冠状病毒疫苗组合物、方法及其使用技术

本发明专利技术在一些方面涉及包括重组肽和蛋白质的免疫原性组合物，所述重组肽和蛋白质包含冠状病毒抗原和免疫原，例如SARS

【技术实现步骤摘要】
冠状病毒疫苗组合物、方法及其使用


[0001]本公开内容在一些方面涉及用于治疗和/或预防冠状病毒感染的免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包括重组肽和蛋白质，所述重组肽和蛋白质包括冠状病毒抗原和免疫原，例如冠状病毒S蛋白肽，包括基于SARS
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CoV
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2德尔塔(B.1.617.2)毒株的S蛋白肽由三聚体化
TM
标签多肽间二硫键连接形成的亚单位疫苗。

技术介绍

[0002]冠状病毒感染广泛范围的鸟类和哺乳动物，包括人类。冠状病毒可能每年在人体内传播，通常会引起轻微的呼吸系统疾病，尽管在婴幼儿、老年人和免疫功能低下的人群中严重程度更高。但是，某些冠状病毒，包括中东呼吸综合征冠状病毒(MERS
‑ꢀ
CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS
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CoV
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1)和严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (SARS
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CoV
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2)，具有高致病性。冠状病毒的高致病性、空气传播性、高病死率和模糊确定的流行病学使得迫切需要有效的疫苗和相关的治疗药剂。特别是，迫切需要能够迅速诱导针对SARS
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CoV
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2的有效免疫应答的疫苗。本专利技术提供了满足上述和其它需要的方法、用途和制品(article of manufacture)。

技术实现思路

[0003]从2020年末开始，携带有突变的可能导致免疫逃逸的多重变异SARS
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CoV
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2 毒株的出现和传播使得对第二代疫苗进行快速评估成为必要，目的是诱导具有广泛保护性的优化的免疫应答。
[0004]尽管COVID
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19疫苗开发的巨大进展和空前速度，但在SARS
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CoV
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2病毒爆发首次出现16个月后的2021年4月，COVID
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19每日病例创下了新的纪录。COVID
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19 导致的总死亡人数在2021年5月超过300万人，仅在前3个月就累计死亡100万人。
[0005]最令人担忧的是，在全球COVID
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19病例激增的同时，从2020年底开始出现多种新的SARS
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CoV
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2变异株(VOC)。这些VOC似乎与刺突(S)蛋白的突变有关，突变可能会增加病毒传播率和/或基于SARS
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CoV
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2Hu
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1毒株的第一波COVID
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19疫苗接种引起的免疫逃逸。B.1.1.7变种在英国(UK)、B.1.351变种在南非和P.1变种在巴西的出现和传播导致其被归类为VOC。这些VOC都包括S蛋白的受体结合结构域(RBD)中的N501Y 突变，据报道，该突变可使传播增加40％至70％。B.1.351和P.1变种还有两个另外的 RBD突变——E484K和K417——这可能允许从Hu
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1疫苗和自然感染诱导的抗体中免疫逃逸。
[0006]COVID
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19疫苗的随机对照临床试验表明，与SARS
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CoV
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2Hu
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1毒株相比，疫苗对VOC的有效性降低。基于佐剂蛋白的COVID
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19疫苗NVX
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CoV2373在英国 (B.1.1.7占主导地位)的有效性为89％，但在南非(B.1.351占主导地位)的有效性仅为49％。腺病毒载体COVID
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19疫苗ChAdOx1对B.1.351变种的有效性仅为10％。辉瑞疫苗接种者对B.1.351变种的有效性为75％，而对Hu
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1的有效性为95％。Coronavac是基于Hu
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1 毒株的灭活疫苗，接种该疫苗的受试者未检测到针对P.1的中和抗体滴度。
[0007]虽然有一些令人鼓舞的证据表明，Hu
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1 COVID
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19疫苗可能会预防由VOC引起的严重疾病和死亡，但对任何传播率上升的COVID
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19疾病的疫苗有效性较低，可能会使实现群体免疫特别困难，全球COVID
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19疫苗短缺可能会进一步加剧这一问题。如果不能得到有效控制，SARS
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CoV
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2VOC在全球的迅速传播可能会导致新的目标变种或可能包含新的逃逸突变的VOC的继续出现，例如印度变种(B.1.617)，它与2021年春季 COVID
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19病例的大规模激增同时出现，现已被世卫组织宣布为新的VOC。该谱系的 B.1.617.2变种被命名为Delta。最近，在南非首次发现的B.1.1.529变种被重新命名为 Omicron。
[0008]在这些情况下，必须迅速评估再次加强剂策略，以增强对VOC的中和抗体应答，并开发可能提供优化的广泛保护和交叉中和特性的第二代COVID
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19疫苗。
[0009]在一些实施方案中，本文公开了包含多种重组多肽的蛋白质，每种重组多肽包括连接到胶原的C
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末端前肽的冠状病毒表面抗原，其中重组多肽的C
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末端前肽形成多肽间二硫键。该重组多肽或蛋白质可作为免疫原例如疫苗使用。
[0010]在一些实施方案中，本文公开了重组亚单位疫苗，其包括来自冠状病毒(例如 SARS
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CoV
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2德尔塔(B.1.617.2)的S蛋白或其片段的胞外域(例如，没有跨膜和细胞质结构域)，其在框内与能够形成二硫键连接的同源三聚体的胶原的C
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前肽融合。由此产生的重组亚单位疫苗(例如S
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三聚体)可以从转染的细胞中表达和纯化，并且预期为三聚体形式的天然构象。这解决了当病毒抗原以可溶性形式表达为重组肽或蛋白质而没有跨膜和/或细胞质结构域时经常遇到的病毒抗原错误折叠问题。这种错误折叠的病毒抗原不能忠实地保持天然的病毒抗原构象，并且常常不能产生中和抗体。
[0011]在一些实施方案中，冠状病毒是严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS
‑ꢀ
CoV
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1)、SARS冠状病毒2(SARS
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CoV
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2)、SARS样冠状病毒、中东呼吸综合征(MERS) 冠状病毒(MERS
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CoV)、MERS样冠状病毒、NL63
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CoV、229E
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CoV、OC43
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CoV、 HKU1
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CoV、WIV1
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CoV、MHV、HKU9
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CoV、PEDV
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CoV或SDCV。
[0012]在前述任一实施方案中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种三聚体融合蛋白，包括可溶性冠状病毒SARS
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CoV
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2德尔塔(B.1.617.2)表面抗原或其片段、变体或突变体，该可溶性冠状病毒表面抗原或其片段、变体或突变体连接到胶原的C
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末端部分，该胶原的C
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末端部分形成二硫键连接的三聚体，从而形成该三聚体融合蛋白。2.根据权利要求1所述的三聚体融合蛋白，该三聚体融合蛋白包括选自由SEQ ID NO:85
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92组成的组的重组多肽。3.根据权利要求1或2所述的三聚体融合蛋白，用于预防冠状病毒感染，可选地该冠状病毒感染包括SARS
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CoV
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2Hu
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1、阿尔法、贝塔、伽马、德尔塔、缪、奥密克戎和其它SARS
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CoV
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2毒株中的任意一种或几种感染。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的三聚体融合蛋白，在没有佐剂的情况下施用，可选地该三聚体融合蛋白作为初始剂(primary series)，额外剂(additional dose)，和/或同源或异源加强剂(booster dose)使用，例如第一剂，第二剂，第三剂，第四剂，和/或更多剂，可选地该初始剂，额外剂，或异源加强剂与其它重组亚单位疫苗、纳米颗粒疫苗、mRNA疫苗、DNA疫苗、腺病毒载体疫苗、和灭活病毒疫苗中的任意一种或几种配合使用，可选地该三聚体融合蛋白在没有佐剂的情况下作为初始剂使用，该初始剂包括第一针和第二针,可选地该三聚体融合蛋白在没有佐剂的情况下作为额外剂使用，该额外剂包括第三针，第四针，和/或更多针,可选地该三聚体融合蛋白在没有佐剂的情况下作为同源或异源加强剂使用，该同源或异源加强剂包括第三针，第四针，和/或更多针。5.根据权利要求1
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3中任一项所述的三聚体融合蛋白，其中该三聚体融合蛋白与佐剂一起施用，可选地该三聚体融合蛋白作为初始剂(primary series)，额外剂(additional dose)，和/或同源或异源加强剂(booster dose)使用，例如第一剂，第二剂，第三剂，第四剂，和/或更多剂，可选地该初始剂，额外剂，或异源加强剂与其它重组亚单位疫苗、纳米颗粒疫苗、mRNA疫苗、DNA疫苗、腺病毒载体疫苗、和灭活病毒疫苗中的任意一种或几种配合使用，可选地该初始剂，额外剂，和/或同源或异源加强剂中的佐剂可独立地包括：含铝佐剂，例如含明矾和/或氢氧化铝的佐剂；含寡核苷酸的佐剂，例如含CpG寡脱氧核苷酸(CpG
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ODN)的佐剂；含TLR9激动剂的佐剂；含可代谢油、α
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生育酚、和/或聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(吐温
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80)的佐剂，例如水包油乳液形式的含角鲨烯、α
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生育酚、和吐温
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80和/或Span 85的佐剂；或任意一种所述佐剂的组合，可选地该三聚体融合蛋白与佐剂一起作为初始剂使用，该初始剂包括第一针和第二针，该佐剂包括Alum和含CpG寡脱氧核苷酸(CpG
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ODN)的佐剂和/或水包油乳液形式的含角鲨烯、α
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生育酚、和吐温
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80和/或Span 85的佐剂,可选地该三聚体融合蛋白与佐剂一起作为额外剂使用，该额外剂包括第三针，第四针，和/或更多针，该佐剂包括Alum和含CpG寡脱氧核苷酸(CpG
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ODN)的佐剂和/或水包油乳液形式的含角鲨烯、α
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生育酚、和吐温
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80和/或Span 85的佐剂,可选地该三聚体融合蛋白与佐剂一起作为同源或异源加强剂使用，该同...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁果，梁朋，宿丹梅，
申请(专利权)人：四川三叶草生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：