宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒及使用方法和系统技术方案

本发明专利技术公开宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒及使用方法和系统。本申请的试剂盒特定标志物的组合实现高灵敏和特异性的宫颈高级别病变检测，从而能够早期发现和干预宫颈癌。此外，本申请的试剂盒采用酶法甲基化检测避免重亚硫酸氢盐反应严苛的不足，并通过优化条件及结果解读规则，大大提升了宫颈高级别病变检测的灵敏度和特异度。级别病变检测的灵敏度和特异度。级别病变检测的灵敏度和特异度。

【技术实现步骤摘要】
宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒及使用方法和系统


[0001]本专利技术涉及宫颈病变检测领域，具体地涉及宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒及使用方法和系统。

技术介绍

[0002]宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤之一，其历程漫长，从癌前病变发展到浸润癌，有5
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10年的潜伏期。规范的体检可预防90％以上的宫颈癌发生，扼杀在“癌前病变”的萌芽状态。目前临床上常用的宫颈癌筛查方法包括醋酸染色肉眼观察、细胞学检查、HPV DNA检测。其中，HPV DNA检测的灵敏度较高，但大部分HPV为一般性感染，不会发展为宫颈癌前病变或宫颈癌，给妇女造成了不必要的恐慌，也浪费了医疗资源。因此，亟需一种可以识别真正高风险的生物学标志物。
[0003]研究表明宿主基因甲基化水平随宫颈病变严重程度的增加而升高，可以作为宫颈癌及癌前病变筛查的生物学标志物。目前已公开了基于甲基化水平诊断宫颈癌相关疾病的方法。例如，中国专利公布CN111893183A公开了一种用于宫颈癌检测的DNA甲基化qPCR试剂盒及使用方法。该试剂盒通过检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，包括试剂条、容器1和容器2；其中，所述试剂条设置有至少一个小管，所述小管的内壁固定有含错配碱基的甲基化特异性引物对，所述容器1容纳有含3
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吗啉丙磺酸、α
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KG、NaCl、二硫苏糖醇和抗坏血酸的缓冲液，所述容器2容纳有2
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甲基吡啶
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硼烷。2.根据权利要求1所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂条设置有至少6个小管，且各小管的内壁分别固定有对应于一个甲基化位点或基因的引物对。3.根据权利要求2所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，所述甲基化位点或基因选自ZNF671、ASTN1、DLX1、ITGA4、RXFP3和SOX17组成的组。4.根据权利要求2所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，所述引物对选自SEQ ID NO:1
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12所示的序列。5.根据权利要求1所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，进一步包括容纳TET酶和β
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葡糖基转移酶复合酶的容器3。6.根据权利要求1所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，进一步包括容纳硫酸亚铁铵溶液的容器4。7.根据权利要求1所述的宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测试剂盒，其特征在于，进一步包括容纳qPCR反应液的容器5。8.一种用于宫颈高级别病变相关基因甲基化qPCR检测的反应体系，其特征在于，包括反应液1、反应液2和反应液3中的至少之一，其中：反应液1包含40
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60mM 3
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吗啉丙磺酸、0.5
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1.5mMα
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KG、40
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60mM NaCl、0.5
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1.5mM二硫苏糖醇和1.5
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2.5mM抗坏血酸、0.1
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1mM TET酶、0.1
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1mMβ
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葡糖基转移酶和90
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150mM硫酸亚铁铵；反应液2包含1
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10M 2
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甲基吡啶
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硼烷和1
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【专利技术属性】
技术研发人员：夏小凯，程鲁向，程天龄，杜金凤，
申请(专利权)人：上海捷诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：