ACADL在制备三阴乳腺癌分化诱导诊断试剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了ACADL在制备三阴乳腺癌分化诱导诊断试剂中的应用。发明专利技术人研究发现靶向抑制ACADL具有显著的分化诱导效果。用ACADL的shRNA处理的三阴乳腺癌细胞如MDA

【技术实现步骤摘要】
ACADL在制备三阴乳腺癌分化诱导诊断试剂中的应用


[0001]本专利技术属于诊断领域，具体涉及ACADL在制备三阴乳腺癌分化诱导诊断试剂中的应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，2015年中国癌症统计数据显示，乳腺癌的发病率位居我国女性恶性肿瘤的首位，且有发病年龄年轻化的趋势，是造成45岁以下女性肿瘤患者死亡的首要原因。尽管手术切除和靶向治疗为部分患者带来了较大的获益，但对于晚期或三阴类型乳腺癌患者仍缺乏有效的治疗方法。因此，寻找乳腺癌尤其是三阴乳腺癌的治疗靶点，探究新的治疗策略具有重要的应用价值。
[0003]分化差是肿瘤组织相较于正常组织的一个显著特征，分化诱导的治疗策略为恶性肿瘤的治疗开辟了一条崭新的途径。相对于传统的基于“肿瘤细胞不可逆转”观念而采取的手术、化疗和放疗等治疗手段，肿瘤分化诱导治疗（differentiation therapy ）的特点在于不杀伤正常细胞，而是通过诱导恶性肿瘤细胞重新分化，改变其恶性生物行为，停止恶性增生，成为正常或接近正常的细胞，最终使恶性肿瘤得以缓解，甚至治愈。
[0004]大多数三阴乳腺癌为分化状态差的基底样细胞类型（basal
‑
like subtype），对传统的放化疗和激素治疗不敏感，三阴乳腺癌的这一未分化的重要特征提示诱导分化治疗可能是治疗三阴乳腺癌的一个重要策略。然而，目前为止，关于三阴乳腺癌分化诱导治疗的精准诊断及治疗分子标记物尚不清楚。
[0005]已有文献(如Mamoor S. ACADL expression associates with survival in triple negative breast cancer[J]. 2021.等)表明ACADL表达与基底亚型乳腺癌的远处无转移生存期显着相关，基底亚型乳腺癌是一种与三阴性乳腺癌共享显着重叠的分子亚型。ACADL可能与生物标志物或作为了解三阴性乳腺癌病因或进展感兴趣的分子相关，但是未有文献表明ACADL与三阴乳腺癌分化相关。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供ACADL在制备三阴乳腺癌分化诱导诊断试剂中的应用。
[0007]本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供：定量试剂组在制备三阴乳腺癌诊断或辅助诊断试剂中的应用，定量试剂组包括定量ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67表达量的试剂。
[0008]在一些应用的实例中，所述三阴乳腺癌为未分化的三阴乳腺癌。
[0009]在一些应用的实例中，ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67表达量为其蛋白表达量、基因表达量或mRNA表达量。
[0010]在一些应用的实例中，试剂检测的对象为肿瘤样本。
[0011]在一些应用的实例中，定量检测ACADL的引物为：上游引物F：5
’‑
TGCAATAGCAATGACAGAGCC
‑3’
下游引物R：5
’‑
CGCAACTACAATCACAACATCAC
‑3’
。
[0012]在一些应用的实例中，定量检测GATA3的引物为：上游引物F：5
’‑
ACCACAACCACACTCTGGAGGA
‑3’
下游引物R：5
’‑
TCGGTTTCTGGTCTGGATGCCT
‑3’
。
[0013]在一些应用的实例中，定量检测KRT5的引物为：上游引物F：5
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CCAAGGTTGATGCACTGATGG
‑3’
下游引物R：5
’‑
TGTCAGAGACATGCGTCTGC
‑3’
。
[0014]在一些应用的实例中，定量检测KRT14的引物为：上游引物F：5
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TGAGCCGCATTCTGAACGAG
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下游引物R：5'
‑ꢀ
GATGACTGCGATCCAGAGGA
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3'。
[0015]在一些应用的实例中，定量检测KI67的引物为：上游引物F：5
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ACGCCTGGTTACTATCAAAAGG
‑3’
下游引物R：5
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CAGACCCATTTACTTGTGTTGGA
‑3’
。
[0016]本专利技术的第二个方面，提供：一种三阴乳腺癌诊断或辅助诊断系统，包括：定量装置：用于定量样本中ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67的表达量；诊断装置：基于ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67的表达量，确定三阴乳腺癌风险；结果输出装置：输出所述诊断装置的分析结果。
[0017]在一些诊断系统的实例中，所述样本为肿瘤样本。
[0018]本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种新的潜在的针对ACADL高表达，GATA3低表达，KRT5、KRT14和KI67高表达引起的未分化的三阴乳腺癌的诊断策略，联合检测基因ACADL与基因GATA3、KRT5、KRT14和KI67用于诊断未分化三阴乳腺癌，为其靶向干预治疗提供潜在的诊断标准和治疗靶标。
附图说明
[0019]图1是抑制ACADL诱导三阴乳腺癌细胞分化的实验结果。
[0020]图2是抑制ACADL抑制乳腺肿瘤生长的实验结果。
具体实施方式
[0021]乳腺癌细胞三维培养模型能在体外相较二维培养更好地模拟乳腺癌细胞的生物学特征和微环境。在三维培养基质胶中，正常的乳腺细胞由单个细胞首先经过增殖变为一个规则的球状结构，随后位于中间的细胞发生凋亡，最终形成一个类似正常乳腺管腔的中空的规则球体；分化较好的乳腺癌细胞形成一个较规则的实心圆球体；而分化差的三阴乳腺癌细胞如MDA
‑
MB
‑
231、BT
‑
549形成具有多个伪足的不规则星状组织结构。基于不同分化水平乳腺癌细胞在三维培养中形成的球体形态不同，专利技术人筛选了大于1000个基因的代谢文库，发现靶向抑制ACADL具有显著的分化诱导效果。用ACADL的shRNA处理的三阴乳腺癌细
胞如MDA
‑
MB
‑
231在三维培养中形成规则的圆球体，且乳腺分化的标志物GATA3表达水平上调，去分化标志物KRT5、KRT14和增殖标志物KI67水平下调；动物成瘤时，肿瘤体积明显减小。以上结果说明靶向抑制ACADL能有效诱导三阴乳腺癌细胞分化。
[0022]本专利技术的第一个方面，提供：定量试剂组在制备三阴乳腺癌诊断或辅助诊断试剂中的应用，定量试剂组包括定量ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67表达量的试剂。
[0023]在一些应用的实例中，所述三阴乳腺癌为未分化的三阴乳腺癌。
[0024]在一些应用的实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.定量试剂组在制备三阴乳腺癌诊断或辅助诊断试剂中的应用，定量试剂组包括定量ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67表达量的试剂。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述三阴乳腺癌为未分化的三阴乳腺癌。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，ACADL、GATA3、KRT5、KRT14和KI67表达量为其蛋白表达量、基因表达量或mRNA表达量。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，试剂检测的对象为肿瘤样本。5.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，定量检测ACADL的引物为：上游引物F：5
’‑
TGCAATAGCAATGACAGAGCC
‑3’
下游引物R：5
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CGCAACTACAATCACAACATCAC
‑3’
。6.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，定量检测GATA3的引物为：上游引物F：5
’‑
ACCACAACCACACTCTGGAGGA
‑3’
下游引物R：5
’‑
TCGGTTTCTGGTCTGGATGCCT
‑3’
。7.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，定量检测KRT5的引物为：上游引物F...

【专利技术属性】
技术研发人员：‑，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：