SOCS1缺陷的免疫细胞制造技术

本发明专利技术涉及SOCS1缺陷的工程化免疫细胞。优选地，所述工程化免疫细胞还包含特异性结合靶抗原的基因工程化的抗原受体。本发明专利技术还涉及用于获得基因工程化免疫细胞的方法，其包括抑制免疫细胞中SOCS1的表达和/或活性的步骤；并且进一步任选包括在于在所述免疫细胞中引入特异性结合靶抗原的基因工程化抗原受体的步骤。本发明专利技术还涵盖所述工程化免疫细胞，其用于过继性治疗，尤其是用于治疗癌症。尤其是用于治疗癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】SOCS1缺陷的免疫细胞


[0001]本专利技术涉及过继性疗法领域。本专利技术提供具有增强的体内扩增、存活和功能性的SOCS1缺陷的免疫细胞。

技术介绍

[0002]过继性T细胞疗法(ATCT)，包括用重组T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)或肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)工程化的T细胞，正成为有力的癌症疗法。
[0003]体外生产过程能够对具有复杂的感知
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应答行为的CD4和CD8 T细胞活性药物的异源混合物进行遗传重编程(Lim et June 2017)。尽管单独的CD8或CD4 T细胞可发挥显著的治疗作用(Freitas et Rocha 2000)，但共同注射两种亚型通常是优化和持续抗肿瘤活性的关键要求(Linnemann,Schumacher,et Bendle 2011；Sadelain 2015；Borst et al.2018)。CD4 T细胞显示多效性和可塑性，可通过两种辅助细胞增强抗肿瘤免疫应答(Corthay et al.2005；Bos et Sherman 2010；Z.Zhu et al.2015)和细胞毒性功能(Xie et al.2010；Quezada et al.2010；Kitano et al.2013；et al.2020a)。
[0004]然而，活化的CD4和CD8 T细胞在其体内增殖和持续的能力方面不同。虽然CD8 T细胞经历广泛和自主的克隆扩增，但CD4 T细胞需要重复的抗原触发并且在早期分裂中表现出增殖停滞，导致约10
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20倍更少的扩增(Homann,Teyton,et Oldstone 2001；Foulds et al.2002；Seder et Ahmed 2003；Ravkov et Williams 2009)。
[0005]CD4和CD8 T细胞扩增的数量和持续时间的差异不是由于外部信号或对资源的竞争(参见上述参考文献)。相反，通过比较初始和抗原经验的(Ag
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exp)CD4 T细胞在抗原刺激后进入免疫应答，若干研究报道了Ag
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exp CD4 T细胞特异性减少它们自身的增殖并表现出降低的IL2产生(Foulds et al.2002；Merica et al.2000；MacLeod,Kappler,et Marrack 2010；Helft et al.2008)。本专利技术人先前已经开发了再现了正在进行的免疫应答过程中Ag
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exp CD4 T
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细胞的功能失调性扩增的体内模型。在这种生理学相关模型中，可推广到若干CD4 TCR
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转基因(Tg)T细胞，Ag
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exp CD4 T
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细胞扩增被固有地消除，而原始CD4 T细胞增殖被维持，这证明缺乏Ag
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exp CD4增殖与引发不足无关(Helft et al.2008)。他们先前报道的强抑制是Ag特异性的，在第2天(Ag消失前很久)开始，并且既不是由于外在因素，如调节性T细胞(Treg)、缺乏抗原呈递细胞(APC)培养，也不是由于对Ag的竞争(Helft et al.2008)。相反，他们表明Ag
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exp CD4 T细胞被固有的、活性的和显性的现象所阻止，这不能通过提供新的Ag
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加载的DC来克服。
[0006]在过继性T细胞疗法(ATCT)的情况下，其中T细胞在工程化过程之前在体外被活化，Ag
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exp CD4 T
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细胞可在回忆条件下在体内变成限制性亚群，损害有效的保护性免疫应答(Homann,Teyton,et Oldstone 2001)。涉及这种有限扩增的潜在分子机制是未知的，但可干扰ATCT功效，因为小剂量的T细胞输注到患者中。
[0007]因此，仍然需要在过继转移后表现出增强的扩增能力和存活的工程化免疫细胞，特别是工程化T细胞。还仍然需要具有改进的功能效力，特别是具有改进的细胞毒性潜力的
工程化T细胞，其将支持有效和大规模的癌症治疗。
[0008]此外，自体T细胞的制备是冗长、昂贵的并且通常效率低。为了确保作为药物的ATC疗法的稳定建立，来自健康供体的良好表征的、库存的和预制的治疗细胞将解决这些限制。因此，开发不被受体免疫系统排斥的有效同种异体T细胞的努力满足了重要的临床需要。
[0009]因此，本专利技术人正在研究T细胞对宿主免疫消除的固有抗性，目的是从健康供体产生通用细胞疗法。尽管自体治疗性CART
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细胞的使用迄今为止已经产生了突出的临床数据(Neelapu et al.2017；Maude et al.2018)，其具有某些众所周知的缺点。
[0010]首先，复杂的个性化制备降低了它们的可扩展性(Graham et al.2018)。此外，当前的制备过程需要大约3周(et al.2018)，这限制了它们的可用性，尤其是对于患有高度增殖性疾病的患者(Depil et al.2020)。最后，自体T细胞效力可能受到来自肿瘤微环境的先前治疗路线或免疫抑制的负面影响(Thommen et Schumacher 2018)。
[0011]相反，尽管使用来自健康供体的同种异体T细胞产物(HLA错配的)允许立即获得标准化的T细胞批次，改进了它们的功效(多种细胞修饰、靶的组合)，降低了它们的成本和工业化过程(Lin et al.2019)，但这与两个主要困难相关联。首先，同种异体T细胞的转移可引起危及生命的疾病，即由供体T淋巴细胞诱导的移植物抗宿主疾病(GVHD)。预防它的一个策略是TCRα恒定(TRAC)基因的遗传失活。其次，TCR阴性同种异体T细胞仍能被非自身HLA识别并被宿主的免疫系统迅速清除，这将限制它们的抗肿瘤活性。对此，已经提出在通用型CAR
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T细胞输注之前用化疗或辐射进行淋巴耗尽，以延迟排斥，直到受体免疫系统恢复(Gattinoni et al.2005)，但它们与明显的毒性和成问题的病毒再活化有关(Chakrabarti,Hale,et Waldmann 2004)。
[0012]由于HLA
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I分子是免疫排斥的关键介质，另一种提议的策略是对于在细胞表面上形成功能性HLA I类分子是必不可少的β2
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微球蛋白的遗传破坏(Poirot et al.2015；D.Wang et al.2015；Torikai et al.2013)。然而，这些细胞可能成为对HLA表达降低(缺失自身机制)敏感的NK细胞的靶标(Bern et al.2019)。
[0013]预防NK介导的排斥的解决方案可依赖于HLA
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E分子(Gornalusse et al.2017)，抑制性复合物CD94/NGK2A的配体(Braud et al.1998)或HLA
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G(通常由细胞滋养层表达，与本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.工程化免疫细胞，其是SOCS
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1缺陷的。2.根据权利要求1所述的工程化免疫细胞，其进一步是至少一种额外的蛋白质，特别是FAS、Suv39h1和/或β2m缺陷的，任选其中所述细胞是至少SOCS1和FAS缺陷的。3.根据权利要求1或2中任一项所述的工程化免疫细胞，其还包含特异性结合靶抗原的基因工程化的抗原受体。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的工程化免疫细胞，其是T细胞或NK细胞。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的工程化免疫细胞，其是CD4+或CD8+T细胞。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的工程化免疫细胞，其分离自受试者。7.根据权利要求6所述的工程化免疫细胞，其中所述受试者罹患癌症，或处于罹患癌症的风险中。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞中SOCS
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1、SOCS1和FAS、SOCS
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1和Suv39h1或SOCS1、Suv39h1和FAS的活性和/或表达被选择性地抑制或阻断。9.根据权利要求1
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7中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞表达编码非功能性SOCS
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1蛋白的SOCS
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1核酸，并且任选其中所述工程化免疫细胞还表达编码非功能性Suv39h1蛋白的Suv39h1核酸、编码非功能性FAS蛋白的FAS核酸和/或编码非功能性...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：国家医疗保健研究所，
类型：发明
国别省市：