一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成的具有三层复合结构纳米颗粒及其快速制备方法技术

本发明专利技术提供了一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成的具有三层复合结构纳米颗粒及其快速制备方法，所述的纳米颗粒具有三层结构，该三层复合纳米颗粒包括内层的醇溶蛋白结构、中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构，中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构共同包覆内层的醇溶蛋白结构来形成三层复合纳米颗粒结构，其制备方法是将醇溶蛋白溶于有机相中，将干酪素钠和多糖按照一定比例溶于水中，然后采用纳米沉淀法使醇溶蛋白与干酪素钠和多糖共组装制备稳定的纳米颗粒，本发明专利技术提供的制备复合纳米颗粒的方法具有操作简便，稳定性好，活性高，且适合大规模生产的特点，可用于食品，医药，化妆品和保健品等领域。品和保健品等领域。品和保健品等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成的具有三层复合结构纳米颗粒及其快速制备方法


[0001]本专利技术涉及蛋白质复合物纳米颗粒制备
，具体地说是一种结构简单、制备方法快速的由醇溶蛋白、干酪素钠、多糖形成的具有三层复合结构纳米颗粒及其快速制备方法。

技术介绍

[0002]众所周知，越来越多结构功能化合物例如植物多酚被发现具有潜在的健康益处，特别是改善心脑血管疾病的作用，然而在实际应用中难以达到实验室所得水平，或者说体内水平不能得到与体外一致的结果。同时部分潜在的功能化合物存在颜色深，刺激强，低水溶性和化学不稳定等弊端，这些问题限制了其实际应用。物理作用通过包埋是最具有潜力的方法来解决以上药物利用中的问题。大分子微纳米颗粒以球或者囊的形式将活性物质包埋于形成的致密网状基质中，达到了保护活性物质失活和递送的目的。这就使得需要合成不同的分子来包埋功能化合物以掩盖刺激性，提高其分散性，稳定性和生物利用度等。鉴于此，制备材料(合成聚合物或表面活性剂)、残留的有机溶剂和酸以及制备过程中降解的任何产物，需要研究其生物相容性问题。作为预防策略，对于功能食品应用，只能使用一般公认的安全成分，其中植物蛋白作为递送材料已受到越来越多的关注。
[0003]以醇溶蛋白为材料制备纳米颗粒具有包覆，保护和递送药物的作用。然后单一的醇溶蛋白纳米颗粒具有稳定性差，包埋率低和缓释效果一般的特征。将另一种生物聚合物如干酪素钠通过反溶剂共沉淀的方法可以获得表面附着干酪素的醇溶蛋白纳米颗粒。干酪素钠作为稳定剂具有可再分散和耐较高离子强度的特点。由于醇溶蛋白基纳米颗粒主要通过电荷斥力达到稳定的效果，因此干酪素钠稳定的醇溶蛋白颗粒在pH=4.6左右（干酪素钠等电点）下发生聚沉，不利于药物的递送。多糖作为醇溶蛋白纳米颗粒稳定剂也广泛报道，多糖稳定的醇溶蛋白纳米颗粒不具有耐离子强度的特征，因此采用干酪素钠
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多糖复合稳定剂可望综合两者优势。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种结构简单、制备方法快速的由醇溶蛋白、干酪素钠、多糖形成的具有三层复合结构纳米颗粒及其快速制备方法。
[0005]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒，其特征在于该三层复合纳米颗粒包括内层的醇溶蛋白结构、中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构，中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构共同包覆内层的醇溶蛋白结构来形成三层复合纳米颗粒结构。
[0006]一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，采用一步纳米沉淀法获得，具体包括如下步骤：
（1）将醇溶蛋白溶于有机相中，通过搅拌至完全溶解；（2）将干酪素钠和多糖共同溶于水相中，通过搅拌至完全溶解；（3）将步骤（1）所得醇溶蛋白有机相在搅拌条件下逐滴加入到步骤（2）所得水相中，得到分散液。
[0007]（4）将步骤（3）所得的分散液进行旋转蒸发去除有机相，离心去除大颗粒得到纳米颗粒分散液，然后真空冷冻干燥得到纳米颗粒固体。
[0008]本专利技术所述醇溶蛋白为植物提取或者市售常规醇溶蛋白，醇溶蛋白浓度范围为0.5%~5%（w/v），优选为0.5%～4%。
[0009]本专利技术所述醇溶蛋白采用有机相溶解，所述有机相包括乙醇水溶液、甲醇水溶液异丙醇水溶液，丙酮水溶液或乙二醇。
[0010]本专利技术所述乙醇水溶液的体积分数为30%~90%，甲醇水溶液的体积分数为45%~95%，异丙醇水溶液的体积分数为40%~85%，优选的，有机相甲醇水溶液体积分数为60%～90%（w/v），乙醇水溶液体积分数为65～85%（w/v），异丙醇水溶液体积分数为70%～80% (v/v)。
[0011]本专利技术所述的干酪素钠和多糖按照一定比例共同溶解在水相中，有机相与水相的比例范围为1：1.5~10，优选的，有机相和水相体积为1：2~6（v/v）。
[0012]本专利技术所述的多糖类型为阴性多糖。
[0013]本专利技术所述的干酪素钠的浓度为范围为0.15%~10%（w/v）,多糖浓度为0.001%~7%（w/v），干酪素钠浓度为0.15%~0.3%（w/v）,多糖浓度为0.001%～1%（w/v）。
[0014]上述所述的纳米颗粒具有三层结构，即内层的醇溶蛋白结构为醇溶蛋白构成的疏水性核、中层的干酪素钠结构为两亲性干酪素钠单层和外层的多糖结构的亲水性多糖表面附着后形成的外壳，该方法制备的纳米颗粒尺寸随着外层多糖的种类而变化在50
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600 nm不等，多分散性小于0.3。
[0015]上述所述的醇溶蛋白为玉米醇溶蛋白，小米醇溶蛋白，大麦醇溶蛋白等；针对醇溶蛋白纳米颗粒稳定性差和包埋率低的问题，本专利的目的之一在于制备一种稳定的纳米颗粒用于包埋药物，提高药物的稳定性靶向性和生物利用度。
[0016]针对目前制备多层纳米颗粒的复杂问题，本专利技术提供一种一步法制备该结构的纳米颗粒，极大的减小了制备过程的复杂性。
[0017]上述所述的阴性多糖为带负电荷的多糖，如硫酸软骨素，硫酸根修饰的凝胶多糖，岩藻多糖，海藻酸钠，羧甲基纤维素钠等；本专利技术利用醇溶蛋白的自组装性，利用生物大分子之间的作用力，采用反溶剂法制备了具有疏水性醇溶蛋白核，干酪素钠单层和亲水性外壳的纳米颗粒。优点在于除了提供了一种新型简易的制备多层复合结构的纳米颗粒制备方法，同时形成的粒子大小分布均匀，对脂溶性的包埋率得到明显提高，增强了纳米颗粒的稳定和生物活性。本专利技术提供的三层稳定的纳米粒子可作为药物或者功能因子的保护和递送。
附图说明
[0018]图1是实施例1中制备的单层（裸醇溶蛋白蛋白），二层（干酪素钠和硫酸软骨素分别包覆）和三层（干酪素和硫酸软骨素共包裹的）纳米颗粒的表面电位随pH变化图。
[0019]图2是实施例1中制备的三层纳米颗粒的扫描电镜不同放大倍数图。
[0020]图3是实施例1中两层和三层纳米粒子的透射电镜图。
[0021]图4是实施例1中三层纳米粒子的pH稳定性图。
[0022]图5是实施例1中三层纳米粒子的耐离子强度稳定性图。
[0023]图6是实施例1中新制备的和再分散后的纳米颗粒尺寸和多分散性图。
[0024]图7是实施例1中制备的纳米颗粒红外分析图。
具体实施方式
[0025]下面结合附图对本专利技术进一步说明：如附图所示，制备多层结构的制备条件一般包括两步甚至多步。根据本专利的三层结构，通常的做法是第一步是制备干酪素稳定的纳米颗粒；第二部是将干酪素钠稳定的纳米颗粒投入到多糖水溶液中，以此形成三层复合纳米颗粒。或者在制备中通常将干酪素钠和多糖分别溶解，然后将有有机相和其中一个水相共同滴加到另一水相中。但是无论哪种方法都造成了制备方法的复杂性。本专利技术则通过一步法制备了干酪素和多糖稳定的醇溶蛋白纳米颗粒。
[0026]一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒，其特征在于该三层复合纳米颗粒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒，其特征在于该三层复合纳米颗粒包括内层的醇溶蛋白结构、中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构，中层的干酪素钠结构和外层的多糖结构共同包覆内层的醇溶蛋白结构来形成三层复合纳米颗粒结构。2.一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，采用一步纳米沉淀法获得，具体包括如下步骤：（1）将醇溶蛋白溶于有机相中，通过搅拌至完全溶解；（2）将干酪素钠和多糖共同溶于水相中，通过搅拌至完全溶解；（3）将步骤（1）所得醇溶蛋白有机相在搅拌条件下逐滴加入到步骤（2）所得水相中，得到分散液。（4）将步骤（3）所得的分散液进行旋转蒸发去除有机相，离心去除大颗粒得到纳米颗粒分散液，然后真空冷冻干燥得到纳米颗粒固体。3.根据权利要求2所述的一种由醇溶蛋白、干酪素钠和多糖形成三层复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述醇溶蛋白为植物提取或者市售常规醇溶蛋白，醇溶蛋白浓度范围为0.5%~5%（w/v）。4.根据权利要求2所述的一种由醇溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李惠静，吴彦超，陈晓，
申请(专利权)人：威海海洋生物医药产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：