碘
‑
碘化钾试剂的最大吸收峰在3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种雪柳菌中抗氧化提取物，其特征在于该抗氧化提取物为XYJ
‑
P、XYJ
‑
W或XYJ
‑
W
‑
S，所述的XYJ
‑
P是混合物，包含多糖、蛋白、多酚和黄酮；XYJ
‑
W是混合物，包括多糖和蛋白，XYJ
‑
W
‑
S是粗多糖。2.根据权利要求1所述的一种雪柳菌中抗氧化提取物，其特征在于所述的XYJ
‑
W
‑
S是粗多糖分子量为13342 Da。3.一种雪柳菌中抗氧化提取物的制备方法，其特征在于步骤如下：1）、将雪柳菌实体30～50
°
C烘干并研磨成粉，加入2～10倍体积蒸馏水，80～100
°
C水浴震荡浸提1～10 h，过滤所得滤渣再次浸提2～5次，合并滤液，4000～8000 rpm离心10～20 min，收集上清液，即得雪柳菌多糖粗提液；2）、将雪柳菌多糖粗提液用旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩，加入4～6倍体积无水乙醇，2～6
°
C放置8～16小时，5000～10000 rpm离心5～20 min，收集沉淀，即得雪柳菌多糖粗提物XYJ
‑
W。4.根据权利要求3所述的雪柳菌中抗氧化提取物的制备方法，其特征在于所述的步骤2）中收集沉淀后剩余的乙醇溶液组分，旋蒸、冻干后，获得雪柳菌提取物XYJ
‑
P组分。...

【专利技术属性】
技术研发人员：李惠静，鞠豪，吴安吉，
申请(专利权)人：威海海洋生物医药产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：