一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法技术

本发明专利技术涉及一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，具体包括如下步骤：(1)揭除利多卡因凝胶贴上的防粘膜后粘贴在猪皮的表面，在Franz扩散池中进行透皮试验；(2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，进行匀浆处理，稀释，离心，取上清液过滤，取续滤液作为供试品溶液；(3)采用高效液相色谱方法测定供试品溶液的皮内滞留量。采用本发明专利技术的方法处理猪皮，能够有效将猪皮中滞留的利多卡因提取出来，处理后的猪皮呈现完全溶解状态，具有肉眼可见的优势，主成分利多卡因稳定性好，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏高，测试结果更加准确。试结果更加准确。试结果更加准确。

【技术实现步骤摘要】
一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法


[0001]本专利技术属于药物分析方法
，具体涉及一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法。

技术介绍

[0002]利多卡因凝胶贴为局部外用药，作用部位在角质层内的外用制剂，在药学主要质量特性及制剂微观结构一致的基础上，我们可通过体外释放和体外透皮吸收对比试验来评价自制药和参比制剂的疗效的一致性，需开展体外透皮研究。体外透皮为模拟药品在生理条件下的透皮过程，以部分地反应药品质量与临床治疗的有效性。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是在现有技术的基础上，提供一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法。
[0004]本专利技术的技术方案如下：
[0005]一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，它包括如下步骤：
[0006](1)将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验；
[0007]其中，透皮介质为生理盐水；透皮介质的体积为14.5～15.5ml；透皮介质的温度为30～35℃；转速为200～1000rpm；取样时间为6h；
[0008](2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，所得混悬液加入甲醇稀释后，离心，取上清液过滤，取续滤液作为皮内滞留透皮试验的供试品溶液；
[0009](3)将步骤(2)中所得供试品溶液，采用高效液相色谱方法进行测定，其中，色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶；采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为30～40:70～60；所述流动相A为1～5％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.0～6.0；所述流动相B为甲醇。
[0010]对于本专利技术而言，需要对透皮试验后的猪皮进行处理，具体处理过程如下：将透皮试验后的猪皮加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，处理后的猪皮在匀浆处理的过程中容易被打碎，主成分利多卡因容易被提取出来，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏高，测试结果更加准确。
[0011]在相同的条件下，采用其他方式处理，例如，将透皮试验后的猪皮直接进行匀浆处理、不加人氢氧化钠，仅仅加入水中在65～75℃的温度下浸泡以及加入甲醇进行匀浆处理时，处理后的猪皮在匀浆处理的过程中均难以被打碎，主成分利多卡因不易被提取出来，采用高效液相色谱方法进行测定皮内滞留透皮试验时，皮内滞留量偏低，准确率偏低。
[0012]在本专利技术中，在步骤(2)中，浸泡时的温度为65～75℃，可以但不局限于65℃、68
℃、70℃、72℃或75℃，为了获得更好的提取效果，浸泡时的温度为70℃。
[0013]在一种优选方案中，浸泡时的时间为1～3h，优选为2h。
[0014]进一步地，浸泡时，氢氧化钠溶液的浓度0.05～0.15M为，优选为0.1M。
[0015]浸泡后，进行匀浆处理的过程中，转速为5000～7000rpm，可以但不局限于5000rpm、6000rpm或7000rpm。
[0016]在本专利技术中，在步骤(1)中，取利多卡因凝胶贴裁剪成2cm
×
2cm的方形片(利多卡因以含膏量计)，再将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验。
[0017]进一步地，猪皮在生理盐水中浸泡的时间为20～40分钟；优选为30分钟。
[0018]在一种优选方案中，在Franz扩散池中进行透皮试验时，透皮介质的体积为14.5ml；透皮介质的温度为32℃；转速为500rpm。
[0019]进一步地，透皮介质的接触面积为1.1304cm2。
[0020]在本专利技术中，将步骤(2)中所得供试品溶液采用高效液相色谱方法进行测定，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶，例如，色谱柱为Inertsustion C18。优选地，色谱柱的长度为250mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。
[0021]在色谱分析的过程中，采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为30～40:70～60。优选地，等度洗脱时，流动相A和流动相B的比例为35:65。
[0022]在色谱分析的过程中，采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A为1～5％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.0～6.0；流动相B为甲醇。优选地，流动相A为3％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.5。
[0023]对于本专利技术而言，上述色谱条件还包括：流速为0.8～1.5mL/min，优选为1mL/min；进样量为10～50μl，优选为20μl；检测波长为225～235nm；优选为230nm。
[0024]本专利技术保护的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法用于测定皮内滞留量，通过计算物料平衡来考察利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法的准确性，其中，物料平衡的计算方法如下：物料平衡(％)＝(渗透量+膏体残留量+表皮残留量+皮内滞留量)
÷
试验贴膏的理论含量。
[0025]其中，渗透量的体外透皮试验方法包括如下步骤：
[0026](1)取利多卡因凝胶贴裁剪成2cm
×
2cm的方形片(利多卡因以含膏量计)，再将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验，透皮介质为生理盐水；透皮介质的体积为14.5ml；透皮介质的温度为32℃；转速为500rpm；透皮介质的接触面积为1.1304cm2；取样时间为6h；
[0027](2)取透皮试验完成后的透皮介质，过滤，作为供试品溶液，采用高效液相色谱方法进行测定，色谱条件包括：色谱柱为Inertsustion C18(4.6
×
250mm，5μm)；流速为1mL/min；进样量为20μl；检测波长为230nm；采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为35:65；所述流动相A为3％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.5；所述流动相B为甲醇。
[0028](3)取利多卡因对照品，加混合流动相(流动相A和流动相B的比例为35:65)溶解，
并用生理盐水稀释制成每1ml约含0.05mg的溶液，作为对照品溶液；按照步骤(2)中色谱条件进行测定，计算单位面积渗透量。
[0029]表皮残留量的体外透皮试验方法，是在透皮试验后的猪皮的基础上进行测定，包括如下步骤：
[0030](1)透皮试验后的猪皮，采用甲醇浸湿后的脱脂棉花擦拭整个猪皮表面，将擦试后的脱脂棉花所得的挤出液加入量瓶中，用甲醇多次洗涤挤出后脱脂棉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，它包括如下步骤：(1)将猪皮浸泡在生理盐水中，浸泡后的猪皮的表面用棉布擦干，揭除凝胶贴上的防粘膜后粘贴在擦干后的猪皮的表面上，在Franz扩散池中进行透皮试验；其中，透皮介质为生理盐水；透皮介质的体积为14.5～15.5ml；透皮介质的温度为30～35℃；转速为200～1000rpm；取样时间为6h；(2)将透皮试验后的猪皮，加入氢氧化钠溶液中，在65～75℃的温度下浸泡，浸泡后，在5000～7000rpm的条件下进行匀浆处理，所得混悬液加入甲醇稀释后，离心，取上清液过滤，取续滤液作为皮内滞留透皮试验的供试品溶液；(3)将步骤(2)中所得供试品溶液，采用高效液相色谱方法进行测定，其中，色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶；采用流动相A和流动相B为混合流动相进行等度洗脱，流动相A和流动相B的比例为30～40:70～60；所述流动相A为1～5％冰乙酸溶液，采用氢氧化钠调节pH值至5.0～6.0；所述流动相B为甲醇。2.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(2)中，浸泡时的温度为70℃。3.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，其特征在于，在步骤(2)中，浸泡时的时间为1～3h；优选为2h。4.根据权利要求1所述的利多卡因凝胶贴的体外透皮试验方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍梅，兰清源，辛妮，
申请(专利权)人：南京海纳制药有限公司南京一诺医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：