本发明专利技术公开了一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备方法，复合微生物菌剂包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为CGMCC NO.11314。本发明专利技术的复合微生物菌剂中的镰刀菌、哈茨木霉对棉花黄萎病菌具有拮抗作用，乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌为土壤有益菌，其代谢产物中含有生长素、抗菌素、细胞分裂素等作物生长所必需的调节物质，此外还具有抑制黄萎病菌繁殖，功能菌的定殖和生长。功能菌的定殖和生长。
【技术实现步骤摘要】
一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备方法
[0001]本专利技术属于作物病害防治
，具体涉及一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂及其制备和应用。
技术介绍
[0002]棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的棉花土传维管束病害，病原菌通常侵染棉花根部，引起棉花根部乃至全株的病害，造成重大的经济损失，俗称“癌症”病害，国内外尚无理想的防治措施。棉花是新疆重要的经济作物，由于连年重茬连作和棉秆还田，土壤中病残体的积累量越来越大，作为土传病害，棉花黄萎病的发生逐年加重。调查显示，新疆棉花黄萎病发病田占比超过50％，黄萎病已成为制约新疆棉花生产的重要因素。国内外学者开展了大量研究，如培育抗性品种、作物轮作倒茬、开发土壤熏蒸剂和化学杀菌剂，以及最近兴起的微生物制剂。不幸地是，由于寄主抗性种质资源缺乏，还未有高抗的棉花品种；以枯草芽孢杆菌为核心的生防菌，受到土壤环境和气候的影响，防控效果不稳定；化学杀菌剂被迫选为防治棉花黄萎病的主要措施。然而，长期使用化学杀菌剂不仅对生态环境和人类健康构成威胁，还提高了棉花黄萎病菌的抗性。因此，迫切需要研发环境友好型措施来有效控制棉花黄萎病，生物防治以绿色环保，发展潜力大等优势被人们关注并且应用于实践中。研究应用较多的为枯草芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉等。
[0003]前期，本团队利用微生物组学方法，结合宏基因组测序技术，系统分析了健康土壤、健康棉株的内生和根际的微生物群落结构，微生物与病原菌之间的互作，与病害发生危害的关系。通过生态防治理论，将内生拮抗真菌与根际有益细菌进行组合，组成一个复合微生物组群，将之释放到土壤中，集促生、占位、拮抗、诱导免疫于一体，对于防治棉花黄萎病，提高棉花经济效益具有重要意义。
技术实现思路
[0004]本专利技术所要解决的技术问题为：如何提供一种防治棉花黄萎病的复合微生物菌剂，制备方法。
[0005]本专利技术的技术方案为：一种复合微生物菌剂，包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为CGMCC NO.11314，该菌株已经在申请号为CN201610425079.1的专利中公开，本专利技术对哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌菌种的来源没有特殊限定。
[0006]进一步地，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2～4︰3～5︰1～2︰1～2︰1～2。优选为2︰4︰1︰1︰1。
[0007]进一步地，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于5
×
109CFU/g。
[0008]进一步地，所述生长辅料为壳聚糖或黄腐酸中的一种或它们的任意混合。
[0009]进一步地，所述干燥剂为膨润土或凹凸棒土中的一种或它们的任意混合。
[0010]本专利技术还公开了一种复合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0011](1)分别制备镰刀菌、哈茨木霉种子液和乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌种子液。
[0012](2)将麦麸或玉米糁中的一种或它们的任意混合作为基质，控制含水量为30～50％，加入步骤(1)中制备的微生物种子液，微生物种子液的接菌量为20～50ml种子液/kg基质。
[0013](3)将步骤(2)中添加了微生物种子液的基质进行发酵培养，培养温度为25～35℃，培养时间为5～7天，然后将发酵培养物在35～40℃烘干，粉碎，即获得微生物菌粉。
[0014](4)将步骤(3)中的微生物菌粉与生长辅料、干燥剂混合，获得复合微生物菌剂。
[0015]本专利技术的复合微生物菌剂用于防治棉花黄萎病的用途，将复合微生物菌剂滴灌施用于棉花根部可以有效防治棉花黄萎病，提高棉花产量、改善纤维品质。具体方法如下：
[0016]将本专利技术的复合微生物菌剂在棉花黄萎病发病初期6月中下旬～7月初，滴灌施用于棉花根部，每次用量0.25～0.75kg/亩，施用1～2次，可以有效防治棉花黄萎病，提高棉花产量、改善纤维品质。
[0017]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0018]本专利技术的复合微生物菌剂中的镰刀菌、哈茨木霉对棉花黄萎病菌具有拮抗作用，乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌为土壤有益菌，其代谢产物中含有生长素、抗菌素、细胞分裂素等作物生长所必需的调节物质，此外还具有抑制黄萎病菌繁殖，功能菌的定殖和生长。
[0019]通过球镰刀菌、哈茨木霉拮抗真菌和乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌有益细菌的协同作用增强了对黄萎病菌的抑制效果，同时提高了土壤中微生物的多样性，使土壤微生态达到平衡，进而增强了棉花根系养分的吸收及利用效率，提高了根系活力，进一步提高棉花产量，改善纤维品质。
[0020]本专利技术的制备方法工艺简单，易于操作，制得的复合微生物菌剂对环境无污染、成本低。
具体实施方式
[0021]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。
[0022]本专利技术提供一种复合微生物菌剂，包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌。所述镰刀菌保藏编号为CGMCC NO.11314，该菌株已经在申请号为CN201610425079.1的专利中公开，本专利技术对哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌菌种的来源没有特殊限定。
[0023]本专利技术中，优选的，镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2～4︰3～5︰1～2︰1～2︰1～2，更优选的为2︰4︰1︰1︰1。所述微生物复合菌剂的总活菌数不低于5
×
109CFU/g。
[0024]在本专利技术中，微生物种子液制备方法：将镰刀菌、哈茨木霉的菌种分别液体活化培
养2天，活化培养基以l L计，包括NaNO
3 2g、K2HPO
4 1g、KCI 0.5g、MgSO4·
7H2O 0.5g、FeSO
4 0.01g、蔗糖30g，活化温度为25℃，获得镰刀菌、哈茨木霉的种子液。将乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌分别液体活化培养1天，活化培养基以l L计，包括蛋白胨10g、酵母膏5g、NaCl 10g，活化温度为28℃，获得乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的种子液。
[0025]在本专利技术中，微生物发酵基质制备方法：将麦麸、玉米糁的一种或它们的任意混合作为基质，优选的为麦麸和玉米糁混用；控制含水量为30～50％，优选的为35～40％；加入镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌微生物种子液，微生物种子液的接菌量为20～50ml种子液/kg基质。...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，包括以下重量份数的原料：微生物菌粉20～60份、生长辅料40～70份、干燥剂2～8份，所述微生物菌粉包括镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌，所述镰刀菌保藏编号为CGMCC NO.11314。2.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2～4︰3～5︰1～2︰1～2︰1～2。3.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述镰刀菌、哈茨木霉、乳酸菌、蜡状芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌的活菌数之比为2︰4︰1︰1︰1。4.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述生长辅料为壳聚糖或黄腐酸中的一种或它们的任意混合。5.根据权利要求1所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述干燥剂为膨润土或凹凸棒土中的一种或它们的任意混合。6.根据权利要求1
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5所述的一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于5
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【专利技术属性】
技术研发人员：张亚林，王大光，刘元元，车磊，梁伟，阿山，
申请(专利权)人：中国农业科学院棉花研究所，
类型：发明
国别省市：
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