一种乳腺癌的生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种乳腺癌的生物标志物及其应用，所述生物标志物为LINC00524。本发明专利技术通过检测癌组织与正常组织中的差异表达基因，发现了LINC00524在乳腺恶性肿瘤中表达上调，说明其可以作为靶点应用于乳腺癌的检测和治疗。同时，通过体外实验证明了干扰了LINC00524后，可明显抑制乳腺癌细胞的增殖能力，使其增殖能力减弱。同时，乳腺癌细胞的迁移侵袭能力下降，且明显促进乳腺癌细胞的凋亡，细胞凋亡量增加。表明LINC00524与乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭有关，说明LINC00524可有效作为一种生物标志物，用于预防或治疗乳腺癌。用于预防或治疗乳腺癌。用于预防或治疗乳腺癌。

【技术实现步骤摘要】
一种乳腺癌的生物标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种乳腺癌的生物标志物及其应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌是指乳腺上皮细胞在多种致癌因子的作用下，发生增殖失控的恶性肿瘤病变，其是威胁女性健康乃至生命的重大疾病，且日渐呈现出年轻化的趋势。早期患者中，30％可发展为晚期乳腺癌，晚期乳腺癌患者5年生存率仅为20％。而乳腺癌细胞在化疗过程中产生的耐药会导致很多患者在化疗后仍会出现在短期内复发或转移。乳腺癌治疗的关键在于早发现、早诊断和早治疗。
[0003]细胞癌变的重要基础就是原癌基因激活和抑癌基因失活，其在肿瘤的发生发展及转移中起到关键作用。随着现代分子细胞技术的不断进步，发现新的癌基因和抑癌基因不仅能够作为一种诊断及预后标志物，并且还可以参与肿瘤的生长和转移。同时，可以显著提高药物治疗的有效率，降低肿瘤转移与耐药的风险，延长患者生存期，降低癌症的死亡率奠定了坚实的基础。
[0004]最近的研究表明在哺乳动物基因组中只有不到2％的基因能够编码蛋白，其它大约98％的基因都编码为非编码RNA。非编码RNA根据其长度，一般分为两类，一类为非编码小RNA(Small non
‑
coding RNA，sncRNA)，其转录长度少于200个核苷酸，另一类为长链非编码RNA(Long non
‑
coding RNA，lncRNA)，是长度超过200个核苷酸且不编码蛋白质的RNA。最初，lncRNA被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物，并无生物学功能。但是，目前越来越多的研究表明，lncRNA在癌症中有重要作用，在组织和血浆中稳定表达，且在肿瘤中特异性表达，其表达表现出一定的组织特异性和复杂的生物学功能，主要表现在：表观遗传调控、基因表达调控、核染色质修饰、X染色体失活、印迹基因、核
‑
质转运、DNA甲基化、RNA拼接和翻译调控等多方面，并与癌症的侵袭和迁移密切相关。
[0005]lncRNA的主要特点包括：第一，lncRNA通常较长，具有mRNA样结构，经过剪接，具有polyA尾巴与启动子结构，分化过程中有动态的表达与不同的剪接方式；第二，有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNA表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，lncRNA表达量也会变化；第三，调控多样性，lncRNA可从染色质重塑、转录调控及转录后加工等多种层面实现对基因表达的调控；lncRNA启动子同样可以结合转录因子，局部染色质组蛋白同样具有特征性的修饰方式与结构特征；第四，序列上保守性较低，只有约12％的lncRNA可在人类之外的其它生物中找到；在肿瘤与其他疾病中有特征性的表达方式。并且由于lncRNA参与X染色体沉默、染色体修饰和基因组修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等过程，因此lncRNA是临床医学研究中的热点分子。其可以通过不同的分子生物学机制调控编码基因的表达，参与疾病相关的信号通路，从而对疾病的发生、发展及治疗有重要作用。大量的研究所示，肿瘤细胞中某些特定lncRNA的表达水平发生异常改变，这种异常表达的lncRNA能够作为肿瘤诊断的分子标记物和潜在的药物靶点。但是目前针对lncRNA在癌症的诊断和治疗还处于起步阶段，因此，急需筛选获得乳腺癌发生发展异常表达的lncRNA及其
相关的核酸分子作为调控靶点，从而通过对与乳腺癌相关的lncRNA进行调控，实现有效预防和治疗乳腺癌，进一步实现癌症的精准医疗，从而实现乳腺癌的早发现早治疗。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供一种乳腺癌的生物标志物及其应用，通过荧光定量PCR检测到LINC00524在乳腺癌细胞中的表达明显升高，故检测LINC00524的表达水平可用于诊断乳腺癌，从而衍生出在乳腺癌中检测LINC00524表达水平的产品。
[0007]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0008]一种乳腺癌的生物标志物，所述生物标志物为LINC00524。
[0009]上述的生物标志物在制备用于早期诊断或预测乳腺癌的产品中的应用。
[0010]优选地，所述产品包括通过RT
‑
PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测LINC00524的表达水平的试剂。
[0011]优选地，所述试剂为特异性识别LINC00524的探针或特异性扩增LINC00524的引物。
[0012]优选地，所述特异性扩增LINC00524的引物具有如SEQ ID No.1
‑
2所示的序列。
[0013]优选地，所述产品包括诊断试剂盒、芯片。
[0014]上述的生物标志物的抑制剂在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用。
[0015]优选地，所述生物标志物的抑制剂为针对LINC00524的RNAi，针对LINC00524的shRNA慢病毒，针对LINC00524的sgRNA，针对LINC00524的ZFN，针对LINC00524的TALEN元件，或针对LINC00524的同源重组载体。
[0016]一种药物组合物，包括上述的生物标志物的抑制剂，及其药学上可接受的载体。
[0017]本专利技术的有益效果如下：
[0018]本专利技术通过LINC00524在乳腺癌细胞中的表达明显升高，可以用于乳腺癌的检测，建立了体外LINC00524干扰乳腺癌细胞模型、体外细胞增殖、迁移系列实验研究，阐述了干扰了LINC00524可明显抑制乳腺癌细胞的增殖能力，使其增殖能力减弱，同时，乳腺癌细胞的迁移侵袭能力下降，且明显促进乳腺癌细胞的凋亡，细胞凋亡量增加。因此LINC00524可作为一种有效的乳腺癌生物标志物，并可制备LINC00524特异性表达抑制剂治疗乳腺癌。
附图说明
[0019]图1为实施例1中荧光定量PCR检测LINC00524在乳腺癌细胞MCF
‑
7、MDA
‑
MB
‑
231中的表达情况；
[0020]图2为实施例2中荧光定量PCR检测在MAD
‑
MB
‑
231中LINC00524的干扰效率；
[0021]图3为实施例2中CCK
‑
8细胞增殖实验检测LINC00524对乳腺癌细胞增殖的影响；
[0022]图4为实施例2中细胞划痕实验检测LINC00524对乳腺癌细胞迁移的影响。
具体实施方式
[0023]下面结合附图与具体实施例对本专利技术做进一步详细说明。
[0024]LINC00524位于14号染色体上，其具体位置为chr14:101405993
‑
101436874，该基因产生的长链非编码RNA，sequence name为ENST00000555860，其他转录名为
OTTHUMT00000414718.1、NONHSAT040020，其长度为281bp，在转录的表观遗传调控中发挥作用。其包括本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳腺癌的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为LINC00524。2.权利要求1所述的生物标志物在制备用于早期诊断或预测乳腺癌的产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过RT
‑
PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测LINC00524的表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂为特异性识别LINC00524的探针或特异性扩增LINC00524的引物。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述特异性扩增LINC00524的引物具有如SEQ ID No.1
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国华，孙祥琳，耿劲松，杨欢，张馨予，骆倩倩，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：