副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主HA合成并增强HA应用效果的后生元制造技术

本发明专利技术公开了副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主HA合成并增强HA应用效果的后生元，属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明专利技术提供的副干酪乳酪杆菌CCFM1293制备的后生元具有促进宿主HA合成并增强HA应用效果的作用：促进肠道细胞、皮肤细胞的HA合成；增加衰老小鼠皮肤、关节、脑等组织的HA合成；增加衰老小鼠皮肤、关节、脑等组织的HA水平；增强HA提升小鼠背部皮肤的角质层含水量、提升小鼠背部的皮肤弹性、提升衰老小鼠皮肤的GSH含量和CAT、GSH

【技术实现步骤摘要】
副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主HA合成并增强HA应用效果的后生元


[0001]本专利技术涉及副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主HA合成并增强HA应用效果的后生元，属于微生物
及医药


技术介绍

[0002]透明质酸(Hyaluronic acid,HA)又名玻尿酸，是一种由N
‑
乙酰氨基葡萄糖和D
‑
葡萄糖醛酸的双糖重复单位组成的一种线性糖胺聚糖。广泛存在哺乳动物机体内，尤其在皮肤、眼、关节、心、脑等组织含量丰富。HA以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如抗氧化、保湿、润滑关节、眼球等，调节血管壁的通透性、调节蛋白质、水电解质的扩散及转运、缓解疼痛、促进创伤愈合等。随着机体的年龄增长，体内的HA含量逐渐下降，导致机体出现许多不舒服症状，如眼花、皮肤干燥、有细纹，关节僵硬等问题，所以需要通过一些手段增加组织内的HA含量。
[0003]CN111902149A公开了一种促进HA合成的方法，其方法是利用多糖衍生物或其盐与透明质酸产生细胞接触，从而可实现促进该透明质酸产生细胞中透明质酸的合成。CN115068377A提供了一种蝉花提取物在促进成纤维细胞合成透明质酸中的应用，将其制备得到的蝉花提取物用于化妆品中，可提高皮肤中HA的含量。CN 113081878A公开了一种用于促进皮肤HA合成的组合物，所述组合物包括0.01
‑
5.0重量份L
‑
乳酸。CN 105582036B专利技术了一种利用蒲公英提取物或者其分馏物有效促进HA的生成以及HAS的表达的方法。上述专利都是利用常规物质直接刺激细胞，实现细胞HA合成的目的。
[0004]HA是由定位于细胞质膜内表面的透明质酸合成酶(Hyaluronic acid synthase，HAS)通过交替连接UDP
‑
N
‑
乙酰氨基葡萄糖(UDP
‑
GlcNAc)和UDP
‑
D
‑
葡萄糖醛酸(UDP
‑
GlcA)，从而产生分子量约为3
‑4×
103kDa的HA聚集体。随后，新合成的HA聚合物通过硫酸化或部分异构化为葡萄糖醛酸而没有进一步的修饰，并通过各自膜整合域形成的通道分泌到细胞表面。在这个过程中，HAS的活性和UDP
‑
GlcNAc和UDP
‑
GlcA前体的供应是影响HA的合成的两个关键因素。在哺乳动物体内，HAS包含3种同工酶：HAS1、HAS2和HAS3，这些HAS亚型具有相似的结构和氨基酸序列，都能催化合成不同大小的HA，是HA合成过程的限速酶。另外，UDP
‑
GlcNAc和UDP
‑
GlcA两个前体的合成是通过糖酵解副产物G6P开始合成经由一系列酶催化合成的，其中UDP
‑
GlcA合成过程的受UDP
‑
葡萄糖脱氢酶(UDP
‑
Glucose dehydrogenase,UGDH)限速酶调控。由此可知，调控UGDH、HAS1、HAS2、HAS3的酶活性可促进HA的合成，从而达到提升宿主HA水平的目的。

技术实现思路

[0005]本专利技术要提供一种能由副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)制备的促进宿主HA合成并增强HA应用效果的后生元。
[0006]本专利技术通过细胞实验筛选能够调控UGDH、HAS1、HAS2、HAS3酶活性的后生元，有针
对性地筛选能够刺激HA合成的后生元，从外源性补充HA以提升组织部位的HA含量转变为促进内源性HA的合成使其直在组织部位发挥作用，避免了陷入HA的吸收难题，另外，后生元是一类灭活的益生菌，比活益生菌具有更广泛、安全的应用，可与不同分子或受体相互作用产生抗氧化、免疫调节、抗菌作用等，也能够影响宿主代谢和信号通路，从而产生特定的生理反应。
[0007]本专利技术提供了一株副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293，所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293已于2022年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62971，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼。
[0008]所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293是从健康人体粪便中分离得到的，该菌株经测序分析，将测序得到的序列在NCBI中进行核酸序列比对，得到比对结果后，鉴定结果为副干酪乳酪杆菌。
[0009]所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293在显微镜下细胞呈现轻微不规则、圆形末端、非运动的弯曲杆菌，接种于MRS培养基上培养48h后的菌落一般呈乳白色，光滑凸起，直径为0.5
‑
2mm的圆形。
[0010]所述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293为革兰氏阳性菌，兼性厌氧，喜温，最适生长温度为35～40℃，最适生长pH为6.0
‑
7.0。
[0011]本专利技术提供了一种组合物，所述组合物包含上述副干酪乳酪杆菌CCFM1293和/或上述副干酪乳酪杆菌CCFM1293制备的后生元。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述后生元包括死细胞、发酵上清液、菌体裂解物和/或发酵液。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵液的制备方法为将上述副干酪乳酪杆菌CCFM1293接种于发酵培养基中培养获得菌液，进行热处理后获得发酵液。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，所述热处理的条件为为60～95℃，25～35min。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述菌体裂解物的制备方法为，将所述副干酪乳酪杆菌CCFM1293接种于发酵培养基中培养获得的菌液进行高压均质，离心得到菌体裂解物。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述死细胞为，将所述副干酪乳酪杆菌CCFM1293接种于发酵培养基中培养获得的菌液进行离心获得的菌泥沉淀，经热处理或冻干后得到的灭活菌体细胞。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，将所述副干酪乳酪杆菌CCFM1293接种于发酵培养基中培养获得的菌液离心获得的上清。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述粉剂为将制备得到的副干酪乳酪杆菌CCFM1293液态后生元经喷雾干燥、真空冷冻干燥、流化床干燥、真空干燥制备的固态粉剂后生元。
[0019]本专利技术提供了上述副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293和/或在制备调控宿主HA含量的产品中的应用。
[0020]在本专利技术的一种实施方式中，所述的调控宿主HA含量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1293，已于2022年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62971，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼。2.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1所述副干酪乳酪杆菌CCFM1293和/或含有权利要求1所述副干酪乳酪杆菌CCFM1293制备的后生元。3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述后生元包括死细胞、发酵上清液、菌体裂解物和/或发酵液，或其经任意干燥方式制备的粉剂。4.一种制备副干酪乳酪杆菌CCFM1293后生元的方法，其特征在于，所述方法为，将权利要求1所述的副干酪乳酪杆菌CCFM1293接种于发酵培养基中培养获得菌液，再将菌液进行热处理和均质裂解后获得后生元。5.权利要求1所述的副干酪乳酪杆菌CCFM1293或权利要求2～3任一所述组合物在促进细胞HA合成中的应用，或在制备预防和/或缓解皮肤衰老的产品中的应用。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔树茂，郑雪丽，毛丙永，唐鑫，张秋香，赵建新，陈卫，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：