LncRNALINC01748在胶质瘤诊断、治疗和提高药物敏感性中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及LncRNA LINC01748在胶质瘤诊断、治疗和提高药物敏感性中的应用。本发明专利技术首次发现LncRNA LINC01748在胶质瘤中的表达情况显著高于正常脑组织，敲减LncRNA LINC01748后，胶质瘤细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力均产生了显著下降；同时能够提高胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性。上述发现能够用于胶质瘤的诊断、治疗、提高靶向药物敏感性等产品的制备中，具有较大的应用前景。景。

【技术实现步骤摘要】
LncRNA LINC01748在胶质瘤诊断、治疗和提高药物敏感性中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及LncRNA LINC01748在胶质瘤诊断、治疗和提高药 物敏感性中的应用。

技术介绍

[0002]胶质瘤(Glioma)是最常见的颅内原发恶性肿瘤，约占脑部肿瘤的70％以上，因其具有 侵袭生长特征及解剖位置的特殊性，手术无法将其完全切除，患者常表现为高复发率、高致 残率及低治愈率，预后较差。近年来，虽然胶质瘤治疗在免疫治疗、基因治疗及溶瘤病毒疗 法等方面取得了一定进展，但大都局限于临床试验中。
[0003]替莫唑胺(temozolomide，TMZ)因其良好的血脑屏障通透性以及突出的治疗效果，为 恶性脑胶质瘤外科手术切除后治疗的必要首选化疗药物，但仍有相当一部分胶质瘤患者对替 莫唑胺表现为原发性或继发性耐药，而导致化疗失败。更重要的是，越来越多的研究表明： 替莫唑胺耐药机制涉及DNA损伤修复、细胞信号通路异常、肿瘤微环境等，其耐药机制复杂。因此，深入探究胶质瘤替莫唑胺耐药的分子机制，在分子水平上为胶质瘤患者实行个体 化精准治疗提供理论依据，已成为亟待解决的热点与难点。
[0004]长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA。越来越多的 研究结果发现，多种长链非编码RNA的异常表达与人类重大疾病密切相关。近期发表的大量 研究结果显示，lncRNA在肿瘤细胞中有着举足轻重的调控作用，特定的lncRNA的异常表达 直接影响到肿瘤的发生发展、转移、耐药等过程。同时，已有一些研究表明单个lncRNA的 表达情况能够为肿瘤诊断和预后提供帮助。在实际临床工作中，一些癌症的诊断已经开始使 用分子标志物。
[0005]目前，有关lncRNA在胶质瘤的发病机制、疾病诊断及治疗方面的研究依然非常欠缺。 因此，胶质瘤中长链非编码RNA的研究具有很重要的价值和意义，特别是寻找胶质瘤发生、 发展相关的lncRNA对肿瘤的诊断和评估预后、指导个体化精准治疗具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的在于提供或其抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的应用。
[0007]LncRNA LINC01748的序列如下所记载：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NR_14650 8.1，具体为：
[0008][0009][0010]申请人发现敲减/沉默LncRNA LINC01748后，胶质瘤细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭 能力均产生了显著下降。本申请由中国国家自然科学基金(No.81860664，82060680)
以及江 西省自然科学基金(NO.20202BABL216080，20192BAB215063)资助。
[0011]上述发现表明LncRNA LINC01748在胶质瘤发病过程及化学治疗中发挥了重要作用，可 以作为诊疗胶质瘤的新的分子标记和药物靶点，从而指导临床医生进行干预和治疗，提高患 者的生存率和生存质量，具有较大的应用前景。
[0012]其中，优选所述抑制剂为siRNA
‑
LINC01748；所述siRNA
‑
LINC01748的靶序列为 GACCTTCGGAGCTGAATAA。
[0013]本专利技术的第二个目的在于提供检测LncRNA LINC01748的试剂在制备胶质瘤诊断试剂或 胶质瘤诊断试剂盒中的应用。
[0014]其中，优选所述检测LncRNA LINC01748的试剂包括引物对，所述引物对的正向引物的 序列为：F:5
′‑
TCATCCCACATTTGGAGCAC
‑3′
；反向引物的序列为： R:5
′‑
CCCATGTAGCAGACTCCTACTCA
‑3′
。
[0015]本专利技术的第三个目的在于提供一种胶质瘤诊断评估试剂盒，所述试剂盒包括上述检测 LncRNA LINC01748的试剂。
[0016]优选地，上述试剂盒还包括TB green、ddH2O和cDNA模板。其中，反应体系为20μL， 正向引物和反向引物的浓度均为10μM。其中，20μL的反应体系具体为：TB green 10μL， 正向引物和反向引物各0.8μL，ddH2O 6.4μL，cDNA模板2μL。
[0017]本专利技术的第四个目的在于提供LncRNA LINC01748或其抑制剂在制备提高胶质瘤细胞对 伊立替康的敏感性的产品中的应用。优选所述抑制剂为siRNA
‑
LINC01748；所述 siRNA
‑
LINC01748的靶序列为GACCTTCGGAGCTGAATAA。专利技术人发现敲减/沉默LncRNALINC01748后，能够增加替莫唑胺的药物敏感性。
[0018]本专利技术的有益效果为：本专利技术首次发现敲减LncRNA LINC01748后，胶质瘤细胞的增殖 能力、迁移能力、侵袭能力均产生了显著下降；同时能够提高胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感 性。上述发现能够用于胶质瘤的诊断、治疗、提高靶向药物敏感性等产品的制备中，具有较 大的应用前景。
附图说明
[0019]图1所示为lncRNA LNC01748在胶质瘤组织与正常脑组织中表达情况的结果图；
[0020]图2所示为lncRNA LINC01748在不同胶质瘤细胞HS683、U87、T98G、U251中的表达情况的结果图。
[0021]图3所示为shRNA
‑
LINC01748对LINC01748的RNA表达情况的作用结果图；
[0022]图4所示为敲减LINC01748对胶质瘤细胞增殖能力影响的结果图；
[0023]图5所示为干扰LINC01748对胶质瘤细胞增殖能力影响的结果图；
[0024]图6所示为敲减LINC01748对胶质瘤细胞迁移能力影响的结果图；
[0025]图7所示为干扰LINC01748对胶质瘤U251、T98G细胞侵袭能力影响的结果图；
[0026]图8所示为干扰LINC01748对胶质瘤细胞U251、T98G替莫唑胺药物敏感性影响的结果 图；
[0027]图9所示为干扰LINC01748对胶质瘤细胞U251、T98G替莫唑胺药物敏感性影响的结果 图。
[0028]图10所示为干扰LINC01748对胶质瘤细胞U251、T98G替莫唑胺药物敏感性影响的
结 果图。
具体实施方式
[0029]以下将结合实施例和附图对本专利技术的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以 充分地理解本专利技术的目的、方案和效果。
[0030]实施例1：
[0031]一、胶质瘤中差异表达的lncRNA筛选
[0032]1、TCGA数据库分析筛选IncRNA
[0033]方法：申请人前期通过胶质瘤及正常脑组织(3vs3)进行lncR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.LncRNA LINC01748或其抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制剂为siRNA
‑
LINC01748；所述siRNA
‑
LINC01748的靶序列为GACCTTCGGAGCTGAATAA。3.检测LncRNA LINC01748的试剂在制备胶质瘤诊断试剂或胶质瘤诊断试剂盒中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，检测LncRNA LINC01748的试剂包括引物对，所述引物对的正向引物的序列为：F:5
′‑
TCATCCCACATTTGGAGCAC
‑3′
；反向引物的序列为：R:5
′‑
CCCATGTAGCAGACTCCTACTCA
‑3′
。5.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕巧莉，纪玉龙，万泽文，邓雨晨，陈淑慧，秦道钢，
申请(专利权)人：江西省肿瘤医院江西省第二人民医院，江西省癌症中心，
类型：发明
国别省市：