检测Siglec融合突变基因及GBS致病基因的试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术提供了检测Siglec融合突变基因以及GBS致病基因的试剂盒及其检测方法，用于对早产易感基因Siglec5/14融合突变及与GBS致病基因快速联合检测，可以有效评估妇科生殖道感染、孕产妇早产和新生儿感染风险，解决现有试剂盒仅对该条件致病菌进行检测，与疾病关联特异性差的问题，利用该试剂盒进行检测更快速、灵敏，检测过程全程闭管，避免电泳区分的额外操作，成本低，便于推广。便于推广。便于推广。

【技术实现步骤摘要】
检测Siglec融合突变基因及GBS致病基因的试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及化学生物
，具体涉及检测Siglec融合突变基因及GBS致病基因的试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]当女性的天然免疫系统的中性粒细胞表面行使免疫应答的激活受体Siglec
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14在同源重组过程中与相似抑制受体Siglec
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5的发生融合突变，使得中性粒细胞仅存在Siglec
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5基因，如图1所示，Siglec5/14受体是在与早产、胎儿感染和胎儿损伤关键病原体B族链球菌(GBS)发生免疫应答时关键受体。传统上仅是通过检测是否存在GBS来评估风险，忽略了免疫系统在与病原体互作的免疫应答方面的作用。
[0003]早产是指妊娠满28周至不足37周间分娩者，早产儿的并发症包括各种身体问题，如视力或听力障碍、慢性肺病、心血管疾病、神经发育迟缓和行为缺陷。在我国早产的发病率大约是10％左右，早产儿中围产儿死亡率较正常足月儿高4
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6倍。大约40％的早产是由于阴道内的微生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测Siglec融合突变基因以及GBS致病基因的试剂盒，其特征在于：用于对早产易感基因Siglec5/14融合突变的检测及与GBS致病基因快速联合检测，该试剂盒含有：反应液I
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Siglec5/14突变检测用引物探针混合液：Siglec
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GAP
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F、Siglec
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GAP
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R、Siglec
‑
GAP
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P、Siglec
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L
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F、Siglec
‑
L
‑
R、Siglec
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S
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F、Siglec
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S
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R和Siglec
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S
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P；反应液II
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GBS检测用引物、探针以及内参混合液：GBS
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F、GBS
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R、GBS
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P、RNP
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F、RNP
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R、RNP
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P；反应液III
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定量PCR检测GBS用引物、探针混合液：CBA
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F、CBA
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R、LMB
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F、LMB
‑
R、CBA
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P、LMB
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P；反应液IV
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qPCR检测GBS毒力基因检测用引物探针混合液：CPS1
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F、CPS1
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R、CPS2
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F、CPS2
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R、CPS3
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F、CPS3
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R、CPS4
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F、CPS4
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R、CPS1
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P、CPS2
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P、CPS3
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P、CPS4
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P；酶混合液：II Probe qPCR SuperMix；阴性对照：超纯水；阳性对照：含有扩增靶基因片段的人工合成质粒。2.根据权利要求1所述的检测Siglec融合突变基因以及GBS致病基因的试剂盒，其特征在于：Siglec
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GAP
‑
F、Siglec
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GAP
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R为正常Siglec基因之间非编码区序列的检测引物，Siglec
‑
GAP
‑
P为正常Siglec基因之间非编码区序列的检测探针，仅在第二轮qPCR反应时进行；Siglec
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L
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F靶向Siglec14基因启动子区域，为第一轮PCR上游扩增引物；Siglec
‑
L
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R靶向Siglec5基因的下游编码区域，为第一轮PCR下游扩增引物；Siglec
‑
S
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F为第二轮靶向融合突变基因的qPCR上游检测引物，Siglec
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S
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R为第二轮靶向融合突变基因的qPCR下游检测引物；Siglec
‑
S
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P为第二轮靶向融合突变基因的qPCR的检测探针。3.根据权利要求1所述的检测Siglec融合突变基因以及GBS致病基因的试剂盒，其特征在于：检测GBS所用引物及探针为GBS
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【专利技术属性】
技术研发人员：曹洋，汪大为，冯慧军，曾桢，张蕾，王琰，廖秦平，
申请(专利权)人：北京清华长庚医院，
类型：发明
国别省市：