一种用于无血清悬浮培养的HEK293细胞及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种适应无血清培养基环境的悬浮培养的HEK293细胞及其用于病毒生产的应用，同时披露了所述HEK293细胞的制备方法。所述方法包括对HEK293细胞的无血清悬浮驯化培养，和对具有高产性质的HEK293细胞的筛选。所述方法制备的HEK293细胞可以在不含抗结团剂的无血清培养基中悬浮培养，且倍增时间短，生长密度高，病毒包装效率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学领域，具体涉及一种适应无血清培养悬浮培养的hek293细胞及其应用。

技术介绍

1、人胚胎肾(human embryonic kidney，hek)293细胞系，又称hek293、293细胞，起源于人体胚肾细胞，是1973年产生的人胚肾293细胞。hek293细胞具有转染效率高，易于培养等特点，糖基化模式同源，所以广泛用于体外检测、生产重组蛋白和病毒。

2、目前，病毒载体的制备主要以hek293作为宿主细胞，利用阳离子聚合物等化学试剂进行瞬时转染而进行。目前，大部分已经上市的基因和细胞治疗药物采用的仍然是贴壁培养，hek293细胞也受限于贴壁培养。贴壁培养一般需要采用含有胎牛血清的基础培养基，需要使用可贴壁的培养容器，无法在大规模工业化生产的过程对病毒载体的生产规模进行放大，投入的设备及人工将极大的增加病毒载体的制备成本，无法满足对产量和质量提高的要求。同时，对动物来源成分培养基成分的依赖，也会在基因和细胞治疗产品的安全性方面带来不可避免的风险。

3、另外，在细胞和基因治疗领域中，不同的病毒载体类型、质粒类型本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种人胚胎肾293(HEK293)细胞，所述HEK293细胞的保藏编号为：CCTCC NO：C2023253。

2.根据权利要求1所述的HEK293细胞，所述细胞适应无血清和/或悬浮培养。

3.一种用于生产病毒的方法，包括将病毒载体导入权利要求1所述的HEK293细胞。

4.根据权利要求3所述的方法，所述病毒为载体病毒。

5.根据权利要求4所述的方法，所述载体病毒选自以下的一种或多种：慢病毒、逆转录病毒、莫洛尼鼠白血病病毒（MMLV）、腺病毒和腺相关病毒（AAV）。

6.根据权利要求5所述的方法，所述AAV包括天然AAV血...

【技术特征摘要】

1. 一种人胚胎肾293(hek293)细胞，所述hek293细胞的保藏编号为：cctcc no：c2023253。

2.根据权利要求1所述的hek293细胞，所述细胞适应无血清和/或悬浮培养。

3.一种用于生产病毒的方法，包括将病毒载体导入权利要求1所述的hek293细胞。

4.根据权利要求3所述的方法，所述病毒为载体病毒。

5.根据权利要求4所述的方法，所述载体病毒选自以下的一种或多种：慢病毒、逆转录病毒、莫洛尼鼠白血病病毒（mmlv）、腺病毒和腺相关病毒（aav）。

6.根据权利要求5所述的方法，所述aav包括天然aav血清型衣壳和/或基因工程改造的aav血清型衣壳。

7.根据权利要求6所述的方法，所述aav包括选自以下的一种或多种血清型衣壳：aav1、aav2、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10、aav12、aavrh10、aav-php.eb、aav-psp.s、aav-dj、aav...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟爽，陆美林，李虎林，张小利，刘亚辉，李宏宇，刘宾，
申请(专利权)人：上海天泽云泰生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：