【技术实现步骤摘要】
O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及一种病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用,特别涉及一种O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用,本专利技术属于医药
技术介绍
[0002]口蹄疫是由口蹄疫病毒(foot
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and
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mouth disease virus,FMDV)引起主要经济畜种猪牛羊发病的重大动物疫病,OIE将其列为必须通报的动物疫病,我国将其列为重点防范的一类动物传染病。我国采取疫苗免疫与扑杀相结合的策略有效防控口蹄疫疫情。随着我国经济实力的不断增强、国际地位的不断提升,我国制定了逐步净化和根除口蹄疫的目标。要实现此目标,安全、高效、可鉴别诊断的口蹄疫新型疫苗是不可或缺的重要技术手段,虽然采用基因操作手段可获得标记口蹄疫灭活疫苗,但是整个研究和生产过程中仍然需要动用活病毒,需要高级别的生产设施,生物安全风险依然存在。
[0003]为了解决口蹄疫灭活疫苗研发和生产存在生物安全风险、成本高和疫苗成分复杂等关键科学问题。利用反向疫苗学技术,以病原的保护性抗原和/或抗原表位为材料,研发环境友好、生物安全、可鉴别诊断的高效基因工程亚单位疫苗已成为疫苗研究的新方向。但目前大多数基因工程疫苗以保护性抗原为研究对象,通过真核/原核表达系统表达重组蛋白,以获得的重组蛋白多形式,包括重组蛋白混合物,重组融合蛋白等相对简单的形式;也包括表达完整的病毒衣壳蛋白,或分段表达重组蛋白体外组装成VLP。但这些蛋白表达形式存在诸多的缺点 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原,其特征在于,所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原是选取O型口蹄疫病毒5个拓扑型的代表毒株O/Tibet/CHA/99,O/Mya98/BY/2010,O/HN/CHA/93、O/XJPS/CHA/2017和Cathay型口蹄疫病毒的保护性抗体的线性抗原表位,依次顺序串联,相邻表位间引入GS间隔子,形成5个毒株的表位串联结构:O/Tibet/CHA/99
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O/Mya98
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O/HN/CHA/93
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O/XJPS/CHA/2017
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Cathay,命名为OB5;然后将O/Tibet/CHA/99,O/Mya98/BY/2010,O/HN/CHA/93、O/XJPS/CHA/2017的抗原表位依次顺序串联,形成4毒株的表位串联结构:O/Tibet/CHA/99
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O/Mya98
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O/HN/CHA/93
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O/XJPS/CHA/2017,命名为OB4;最后将上述设计的OB5多表位串联基因,利用间隔子序列GGGGS与SpyCather和噬菌体AP205基因的依次串联后,再通过GGSGGSGGS间隔子序列与OB4串联,形成OB5
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SpyCather
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AP205
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OB4重组抗原蛋白,该重组蛋白自组装成病毒样颗粒抗原。2.如权利要求1所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原,其特征在于,OB5的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,OB4的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。3.如权利要求1所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原,其特征在于,所述的病毒样颗粒抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。4.编码权利要求1
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3任一项所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原的核酸,优选的,所述的核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。5.一种制备权利要求1
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3任一项所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)口蹄疫病毒O型多表位嵌合DNA设计:选取O型口蹄疫病毒5个拓扑型的代表毒株O/Tibet/CHA/99,O/Mya98/BY/2010,O/HN/CHA/93、O/XJPS/CHA/2017和Cathay型口蹄疫病毒的保护性抗体的线性抗原表位,依次顺序串联,相邻表位间引入GS间隔子,形成5个毒株的表位串联结构:O/Tibet/CHA/99
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O/Mya98
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O/HN/CHA/93
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O/XJPS/CHA/2017
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Cathay,命名为OB5,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;然后将O/Tibet/CHA/99,O/Mya98/BY/2010,O/HN/...
【专利技术属性】
技术研发人员:邵军军,刘伟,常惠芸,郭慧琛,
申请(专利权)人:中国农业科学院兰州兽医研究所,
类型:发明
国别省市:
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