包含免疫球蛋白G降解酶的冻干制剂及其制备工艺制造技术

本发明专利技术提供一种免疫球蛋白G降解酶(IdeS)的冻干制剂。本发明专利技术还提供用于制备所述冻干制剂的液体药物组合物和冻干方法，以及通过复配所述冻干制剂获得的复配制剂。所述冻干制剂获得的复配制剂。

【技术实现步骤摘要】
包含免疫球蛋白G降解酶的冻干制剂及其制备工艺


[0001]本专利技术提供一种免疫球蛋白G降解酶IdeS的冻干制剂。具体而言，所述冻干制剂可以复配为用于胃肠外施用的复配制剂，如复配注射剂。本专利技术还涉及用于制备所述冻干制剂的液体组合物和冻干方法。

技术介绍

[0002]酿脓链球菌的免疫球蛋白G降解酶(Immunoglobulin G
‑
degrading enzyme of Streptococcus pyogenes，IdeS)是一种典型的半胱氨酸水解酶。IdeS最初从血清型为M1的A组链球菌菌株中被分离得到。IdeS具有极高的底物特异性，仅识别IgG铰链区的特定位点(CH1结构域和CH2结构域之间)进行切割，以产生F(ab
’
)2和Fc片段。IdeS能够切割多种动物来源的IgG，其底物特异性、切割位点的专一性使其在抗体药物或Fc融合蛋白药物的结构解析中得到广泛应用。
[0003]近年来，IdeS的酶切特性也得到了开发和利用。例如，基于IdeS能够切割免疫球蛋白的能力，将IdeS作为一种免疫抑制剂应用于人类免疫疾病及器官移植等领域。另一方面，IdeS作为一种蛋白类制剂/药物，需要能够稳定保存的配方组成和剂型，具有延长货架期，保证经过一定保存时间后仍然具有理想的纯度与活性。稳定的制剂也便于运输和贮存。
[0004]目前未见报道关于IdeS蛋白酶制剂的研究。开发IdeS蛋白酶制剂的挑战在于，作为一种半胱氨酸蛋白酶，IdeS蛋白酶的活性中心为游离半胱氨酸，因而可以预见其蛋白稳定性较差，容易形成二聚体或高聚体。
[0005]蛋白类药物的制剂形式多为注射液或冻干粉剂。无法冻干的蛋白采用液体注射剂剂型，通常需要超低温冻存(一般小于
‑
60℃)，但超低温冻存的保存和运输成本较高。因此，如何稳定IdeS蛋白酶的构象、保证酶活性、避免产生二聚体或高聚体、延长常温或低温下的保存时间，成为制备稳定IdeS制剂过程中的挑战。

技术实现思路

[0006]专利技术人对IdeS酶的配方组成及剂型(保存体系)进行了系统研究，确定了一种能够稳定保存的IdeS酶制剂的配方组成，其适合于制备为冻干制剂并稳定保持，并且在复配之后具有理想的活性，由此完成了本专利技术。
[0007]因此，第一方面，本专利技术提供一种液体药物组合物，其包含：
[0008](a)免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；
[0009](b)冻干保护剂；
[0010](c)表面活性剂；
[0011](d)金属螯合剂；和
[0012](e)缓冲剂。
[0013]优选地，所述液体药物组合物的pH为7.2～7.5。
[0014]在第一方面的优选实施方案中，所述液体药物组合物包含：
[0015](a)8～12mg/ml的免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；
[0016](b)0.1mg/ml～0.5mg/ml的聚山梨酯80；
[0017](c)1.5mmol/L～3mmol/L乙二胺四乙酸二钠；
[0018](d)3％的甘露醇和3％的蔗糖；和
[0019](e)磷酸二氢钠
‑
磷酸氢二钠缓冲剂；并且
[0020]所述液体药物组合物的pH为7.2～7.5。
[0021]所述液体药物组合物特别适合用于制备IdeS酶的冻干制剂。
[0022]第二方面，本专利技术提供一种IdeS酶的冻干制剂的制备方法，包括对第一方面的液体药物组合物按照如下条件进行冻干：
[0023](1)在5℃至
‑
50℃进行2至10小时的预冻；
[0024](2)在
‑
20℃至
‑
30℃进行4至25小时的一次升华；
[0025](3)在
‑
5℃至35℃进行4至18小时的二次升华。
[0026]在第二方面的一个具体实施方案中，所述冻干如下进行：
[0027](1)预冻阶段，依次设置
[0028]设定温度：5℃，设定时间5min，保持时间30min；
[0029]设定温度：
‑
45℃，设定时间50min，保持时间120min；
[0030]设定温度：
‑
10℃，设定时间30min，保持时间120min；
[0031]设定温度：
‑
45℃，设定时间30min，保持时间120min；
[0032](2)一次升华阶段，依次设置
[0033]设定温度：
‑
30℃，设定时间180min，保持时间900min，真空度：0.2mbar；
[0034]设定温度：
‑
20℃，设定时间60min，保持时间300min，真空度：0.2mbar；
[0035](3)二次升华阶段，依次设置
[0036]设定温度：
‑
5℃，设定时间60min，保持时间120min，真空度：0.2mbar；
[0037]设定温度：15℃，设定时间60min，保持时间120min，真空度：0.2mbar；
[0038]设定温度：30℃，设定时间30min，保持时间120min，真空度：0.1mbar；
[0039]设定温度：35℃，设定时间60min，保持时间300min，真空度：0.1mbar；
[0040]设定温度：35℃，设定时间30min，保持时间120min，真空度：0.0mbar。
[0041]第三方面，本专利技术提供一种IdeS酶的冻干制剂，其在单一容器中包含：
[0042](a)免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；
[0043](b)冻干保护剂；
[0044](c)表面活性剂；
[0045](d)金属螯合剂；和
[0046](e)缓冲剂。
[0047]优选地，所述冻干制剂通过第二方面的方法获得。
[0048]第四方面，本专利技术提供一种IdeS酶的复配制剂，其在单一容器中包含：
[0049](a)免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；
[0050](b)冻干保护剂；
[0051](c)表面活性剂；
[0052](d)金属螯合剂；
[0053](e)缓冲剂和
[0054](f)至少1ml的无菌水。
[0055]第五方面，本专利技术提供第一方面的液体药物组合物用于制备冻干制剂的方法。
[0056]本专利技术至少具有如下优势：
[0057]本专利技术首次对IdeS的配方及剂型进行了探索，确定了IdeS的稳定冻干制剂的配方，及冻干工艺。
[0058]在所述冻干制剂中，IdeS能够长期稳定储存并保持较高的酶活性。所述冻干工艺提供的IdeS冻干产品外观合格，水分<2％，有利于长期保存，为IdeS作为一种生物药品的工业化生产及商业化应用奠定了基础。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于制备冻干制剂的液体药物组合物，其包含以下组分或由以下组分组成：(a)免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；(b)冻干保护剂；(c)表面活性剂；(d)金属螯合剂；和(e)缓冲剂。2.权利要求1中所述的液体药物组合物，其中所述IdeS的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；所述冻干保护剂为蔗糖和/或甘露醇；所述表面活性剂为聚山梨酯80；所述金属螯合剂为乙二胺四乙酸二钠；和/或所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂。3.权利要求2所述的液体药物组合物，其包含：8
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12mg/ml，优选10mg/ml的IdeS；2
‑
10％，优选3
‑
8％的蔗糖，和/或2
‑
10％，优选3
‑
8％的甘露醇；0.1
‑
0.5mg/ml的聚山梨酯80；1.5
‑
3.0mmol/L的乙二胺四乙酸二钠；4.0
‑
14.0mmol/L的磷酸二氢钠；和/或11.0
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36.0mmol/L的磷酸氢二钠。4.权利要求1
‑
3中任一项所述的液体药物组合物，其pH为7.0
‑
7.5，优选约pH 7.2。5.一种冻干制剂，其包含在单一容器中，并且包含以下组分：(a)免疫球蛋白G降解酶(IdeS)；(b)冻干保护剂；(c)表面活性剂；(d)金属螯合...

【专利技术属性】
技术研发人员：王双，胡倩，刘亚辉，高飞，赵小平，刘宾，
申请(专利权)人：上海天泽云泰生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：