一种检测土壤中芳基硫酸酯酶活性的分析方法技术

本发明专利技术涉及一种检测土壤中芳基硫酸酯酶活性的分析方法：１）分别称取土样置于２ｎ个三角瓶中，向三角瓶中加入４ｍｌ缓冲溶液，向第一组ｎ个三角瓶中加入１ｍｌ底物对硝基苯硫酸钾溶液，第二组ｎ个三角瓶作为对照组，摇匀，盖好瓶塞后恒温培养；２）培养结束后，向三角瓶中加入４ｍｌ碱性三羟基氨基甲烷溶液和１ｍｌ氯化钙溶液终止反应并显色，并向第二组对照组加入１ｍｌ底物溶液，混匀，过滤；３）在４１０ｎｍ处比色测定滤液的吸光度值Ａ；４）根据标准曲线计算对硝基苯酚含量，进而计算芳基硫酸酯酶酶活性。本发明专利技术简化了操作步骤，减少了实验过程中的不确定性；减少对设备要求的依赖性；方法准确度高，易操作；结果稳定可靠，重现性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及土壤中芳基硫酸酯酶活性的测定，具体地说是一种检测土壤 中芳基硫酸酯酶活性的分析方法。
技术介绍
土壤中的芳基硫酸酯酶能将在土壤硫代谢过程中形成的有机硫酸酯酯 水解成硫酸盐，参与有机硫的释硫过程，成为可被微生物和作物利用的有效态。在pH4 — 9的土壤中均有芳基硫酸酯酶，多以积累态存在。芳基硫酸酯酶可水解对硝基苯磷酸盐，通过比色法测定反应后释放的对 硝基苯酚的含量，来估算芳基硫酸酯酶的活性。R-P-S03- + H20芳基硫酸酯酉l R—OH + H++ SO, 土壤中芳基硫酸酯酶活性的强弱影响到土壤硫代谢过程中硫素营养的 大小，间接影响硫肥的利用效率。土壤芳基硫酸酯酶对土壤硫素的有效性 具有重要作用，可以表征土壤有机硫酸酯的转化方向和强度。土壤中芳基 硫酸酯酶的活性受土壤条件如水分、温度、土壤质地等的强烈影响，同时 也受农田耕作制度、管理措施以及不同作物的影响。因此，对土壤中芳基 硫酸酯酶活性的检验具有重要的意义。目前有关芳基硫酸酯酶活性的测定 虽然已经形成一个相对可靠的方法，但仍然具有一定的缺陷，造成不同土 壤类型测定的差异性，以及不同培养批次的差异性和不确定性，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测土壤中芳基硫酸酯酶活性的分析方法，其特征在于：　１）分别称取１ｇ－２ｇ鲜土样品２ｎ份分别置于２ｎ个三角瓶中，ｎ≥３，分成二组，每组ｎ个，向２ｎ个三角瓶中加入４－８ｍＬ　ｐＨ＝５．７５－５．８５乙酸缓冲溶液，向第一组ｎ个三角瓶中加入 １－２ｍＬ　２５－５０ｍ　ｍｏＬ.Ｌ↑［－１］的底物对硝基苯硫酸钾工作液，第二组ｎ个三角瓶作底物试剂对照，混匀，盖好瓶塞，放在３６．５－３７．５℃恒温培养中恒温培养１－２ｈ；　２）培养结束后，加入４－８ｍＬ　０．４９－０．５１ｍｏＬ.Ｌ↑ ［－１］碱性ＴＨＡＭ（三羟基氨基甲烷）溶液和１－２ｍＬ　０．４９－０．５１ｍｏＬ.Ｌ↑［－１］氯化钙溶液，并向第二组...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉兰，陈利军，武志杰，陈振华，
申请(专利权)人：中国科学院沈阳应用生态研究所，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]